核移植クローン技術を用いたゲノム再プログラム化機構の解析

利用核转移克隆技术分析基因组重编程机制

• 批准号: 15080210
• 负责人: 小倉 淳郎
• 金额: $ 78.85万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15080210/
• 关键词: 核移植クローン; 生殖細胞; 胚盤胞; マウス; X染色体; 始原生殖細胞; 体細胞; 顕微授精; 胚性遺伝子; eIF-1A; 幹細胞; Hdacl; 造血幹細胞; 胎盤; NKT細胞; TS細胞; 核移植; 体細胞クローン

本研究は、胚および産子に異常を生じる体細胞核移植クローン技術を利用することにより体細胞ゲノムと生殖細胞ゲノムの相違が明らかにすることを目的とする。この問題点の理解への近道はおそらく、geneticな要因をできる限り排除してepigeneticな要因に限定でき、ランダムでなく定型的な異常であり、そして発生のできるだけ初期に現れる現象の解析にある。これらの条件を満たす解析対象の一つがマウスの初期胚である。昨年の2-cellに始まるmajor zygotic gene activation(ZGA)の遺伝子発現パターン解析に加えて、今年度は、胚盤胞の遺伝子発現パターンをマイクロアレイ法を用いて解析した。これは、胎盤異常を生じさせる遺伝子を同定する目的である。卵丘細胞クローン、セルトリ細胞クローン、TSA処理卵丘細胞クローン(発生は改善するが、胎盤は異常)、始原生殖細胞クローン、細胞質注入顕微授精(クローンではないが、胎盤は異常)、IVF胚(コントロール)の6種類を比較した。その結果、クローンはX染色体上の遺伝子が特異的に低下することが明らかになり、その中に胎盤発生に重要な遺伝子が含まれていた。興味深いことに、これらの遺伝子のいつくかは細胞質注入顕微授精でも低下しており、胎盤異常との密接な関係が示唆された。逆に、始原生殖細胞クローンは、改善が見られた。解析対象には、胎盤が異常を示さない129系統マウスのクローン、およびES細胞クローンも追加する予定である。今後はその上流にある共通の現象を突き止め、胎盤異常が生じる機構を明らかにしたい。

This study is based on the use of somatic cell nuclear transfer technology for abnormal embryonic and fetal births.とによりSomatic cell ゲノムとgerm cell ゲノムの conflict が明らかにすることをpurpose とする.このThe problem point is understood, the shortcut is taken, the genetic reason is eliminated, the genetic reason is eliminated, and the genetic reason is eliminated. An analysis of the abnormal phenomenon that has been established due to the limitation of the limited edition, and the initial stage of the abnormal phenomenon.これらのconditionsを満たすanalytics対肖の一つがマウスのInitial embryoである. Last year's 2-cell major zygotic gene Activation (ZGA) の缝子発appears パターンanalytic に加えて, this year は, blastoderm cells の 伝子発 appear パターンをマイクロアレイ法を用いてanalytic した.これは, abnormal placenta を生じさせる伝子を同定するpurpose である. Cumulus cell クローン, セルトリ cell クローン, TSA-treated cumulus cell クローン (発生は Improvement するが, placenta は abnormality), primordial reproductive cells Comparison of 6 types of embryos including cytoplasmic insemination, microinsemination with cytoplasmic insemination, abnormal placenta, and IVF embryos.そのRESULT, クローンはの缝子 on the X chromosome, a specific にlowering conditionが明らかになり, その中にplacenta発生にimportantな伝子が contain まれていた. The interest is deep, the results are low, the cytoplasmic injection of micro-insemination is low, and the placental abnormality is close connection. Inverse に, primordial germ cell クローンは, improved が见られた. Analyzing the abnormality of the elephant and the placenta, the 129 system of the system, the ES cell system, and the ES cell system, added the predetermined system. From now on, the common phenomenon of "high flow" will be "stopped" and "abnormal placenta" will be revealed.

项目成果

Fulka-Jr, J., Miyashita, N., Nagai, T., Ogura, A.: "Do cloned mammals skip a reprogramming step?"Nature Biotechnology. 22. 25-26 (2004)

Fulka-Jr, J.、Miyashita, N.、Nagai, T.、Ogura, A.：“克隆哺乳动物会跳过重编程步骤吗？”《自然生物技术》。

Kanatsu-Shinohara, M., Ogonuki, N., Inoue, K., Ogura, A., Toyokuni, S., Shinohara, T.: "Restoration of fertility in infertile mice by transplantation of cryopreserved male germline stem cells."Human Reproduction. 18. 2660-2667 (2003)

Kanatsu-Shinohara, M.、Ogonuki, N.、Inoue, K.、Ogura, A.、Toyokuni, S.、Shinohara, T.：“通过移植冷冻保存的雄性生殖干细胞恢复不育小鼠的生育能力。”人类

Spermatozoa and spermatids retrieved from frozen reproductive organs or frozen whole bodies of male mice can produce normal offspring

• DOI: 10.1073/pnas.0605755103
• 发表时间: 2006-08-29
• 期刊: PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
• 影响因子: 11.1
• 作者: Ogonuki, Narumi;Mochida, Keiji;Ogura, Atsuo
• 通讯作者: Ogura, Atsuo

The developmental ability of vitrified oocytes from different mouse strains assessed by parthenogenetic activation and intracytoplasmic sperm injection

• DOI: 10.1262/jrd.19058
• 发表时间: 2007-12-01
• 期刊: JOURNAL OF REPRODUCTION AND DEVELOPMENT
• 影响因子: 1.8
• 作者: Endoh, Keisuke;Mochida, Keiji;Ogura, Atsuo
• 通讯作者: Ogura, Atsuo

Chorioallantoic placenta defects in cloned mice.

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2006.08.057
• 发表时间: 2006-10
• 期刊: Biochemical and biophysical research communications
• 影响因子: 3.1
• 作者: N. Wakisaka-Saito;T. Kohda;K. Inoue;N. Ogonuki;H. Miki;Takafusa Hikichi;E. Mizutani;T. Wakayama;T. Kaneko-Ishino;A. Ogura;F. Ishino