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胚性腫瘍細胞の分化制御とヒストン修飾

胚胎肿瘤细胞分化和组蛋白修饰的调控

基本信息

批准号：
16022263
负责人：
横山和尚
金额：
$ 1.86万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

胚性腫瘍細胞F9のレチノイン酸(RA)やアデノウイルスE1Aによる原始内胚葉系への分化誘導とアポトーシス誘導はc-jun遺伝子の活性化によって引き金がひかれる。このc-jun遺伝子のプロモーター解析により転写因子複合体DRF (Differentiation Regulatory Element)を同定し、解析している。この複合体中の成分のひとつのJDP2に関して平成16年度は以下の事を明らかにした。1.JDP2のHDAC3リクルート活性のドメインはbZIPドメインよりC末(アミノ酸残基70-163)に存在することが欠失変異体を用いて明らかとなった。(未発表)2.JDP2のINHAT活性のドメインはアミノ酸残基35-102に存在する事が明らかとなった。(脱稿中)3.JDP2のヒストンへ結合定数はIC50=0.16μMで他のヒストンシャペロンのTAF-1βと同程度の値を示した。(脱稿中)4.JDP2の各構成アミノ酸に対するアラニンスキャンニングJDP2変異体を作成しヒストン結合能、INHAT活性、DNA結合能を測定した。さらに分化誘導活性に関する知見を得た。アミノ酸残基88,90,92の変異体(M3変異体)はINHATヒストン結合能、分化誘導抑制活性能が共に消失していた。(脱稿中)5.組換えアデノウイルスJDP2及びそのスモ化修飾サイト、リン酸化サイトの変異体を作成しウイルス化をすすめた。またsi-RNA, sh-RNA法の標的サイトのスクリーニングを行った。癌治療のためのモデル系として組換えウイルスやsi-RNAを用いた遺伝子導入法の妥当性を系が確立している胆のう癌を使用し解析した。(発表)6.JDP2(-/-)マウスのMEF(初代培養線維芽細胞)を用いた解析で増殖能が亢進している事を確認した。(未発表)

Embryonic tumor cells F9 were induced to differentiate from E1A by RA and RA, and c-jun genes were activated by RA and RA. The analysis of C-Jun gene expression is based on the identification and analysis of DRF (Differentiation Regulatory Element). The components of this complex are related to JDP 2 and the following events in Heisei 16. 1. The HDAC 3 activity of JDP2 was determined by the presence of a protein at the end of C (residues 70 - 163). 2. The INHAT activity of JDP2 was determined by the presence of residues 35 - 102. 3. JDP2 's stability is determined by IC50 = 0.16 μ M, and its stability is determined by TAF-1 β. 4. Determination of the binding energy, INHAT activity and DNA binding energy of JDP2. The activity of differentiation induction is related to the discovery of knowledge. A variant of INHAT residues 88, 90, and 92 (M3 variant) lost both binding and differentiation-inducing inhibitory activities. (in draft) 5. Change the structure of JDP 2 and JDP 2. Change the structure of JDP 2 and JDP 2. Si-RNA, sh-RNA method is a standard method for detecting RNA. Cancer treatment and treatment of cancer in the use of si-RNA gene introduction method to establish the appropriate system for the use of gallbladder cancer analysis 6. JDP2 (-/-)-MEF (primary culture line germ cells) was analyzed to confirm the proliferation activity. (Not yet reported)