核移植クローン技術を用いたゲノム再プログラム化機構の解析

利用核转移克隆技术分析基因组重编程机制

基本信息

批准号：
15080210
负责人：
小倉淳郎
金额：
$ 78.85万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、胚および産子に異常を生じる体細胞核移植クローン技術を利用することにより体細胞ゲノムと生殖細胞ゲノムの相違が明らかにすることを目的とする。この問題点の理解への近道はおそらく、geneticな要因をできる限り排除してepigeneticな要因に限定でき、ランダムでなく定型的な異常であり、そして発生のできるだけ初期に現れる現象の解析にある。これらの条件を満たす解析対象の一つがマウスの初期胚である。昨年の2-cellに始まるmajor zygotic gene activation(ZGA)の遺伝子発現パターン解析に加えて、今年度は、胚盤胞の遺伝子発現パターンをマイクロアレイ法を用いて解析した。これは、胎盤異常を生じさせる遺伝子を同定する目的である。卵丘細胞クローン、セルトリ細胞クローン、TSA処理卵丘細胞クローン(発生は改善するが、胎盤は異常)、始原生殖細胞クローン、細胞質注入顕微授精(クローンではないが、胎盤は異常)、IVF胚(コントロール)の6種類を比較した。その結果、クローンはX染色体上の遺伝子が特異的に低下することが明らかになり、その中に胎盤発生に重要な遺伝子が含まれていた。興味深いことに、これらの遺伝子のいつくかは細胞質注入顕微授精でも低下しており、胎盤異常との密接な関係が示唆された。逆に、始原生殖細胞クローンは、改善が見られた。解析対象には、胎盤が異常を示さない129系統マウスのクローン、およびES細胞クローンも追加する予定である。今後はその上流にある共通の現象を突き止め、胎盤異常が生じる機構を明らかにしたい。

这项研究旨在通过利用体细胞核转移克隆技术来阐明体细胞和生殖细胞基因组之间的差异，这些克隆技术在胚胎和出生中引起异常。理解此问题的快捷方式可能在于对现象的分析，这些现象可以尽可能消除，并且可以限于表观遗传因素，而不是随机的，而是常规异常，并且会尽早出现。满足这些条件的分析目标之一是小鼠的早期胚胎。除了分析去年2元组的主要合子基因激活（ZGA）的基因表达模式外，今年还使用微阵列方法分析了胚泡的基因表达模式。这是识别引起胎盘异常的基因的目的。比较了六种类型：积云细胞克隆，Sertoli细胞克隆，TSA处理的积云细胞克隆（发育改善但胎盘异常），原始生殖细胞克隆，细胞质输注微刺激（不是克隆，而是异常胎盘）和IVF Embryos（IVF Embryos（对照）。结果，揭示了这些克隆在X染色体上的基因特异性下降，其中包括对胎盘发育重要的基因。有趣的是，这些基因的性质也通过细胞质输注微肥料降低，这表明与胎盘异常有着密切的关系。相反，原始生殖细胞克隆显示出改善。分析将添加129只没有异常胎盘和ES细胞克隆的小鼠的克隆。将来，我们想确定其上游的共同现象，并阐明发生胎盘异常的机制。

项目成果

期刊论文数量（39）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Kanatsu-Shinohara, M., Ogonuki, N., Inoue, K., Miki, H., Ogura, A., Toyokuni, S., Shinohara, T.: "Long-Term Proliferation in Culture and Germline Transmission of Mouse Male Germline Stem Cells."Biology of Reproduction. 69. 612-616 (2003)

Kanatsu-Shinohara, M.、Ogonuki, N.、Inoue, K.、Miki, H.、Ogura, A.、Toyokuni, S.、Shinohara, T.：“雄性小鼠培养物的长期增殖和种系传递

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Kanatsu-Shinohara, M., Ogonuki, N., Inoue, K., Ogura, A., Toyokuni, S., Shinohara, T.: "Restoration of fertility in infertile mice by transplantation of cryopreserved male germline stem cells."Human Reproduction. 18. 2660-2667 (2003)

Kanatsu-Shinohara, M.、Ogonuki, N.、Inoue, K.、Ogura, A.、Toyokuni, S.、Shinohara, T.：“通过移植冷冻保存的雄性生殖干细胞恢复不育小鼠的生育能力。”人类

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Fulka-Jr, J., Miyashita, N., Nagai, T., Ogura, A.: "Do cloned mammals skip a reprogramming step?"Nature Biotechnology. 22. 25-26 (2004)

Fulka-Jr, J.、Miyashita, N.、Nagai, T.、Ogura, A.：“克隆哺乳动物会跳过重编程步骤吗？”《自然生物技术》。

DOI：
发表时间：
期刊：
影响因子：
0
作者：
通讯作者：

Chorioallantoic placenta defects in cloned mice.

DOI：
10.1016/j.bbrc.2006.08.057
发表时间：
2006-10
期刊：
Biochemical and biophysical research communications
影响因子：
3.1
作者：
N. Wakisaka-Saito;T. Kohda;K. Inoue;N. Ogonuki;H. Miki;Takafusa Hikichi;E. Mizutani;T. Wakayama;T. Kaneko-Ishino;A. Ogura;F. Ishino
通讯作者：
N. Wakisaka-Saito;T. Kohda;K. Inoue;N. Ogonuki;H. Miki;Takafusa Hikichi;E. Mizutani;T. Wakayama;T. Kaneko-Ishino;A. Ogura;F. Ishino

Efficient production of intersubspecific hybrid mice and embryonic stem cells by intracytoplasmic sperm injection.

通过胞浆内精子注射有效生产亚种间杂交小鼠和胚胎干细胞。