プロテインキナーゼAuroraによる染色体分配制御の分子基盤

蛋白激酶Aurora调控染色体分离的分子基础

• 批准号: 15023224
• 负责人: 浦野 健
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15023224/
• 关键词: 染色体分離; 細胞周期; Aurora; プロテインキナーゼ; ヒストンH3リン酸化; ヒストンH3メチル化; 修飾特異的モノクローナル抗体

ショウジョウバエや酵母において染色体分離の調節蛋白質として同定されたプロテインキナーゼのヒトホモローグであるAurora-A, Aurora-BおよびAurora-cは様々ながん組織においてDNA増幅や蛋白質の発現増強が高率に認められている。またAurora-Aにおいては造腫瘍能を有することも報告されている。本研究では,Auroraファミリーがヒト細胞においても本当に染色体分配を制御しているかどうかを明らかにし,またその分子基盤を検討した。・AuroraファミリーをGFP融合タンパク質として発現する細胞株を樹立しタイムラプス観察を行い,時間的空間的配置を決定した。・Auroraファミリーの活性化に必須であるリン酸化部位を同定し,リン酸化モノクローナル抗体を作製することにより,時間的空間的な活性化を可視化した(研究業績#1)。・Aurora-Bにより細胞分裂期特異的にヒストンH3の10番目セリンがリン酸化され,さらに9番目リジンのメチル化との間にクロストークが存在することを,修飾特異的モノクローナル抗体を作製することにより証明した(研究業績#2-4)。・開発したアンチセンスDNA法を用い,Aurora-Aもヒト細胞脚も染色体分配に関与することを確認した。本研究により,Auroraファミリーがヒト細胞においても染色体分配を制御していることを明らかとなり,がん治療の新しい分子標的となり得ることが判明した。

Aurora-A, Aurora-B and Aurora-c are the regulatory proteins for chromosome segregation in yeast and yeast. DNA amplification and protein production in yeast are highly regulated. Aurora-A can be found in the report. In this study, we examined the molecular basis of Aurora's genome in the cell. Aurora is the first time that GFP fusion occurs. The cell line is established. The time and space are determined. Aurora's activation requires the identification of sites of acidification, the identification of sites of acidification, and the visualization of activation in time and space (Research Achievement #1).·Aurora-B provides evidence of the existence of a 10-part cell-division-specific antibody to H3 and a 9-part cell-division-specific antibody to H3 (Research Results #2-4). The application of the Aurora-A method to the identification of chromosome distribution in human genome In this study,Aurora was identified as a new molecular target for treatment.

项目成果

Sasagawa Y.et al.: "Caenorhabditis elegans RBX1 is essential for meiosis, mitotic chromosomal condensation and segregation, and cytokinesis."Genes Cells. 8. 857-872 (2003)

Sasakawa Y.等人：“秀丽隐杆线虫RBX1对于减数分裂、有丝分裂染色体浓缩和分离以及胞质分裂至关重要。”Genes Cells。

Nakagawachi T.et al.: "Silencing effect of CpG island hypermethylation and histone modifications on O6-methylguanine-DNA methyltransferase (MGMT) gene expression in human cancer."Oncogene. 22. 8835-8844 (2003)

Nakakawachi T.等人：“CpG 岛高甲基化和组蛋白修饰对人类癌症中 O6-甲基鸟嘌呤-DNA 甲基转移酶 (MGMT) 基因表达的沉默作用。”癌基因。

Yasui, Y., et al.: "Autophosphorylation of a newly identified site of Aurora-B is indispensable for cytokinesis."J.Biol.Chem.. (in press). (2004)

Yasui, Y., 等人：“Aurora-B 新发现的位点的自磷酸化对于胞质分裂是不可或缺的。”J.Biol.Chem..（出版中）。

Mitsuhashi S.et al.: "Usage of tautomycetin, a novel PP1 specific inhibitor, reveals that PP1 is a positive regulator of Raf-1 in vivo."J.Biol.Chem.. 278. 82-88 (2003)

Mitsuhashi S.et al.：“互变霉素（一种新型 PP1 特异性抑制剂）的使用表明 PP1 是体内 Raf-1 的正调节因子。”J.Biol.Chem.. 278. 82-88 (2003)

Higashimoto K.et al.: "Loss of CpG Methylation Is Strongly Correlated with Loss of Histone H3 Lysine 9 Methylation at DMR-LIT1 in Patients with Beckwith-Wiedemann Syndrome."Am.J.Hum.Genet.. 73. 948-956 (2003)

Higashimoto K.et al.：“Beckwith-Wiedemann 综合征患者中 CpG 甲基化的缺失与 DMR-LIT1 组蛋白 H3 赖氨酸 9 甲基化的缺失密切相关。”Am.J.Hum.Genet.. 73. 948-956