「DNA複製」と「異常DNA構造の認識・修復」の共役機構に関する研究

“DNA复制”与“异常DNA结构识别与修复”耦合机制研究

• 批准号: 14033204
• 负责人: 多田 周右
• 金额: $ 3.07万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14033204/
• 关键词: RecQL4; Dpb11; Sgs1; Cdt1; Cdc6; DNA複製; DNA組換え修復; DNA修復; RecQファミリーDNAヘリカーゼ; ロスムンド・トムソン症候群; DNA二本鎖切断; 紫外線感受性; DNA組換え; 細胞周期チェックポイント

遺伝情報安定性に寄与するRecQヘリカーゼとDNA複製開始に働くDpb11との関係に着目し、DNA複製開始制御機構とDNA安定性維持機構との間の共役について酵母遺伝学を用いた解析をおこなうことを目指した。また、Xenopus卵抽出液を用いた実験系でもDNA複製開始制御機構の研究を発展させると共に、この制御機構においてRecQヘリカーゼが機能するのか否かを検討し、機能するならばその機序について生化学的に解析することを目指した。結果として、出芽酵母Dpb11の関連する経路と出芽酵母Sgs1の関連する経路との間の連携を示唆する遺伝学的解析の結果が得られた。生化学的解析の手がかりとして、酵母の遺伝学的解析からDNA複製開始に必須であるとされるSld2と相同な領域を有し、高発がん性、早期老化を特徴とするロスムンド-トムソン症候群の原因遺伝子産物であるRecQL4に焦点を絞り、そのXenopus相同タンパク質の遺伝子を発見・単離した。Xenopus RecQL4の特異的抗体を作成、利用することにより、RecQL4がDNA複製に必須ではなく、その効率にも影響を与えないにもかかわらず、DNA複製の異常に応じてクロマチン上に蓄積することを示唆する結果を得た。さらに、DNA二本鎖切断に応じてRecQL4がクロマチン上に結合することを見いだし、この結合が一本鎖DNA結合タンパク質RPAの存在に依存するが、組換えタンパク質であるRad51のクロマチン結合には依存していないことを明らかにした。また、Xenopus卵抽出液を用いたDNA複製開始機構の解析として、DNA複製開始に重要な役割を果たすMCM複合体をクロマチン上に結合させる際のCdt1の作用機序について検討し、Cdt1の作用に先んじてCdc6がクロマチン上に結合する必要があることを示した。

DNA replication initiation control mechanism, DNA stability maintenance mechanism, and intermittent co-operation mechanism. In addition, Xenopus ovum extract can be used to initiate DNA replication control mechanism research and development. In addition, the control mechanism can be used to investigate the mechanism of DNA replication control mechanism and biochemical analysis. Results: The results of genetic analysis of the relationship between the pathway and the pathway of budding yeast Dpb11 and budding yeast Sgs1 were obtained. The analysis of biochemistry and genetics of yeast requires the initiation of DNA replication. The same domain exists, the same characteristics exist, and the early aging is characterized. The causes of the syndrome include genetic products. The focus is on the development of genetic products. Xenopus RecQL4 specific antibody production, use, RecQL4 DNA replication must be affected by the rate, abnormal DNA replication, accumulation, results DNA binding depends on the existence of a DNA binding molecule that binds to a DNA molecule. DNA binding depends on the existence of a DNA molecule that binds to a DNA molecule. Analysis of DNA replication initiation mechanism in Xenopus ovum extract, analysis of Cdt1 action mechanism in MCM complex, analysis of Cdt1 action mechanism in Cdc6.

项目成果

Wang, W., Seki, M., Narita, Y., Nakagawa, T., Yoshimura, A., Otsuki, M., Kawabe, Yi, Tada, S., Yagi, H., Ishii, Y., Enomoto, T.: "Functional relation among RecQ family helicases, RecQL1, RecQL5, and BLM in cell growth and SCE formation"Molecular and Cellu

王 W.、关 M.、成田 Y.、中川 T.、吉村 A.、大月 M.、川部伊、多田 S.、八木 H.、石井 Y.、榎本

Wang W, Seki M, Otsuki M, Tada S, Takao N, Yamamoto K, Hayashi M, Honma M, Enomoto T: "Functional relation among RecQ family helicases RecQL1, RecQL5, and BLM in cell growth and sister chromatid exchange formation."Biochimica et Biophysica Acta. 1688. 137

Wang W、Seki M、Otsuki M、Tada S、Takao N、Yamamoto K、Hayashi M、Honma M、Enomoto T：“RecQ 家族解旋酶 RecQL1、RecQL5 和 BLM 在细胞生长和姐妹染色单体交换形成中的功能关系。”

Kobayashi, T., Tada, S., Tsuyama, T., Murofushi, H., Seki, M., Enomoto, T.: "Focus-formation of replication protein A, activation of checkpoint system and DNA repair synthesis induced by DNA double strand breaks in Xenopus egg extract"Journal of Cell Scie

Kobayashi, T.、Tada, S.、Tsuyama, T.、Murofushi, H.、Seki, M.、Enomoto, T.：“复制蛋白 A 的焦点形成、检查点系统的激活和 DNA 诱导的 DNA 修复合成

Wang W, Seki M, Narita, Y, Nakagawa T, Yoshimura A, Otsuki M, Kawabe Y, Tada s, Yagi H, Ishii Y, Enomoto T.: "The absence of a functional relationship between ATM and BLM, the components of BASC, in DT40 cells."Molecular and Cellular Biology. 23. 3527-353

Wang W, Seki M, Narita, Y, Nakakawa T, Yoshimura A, Otsuki M, Kawabe Y, Tada s, Yagi H, Ishii Y, Enomoto T.：“ATM 和 BLM 之间缺乏功能关系，ATM 和 BLM 的组成部分

多田周右, 榎本武美: "Bloom症候群原因遺伝子産物の機能"医学のあゆみ. 208. 863-869 (2004)

Shusuke Tada、Takemi Enomoto：“导致布卢姆综合征的基因产物的功能”《医学史》208. 863-869 (2004)。