ラージGタンパク質シグナル系の遺伝子異常と発癌機構

大G蛋白信号系统的遗传异常与致癌机制

• 批准号: 14026037
• 负责人: 森 正樹
• 金额: $ 4.03万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14026037/
• 关键词: G-protein; Gγ7; 肝癌; 胆管細胞癌; DNAマイクロアレイ; 細胞周期関連遺伝子; p27

【目的】我々は膵癌においてDifferential display法を用い、癌部で発現が抑制される癌関連遺伝子としてG-protein γ7(Gγ7)を同定した(BBRC.246,1998)。Gγ7は三量体G蛋白で、細胞外シグナルの細胞内への伝達に関与する。これまで食道癌、胃癌、大腸癌においてもその発現の減弱を確認したが(Cancer Res.59,1999)、当研究では原発性肝癌におけるGγ7発現を解析し臨床病理学的意義を検討するとともにGγ7遺伝子導入細胞を用いたDNAマイクロアレイ解析を行った。【対象と方法】(1)肝癌細胞株(HuH7,HepG2)と原発性肝癌切除51例(肝細胞癌35例、胆管細胞癌16例)の癌部(T)及び非癌部(N)におけるGγ7の発現を解析した。臨床病理学的因子(術前肝機能を含む背景因子と腫瘍因子)との相関をT/N比の中央値にて2群に分け比較検討した。(2)G protein γ7遺伝子発現が減弱している癌細胞株(KY150)にmock遺伝子とG protein γ7遺伝子を導入し、マイクロアレイ法を用いて遺伝子発現の比較を行った。【結果】(1)1.Gγ7遺伝子発現:HuH7、HepG2ともに明らかなGγ7の発現を認めた。肝細胞癌におけるT/N比は1.1±1.2(中央値:0.81)であり、他の消化器癌と異なり癌部での発現減弱は認めなかった。一方、胆管細胞癌におけるT/N比は0.55±0.35(中央値:0.44)で、T/N比1.0以上は16例中1例のみであり、癌部での明らかな発現減弱を認めた。2.臨床病理学的検討:肝細胞癌では、いずれの臨床病理学的因子においてもGγ7の発現との間に有意な相関は見られなかった。一方、胆管細胞癌では、高度減弱群は、軽度減弱群と比べ、ICGR15が有意に低値であった(8.7±2.4vs.16.6±3.1%,P<0.01)。また、高度減弱群の全8例が中・低分化型または低分化型と低分化型を含むのに対し、軽度減弱群では低分化型を含むのは3例のみであった(8/8vs.3/8,P<0.01)。しかし、im, ly, v, pn因子など他の病理学的因子やリンパ節転移では両群間に有意差を認めなかった。(2)DNAマイクロアレイ解析ではp27,TTK protein kinase, INK4cといった細胞周期関連遺伝子の増強を認めた。【総括】1.肝細胞癌では癌部での発現減弱は認めなかったが、胆管細胞癌では他の消化器癌と同様、癌部での明らかな発現減弱を認めた。株化細胞に関しても、膵癌や消化管癌ではGγ7はほとんど発現しないが、肝癌細胞株では明らかな発現を認めた。2.胆管細胞癌では、癌部での高度発現減弱例において、術前肝機能が良好であり、低分化型の症例が多かった。(2)DNAマイクロアレイ解析によりGγ7の発現によりp27,TTK protein kinase, INK4cといった細胞周期関連遺伝子の増強を認めた。

[Objective] To determine the expression of G-protein γ7(Gγ7) in cancer by Differential display method (BRC. 246, 1998). Gγ7 is related to the expression of three components of G protein, extracellular protein and intracellular protein. The reduction of G γ7 expression in esophageal, gastric, and colorectal cancer was confirmed (Cancer Res. 59, 1999), and the analysis of G γ 7 expression in primary liver cancer and its clinical pathological significance were discussed. [Methods](1) Analysis of the development of Gγ7 in hepatocellular carcinoma cell lines (HuH7, HepG2) and in cancerous (T) and non-cancerous (N) parts of 51 primary liver cancer patients (35 hepatocellular carcinoma, 16 cholangiocarcinoma). The correlation between T/N ratio and clinicopathological factors (preoperative liver function, including background factors and tumor factors) was compared between two groups. (2)G Protein γ7 gene expression was attenuated in a cancer cell line (KY150). A comparison of mock gene and G protein γ7 gene expression was made between the two methods. [Results](1) 1. G γ7 gene expression:HuH7, HepG2 and Gγ7 gene expression. T/N ratio of hepatocellular carcinoma was 1.1±1.2(central value:0.81). T/N ratio of cholangiocarcinoma was 0.55±0.35(median value:0.44), T/N ratio was more than 1.0 in 16 cases. 2. Clinical Pathology Review: Hepatocellular Carcinoma: Factors Involved in Clinical Pathology 1, cholangiocarcinoma, highly weakened group, degree weakened group, ICGR15 intentionally low value (8.7± 2.4 vs. 16.6 ±3.1%,P<0.01). All 8 cases in the high and low differentiation groups contained moderate and low differentiation types, 3 cases in the low differentiation groups contained moderate and low differentiation types (8/8 vs. 3/8,P<0.01). Factors such as im, ly, v, pn, and other pathological factors are considered to be significant differences between groups. (2)DNA analysis of p27,TTK protein kinase, INK4c and cell cycle-related genes. [Summary] 1. Hepatocellular carcinoma, cholangiocarcinoma, other digestive cancers, cancer, and reduced development of cancer Cell lines, liver cancer cells, digestive tract cancer cells, liver cancer cells. 2. Cholangiocarcinoma is highly developed and weakened in the cancer area. Preoperative liver function is good and poorly differentiated in most cases. (2)DNA analysis of Gγ7 gene expression, p27,TTK protein kinase, INK4c gene expression and cell cycle-related gene amplification.

项目成果

Masuda, T.A., Mori, M.et al.: "Clinical and Biological Significance of S-Phase Kinase-associated Protein 2 (Skp2) Gene Expression in Gastric Carcinoma : Modulation of Malignant Phenotype by Skp2 Overexpression, Possibly via p27 Proteolysis"Cancer Res. 62.

Masuda, T.A.、Mori, M.等人：“胃癌中 S 相激酶相关蛋白 2 (Skp2) 基因表达的临床和生物学意义：Skp2 过表达对恶性表型的调节，可能通过 p27 蛋白水解作用”Cancer Res

Inoue, H., Mori, M.et al.: "Prognostic Score of Gastric Cancer Determined by cDNA Microarray"Clin Cancer Res. 8. 3475-3479 (2002)

Inoue, H., Mori, M.等：“通过 cDNA 微阵列确定胃癌的预后评分”Clin Cancer Res。

Utsunomiya T., Mori M.et al.: "G protein gamma 7 expression as a new clinicopathological marker in patients with intrahepatic cholangiocarcinoma"Arch Surg. 137. 181-185 (2002)

Utsunomiya T.、Mori M.等人：“G 蛋白 γ 7 表达作为肝内胆管癌患者的新临床病理学标志物”Arch Surg。

Yamashita K., Mori M.et al.: "Pharmacologic unmasking of epigenetically silenced tumor suppressor genes in esophageal squamous cell carcinoma"Cancer Cell. 2. 485-495 (2002)

Yamashita K.、Mori M.等人：“食管鳞状细胞癌中表观遗传沉默肿瘤抑制基因的药理学揭示”Cancer Cell。

Mashino K, Mori M. et al.: "Expression of chemokine receptor CCR7 is associated with lymph node metastasis of gastric carcinoma"Cancer Res. 62. 2937-2941 (2002)

Mashino K、Mori M.等人：“趋化因子受体CCR7的表达与胃癌的淋巴结转移有关”Cancer Res。