レドックス制御と細胞がん化の情報伝達

细胞癌变的氧化还原控制和信息传递

• 批准号: 16022217
• 负责人: 三木 裕明
• 金额: $ 4.1万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16022217/
• 关键词: Wnt; Dishevelled; beta-catenin; レドックス制御

Wntシグナルの伝達因子Dishevelled(Dvl)に結合する蛋白として見付けたNucleoredoxin(NRX)を強制発現することによってDvl依存性のβ-catenin安定化が阻害される。しかしWntシグナルはβ-catenin安定化以外にも、RhoやJNKを活性化して細胞の極性制御に関連していることが知られている。この経路へのNRXの効果を検討するため、Dvlによって誘導されるJNKの活性化に対する影響を調べたところ、NRXはJNKの活性化に対して正にも負にも全く影響しないことが明らかとなった。この実験結果より、NRXはWntシグナルの中でもβ-catenin安定化に至るシグナル経路のみを選択的に阻害していることが判明した。次にNRXがβ-catenin安定化を阻害する分子メカニズムについての検討を行った。DvlはFrat/GBPという蛋白を介してβ-catenin安定化を導くことが示唆されている。精製した蛋白を用いてin vitroで結合実験を行ったところ、これらが互いに競合していることを確認できた。また、細胞レベルにおいてもNRXとFrat/GBPが競合していることを示す実験結果が得られた。このようにNRXはFrat/GBPをDvlから排除することで、β-catenin安定化を阻害していることが示唆された。ところで、細胞で強制発現させたNRXは核内に集積するという報告がなされている。私は細胞の溶解物を核と細胞質に生化学的に分画して、内在性のNRXを特異的に認識できる抗体でウエスタン解析を行った。その結果、内在性のNRXは核には殆ど存在せず、細胞質に多く存在していることが明らかとなった。NRXの結合標的であるDvlは通常細胞質に存在していることが知られており、NRXとDvlの複合体形成が生理的に意味の有るものであることを支持している。

Wnt is the most important factor in protein binding to Dishevelled(Dvl), and it is also the most important factor in protein binding to Nucleoredoxin(NRX). The activation of Rho and JNK in addition to β-catenin stabilization is related to the regulation of cell polarity. The effect of NRX on the activation of JNK is discussed in detail. The results show that NRX has the ability to stabilize β-catenin in the middle of Wnt and to inhibit the selection of Wnt in the middle of Wnt NRX β-catenin stabilizes the molecule and prevents it from developing. Dvl Frat/GBP protein mediates β-catenin stabilization Refined protein is used in vitro to confirm the activity of the protein. The results of the NRX and Frat/GBP overlap are shown below. NRX/GBP is excluded, β-catenin is stabilized, NRX reports on nuclear accumulation in cells under stress. Cell lysate, nuclear and cytoplasmic biochemical analysis, intrinsic NRX, specific recognition, antibody analysis The result, intrinsic NRX, is that the nucleus exists, and the cytoplasm exists. NRX and Dvl binding targets are usually present in the cytoplasm, and NRX and Dvl complex formation is physiological.

项目成果

Molecular mechanisms of invadopodium formation: the role of the N-WASP-Arp2/3 complex pathway and cofilin.

Invadopodium形成的分子机制：N-WASP-ARP2/3复合途径和Cofilin的作用。

• DOI: 10.1083/jcb.200407076
• 发表时间: 2005-01-31
• 期刊: JOURNAL OF CELL BIOLOGY
• 影响因子: 7.8
• 作者: Yamaguchi, Hideki;Lorenz, Mike;Kempiak, Stephan;Sarmiento, Corina;Coniglio, Salvatore;Symons, Marc;Segall, Jeffrey;Eddy, Robert;Miki, Hiroaki;Takenawa, Tadaomi;Condeelis, John
• 通讯作者: Condeelis, John

N-WASP and WAVE2 acting downstream of phosphatidylinositol 3-kinase are required for myogenic cell migration induced by hepatocyte growth factor

• DOI: 10.1074/jbc.m408057200
• 发表时间: 2004-12-24
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Kawamura, K;Takano, K;Endo, T
• 通讯作者: Endo, T

The pre-mRNA-splicing factor SF3a66 functions as a microtubule-binding and -bundling protein

• DOI: 10.1042/bj20040521
• 发表时间: 2004-08-15
• 期刊: BIOCHEMICAL JOURNAL
• 影响因子: 4.1
• 作者: Takenaka, K;Nakagawa, H;Miki, H
• 通讯作者: Miki, H

WAVE/scars in platelets

• DOI: 10.1182/blood-2003-04-1319
• 发表时间: 2005-04-15
• 期刊: BLOOD
• 影响因子: 20.3
• 作者: Oda, A;Miki, H;Takenawa, T
• 通讯作者: Takenawa, T

IRSp53/Eps8 complex is important for positive regulation of Rac and cancer cell motility/invasiveness

• DOI: 10.1158/0008-5472.can-04-0327
• 发表时间: 2004-08-01
• 期刊: CANCER RESEARCH
• 影响因子: 11.2
• 作者: Funato, Y;Terabayashi, T;Miki, H
• 通讯作者: Miki, H