糖鎖と細胞外マトリックス複合体によるシグナル分子のクラスタリング機能の解明

阐明糖链和细胞外基质复合物对信号分子的聚类功能

• 批准号: 15040220
• 负责人: 平澤 恵理
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15040220/
• 关键词: 細胞外マトリックス; ヘパラン硫酸プロテオグリカン; 神経金接合部; 糖鎖複合体; ラミニン; ラフト; GM1; 神経突起伸長; パールカン; 神経筋接合部; アセチルコリンエステレース; ミオトニア; Schwartz-Jampel症候群

1.細胞外マトリックスと糖鎖による神経筋接合部分子会合体形成モデルの作成(1)C2C12細胞を分化誘導後、細胞外マトリックスのラミニン1タンパク質,アグリンリコンビナントタンパク質を加え、それぞれの細胞表面での会合凝集体の形成能をAChR(αブンガロトキシンでラベル)を可視化して確認した。ラミニン1とアグリンは独自の時間的経過、形態でAChRを凝集した。(2)この過程が糖鎖複合体を形成している可能性を考え、いわゆるラフトマーカーであるGM1をコレラトキシンBでラベルしその凝集を可視化したところラミニン1、アグリン添加後早期に観察される小凝集にはAChRとGM1が共局在するが、時間経過のたった大凝集にはGM1が共局在しないことが解った。(3)ラミニン由来凝集体とアグリン由来凝集体の構成分子に特異性がある可能性を考え、可視化後マイクロダイセクションにて凝集部分を切り出し2次元電気泳動にて比較解析することを計画し準備実験を行った。(4)ラミニン1Gドメイン由来のペプチドAG73はヘパリンやヘパラン硫酸鎖と結合するため、糖鎖を介して凝集を作る可能性を考え、上記の実験を行ったところ、速やかに小凝集を形成することが解った。2.神経突起伸長における細胞外マトリックスと糖鎖による分子会合体形成の関与15年度に筋細胞株で開始した実験と平行してラミニン1,アグリンの神経細胞における細胞外マトリックスと糖鎖の複合体の機能解析を開始した。まず、解析の系を単純化するため、ラミニンペプチドAG73のNGF存在下での神経突起伸長活性に着目して神経系細胞株PC12を用いて実験系を確立した。2の成果を第44回米国細胞生物学会で発表した。

1.(1) After differentiation of C2C12 cells, the ability to form aggregates on the cell surface was visualized and confirmed. 1. AChR aggregation in the form of individual time cycles (2)The process of glycogen lock complex formation is possible, and the early detection of small aggregation after the addition of GM1 is possible, and the time elapses. (3)The possibility of specific analysis of aggregated molecules from aggregated groups was examined and visualized, and the comparative analysis of two-dimensional electrophoresis was prepared. (4)The origin of the protein is determined by AG73, and the possibility of aggregation of the protein is examined. 2. The relationship between the formation of extracellular glycogen complex and neurite elongation in 15-year-old muscle cell lines began to be analyzed. To establish a new system for the identification of neurite elongation activity in the presence of NGF in human neuroblast cell line PC12. The 44th American Society for Cell Biology was founded in 1992.

项目成果

Arikawa-Hirasawa E, Wilcox WR, Yamada Y: "Dyssegmental Dysplasia, Silverman-Handmaker Type : Unexpected role of perlecan in cartilage development."American Journal of Medical Genetics. 106. 254-257 (2002)

Arikawa-Hirasawa E、Wilcox WR、Yamada Y：“节段性发育不良，Silverman-Handmaker 型：基底膜蛋白在软骨发育中的意外作用。”美国医学遗传学杂志。

Identification of neurite outgrowth active sites on the laminin alpha4 chain G domain.

层粘连蛋白 α4 链 G 结构域上神经突生长活性位点的鉴定。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Biochemistry 44(15)
• 作者: Ichikawa N;Kasai S;Suzuki N;Nishi N;Oishi S;Fujii N;Kadoya Y;Hatori;K;Mizuno Y;Nomizu M;Arikawa-Hirasawa E
• 通讯作者: Arikawa-Hirasawa E

Annual Review神経 2004XIV.筋疾患Schwartz-Jampel症候群(軟骨異栄養性筋強直症)とパールカン

年度回顾神经病学 2004XIV。肌肉疾病 Schwartz-Jampel 综合征（软骨营养不良性肌强直）和 Perlecan

• 发表时间: 2004
• 作者: 編集 柳沢信夫(分担執筆平澤恵理)

Hassell J, Yamada Y, Arikawa-Hirasawa E.: "Role of perlecan in skeletal development and diseases."Glycoconj J.. 19(4/5). 263-267 (2002)

Hassell J、Yamada Y、Arikawa-Hirasawa E.：“基底膜聚糖在骨骼发育和疾病中的作用。”Glycoconj J.. 19(4/5)。

Arikawa-Hirasawa E, Le AH, Nishino I, et al.: "Structural and functional mutations of the perlecan gene cause schwartz-jampel syndrome, with myotonic myopathy and chondrodysplasia"American Journal of Human Genetics. 70. 1368-1375 (2002)

Arikawa-Hirasawa E、Le AH、Nishino I 等人：“基底膜蛋白聚糖基因的结构和功能突变导致 schwartz-jampel 综合征，伴有强直性肌病和软骨发育不良”美国人类遗传学杂志。