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色素幹細胞をモデルとした幹細胞維持機構の解明

以色素干细胞为模型阐明干细胞维持机制

基本信息

批准号：
15039236
负责人：
大沢匡毅
金额：
$ 3.2万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

1.色素細胞にGFPを発現させたトランスジェニックマウスを作成し、FACSにより色素幹細胞を含む様々な分化段階にある色素細胞を単離した。これらからcDNAライブラリーを作製し、マイクロアレー解析により、幹細胞に強く発現する遺伝子を約200種類を同定した。これらの中には、NotchシグナルおよびTGF/BMPシグナルの活性化に関わる分子や、Wntシグナル系を抑制する分子が同定された。この結果より、これらのシグナル系が色素幹細胞維持に関わっていることが示唆された。2.色素前駆細胞に対するNotchシグナル系の役割を明らかにする目的で、胎児表皮器官培養系にγ-secretase阻害物質を添加しNotchシグナル系を抑制したところ、表皮中の色素前駆細胞がアポトーシスにより完全に消失することを認めた。次に、下流分子であるHes1の機能を調べた。Dominant negative体のHes1を培養色素前駆細胞に発現させたところ、同様にアポトーシスが誘導された。また、色素細胞にHes1を発現するトランスジェニックマウスを作成し、γ-secretase阻害物質で処理したところ、色素前駆細胞のアポトーシスが認められなかった。このことから、Hes1がNotchシグナル系の下流に存在し、色素前駆細胞のアポトーシスを抑制していることが示された。また、Dominant negative体のHes1を色素細胞に発現するトランスジェニックマウスを作成したことろ、毛周期が進むにつれ毛色が白色化することが認められた。免疫組織染色からこのマウスでは色素幹細胞が消失していることが示された。以上のことからNotchおよびHes1は幹細胞の維持に対して重要な働きを担っていることが示された。

1. Pigment cell development and differentiation stages of GFP cells were studied by FACS. About 200 species of stem cells were identified by cDNA sequencing and analysis. In this paper, we discuss the molecular mechanism of TGF/BMP activation and the molecular mechanism of Wnt inhibition. The results of this study indicate that the maintenance of pigment stem cells is related to the development of new cells. 2. Pigment precursor cells are inhibited by the addition of γ-secretase inhibitors to fetal epidermal organ culture systems. The function of Hes1 is regulated. Dominant negative Hes1 cells were cultured in vitro and induced in vitro. In addition, the pigment cells were found to be resistant to γ-secretase and to be resistant to γ-secretase. The presence of Hes1 and Hes1 in the downstream of the cell line and the inhibition of Hes 1 and Hes 1 in the downstream of the cell line Hes1 of the Dominant Negative Body is produced by pigment cells, and the hair cycle is produced by white hair. Immunohistochemical staining showed that pigment stem cells disappeared. The above mentioned Notch and Hes1 are important for the maintenance of stem cells