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ジーントラップ・マイクロアレイを利用した感染宿主応答の分子遺伝学的解析

使用基因捕获微阵列对受感染宿主反应进行分子遗传学分析

基本信息

批准号：
16017263
负责人：
石田靖雅
金额：
$ 6.4万
依托单位：
Nara Institute of Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、病原微生物や悪性新生物に対する有効な免疫応答を引き起こし、かつ自己成分に対する免疫寛容の維持においても極めて重要な役割を果たしていると考えられるようになった樹状細胞(dendritic cells, DCs)に対し、ゲノム科学の新しい手法を用いた網羅的な解析を行っている。我々は、新たに開発した手法「UPATrap」を利用してnonsense-mediated mRNA decay(NMD)と呼ばれるmRNAサーベイランス機構を抑制すれば、標的細胞(この場合はマウスのES細胞)中で発現していない遺伝子(免疫系遺伝子の多くはこのグループに属する)の機能を、ランダムかつ確実に破壊することができる、という事実を見出した。我々が開発した新手法は、2004年9月に提唱された「The Knockout Mouse Project」(遺伝子トラップと遺伝子ターゲティングの手法を組み合わせ、マウスES細胞中の全遺伝子を今後5年以内に破壊する、という壮大なプロジェクト)の遂行にとり、大きな障害となっているステップを乗り越えるのに役立つと考えられる。平成17年度は、この「UPATrap」法により、マウスES細胞中の内在性遺伝子スペクトラムとベクター挿入部位の両者に「偏り」が存在しない理想的な遺伝子トラップを行い、トラップされた遺伝子断片を用いてマイクロアレイを作製した。このマイクロアレイを用い、パイロット実験としてマウスの免疫担当細胞やリンパ組織で特異的に発現されている新規遺伝子を探索したところ、マウス胸腺のCD4-8-細胞とCD4+8+細胞のみに限局して発現されるmRNA-like non-coding遺伝子がトラップされたES細胞クローン8v3-033を見出すことに成功した。現在、このクローンを用い、ノックアウト・マウスの作製を進めている。

In this study, pathogenic microorganisms are involved in sexual neobiology. In this study, the immune response is introduced, and the components of the immune system are used to maintain the importance of the immune system. The results show that the dendritic cells (DCs) cells and the new methods of scientific research are analyzed by the Internet. We use the new method of "UPATrap" to make use of the nonsense-mediated mRNA decay (NMD) to call the mRNA cell to suppress the cell of the virus and the cell of the cell (the cell of the immune system) to detect the failure of the immune system (immune system). I'm sorry. I'm sorry. In September 2004, we launched a new program called "The Knockout Mouse Project". In September 2004, we conducted a series of successful trials. In September 2004, we launched a series of new practices, and in September 2004, we started to launch a new strategy, and in September 2004, we started to launch a new strategy, and in September 2004, we started to launch a new strategy, and in September 2004, we launched a new strategy, and in September 2004, we conducted a successful campaign. There is a great deal of trouble in the construction of the hospital. In the 17th year of Pingcheng, the UPATrap method was used to determine the location of the internal disease in the cell of the Pingcheng ES. There is an ideal device in the cell. This is the most important thing in the system. You can use the new protocol to detect the immune response of the tissue. Explore the new protocol, the thymus, CD4-8, CD4+8+, cell, limit the local area, and detect the mRNA-like non-coding gene, the ES cell, the 8v3-033 cell, and the cell line. At present, we are in the process of making progress.