胚性腫瘍細胞の分化誘導とヒストンアセチル化

诱导胚胎肿瘤细胞分化和组蛋白乙酰化

• 批准号: 14028068
• 负责人: 横山 和尚
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14028068/
• 关键词: F9細胞; レチノイン酸; p300; ATF2; JDP2; ヒストン脱アセチル化; HDAC3; ヒストンシャペロン

胚性腫瘍細胞F9のレチノイン酸(RA)による原始内胚葉への分化誘導においてJDP2はATF-2と分子会合してp300とATF-2によるc-Jun遺伝子のトランス活性化を抑制することを明らかにしてきた。本年度はJDP2のドミナントネガティブ変異体を用いてRAによるF9分化誘導の影響を調べ、JP2はRAによるF9の分化誘導を抑制することを明らかにした。JDP2のドミナントネガティブはこの活性を消失していた。JDP2のノックアウトコンストラクトを用いてES細胞を樹立した。またJDP2のRNAiコンストラクトを構築し、この両者を用いてKOマウスの作出、ノックダウン細胞の作出を通じてその生理活性を検討している。GST-JDP2の融合蛋白質を用いてヒストン脱アセチル化活性を検索し、JDP2はHDAC3をリクルートするだけでなくJDP2それ自身がコアヒストンと結合し(H3への親和性が高い)、p300やATF2のアセチル化能を抑制していることを明らかにした。その活性ドメインは変異体を用いた解析よりbZipの近傍のN末側に存在し、HDAC3をリクルートするドメインとは異なっていた。以上よりJDP2はコンプレッサーのNCoR1やSMARTを介してHDAC3をリクルートするのみならずコアヒストンと結合してp300とATF2のHAT活性を抑制している活性をを有し、「ヒストンシャペロン」と命名した。今後はまたJDP-2のF9のみならず胚性幹細胞における生理機構の解明を行い、更に分化誘導時ATF-2と結合するX遺伝子の同定を予定している。

Embryonic cells swollen sores F9 の レ チ ノ イ ン acid (RA) に よ る primitive germ layer in へ の induction に お い て JDP2 は ATF - 2 meet と molecular し て p300 と ATF - 2 に よ る c - Jun heritage 伝 son の ト ラ ン ス activeness を inhibit す る こ と を Ming ら か に し て き た. This year は JDP2 の ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ ィ ブ - variant を with い て RA に よ る dispersion induced の F9 を べ, JP2 は RA に よ る F9 の differentiation inducing を inhibition す る こ と を Ming ら か に し た. JDP2 <s:1> ド ド ナ ナ トネガティブ トネガティブ トネガティブ た た た を を activity を disappearance た て た た た. JDP2 トを ノッ アウトコ アウトコ ストラ ストラ トを トを establish a た with を てES cells を. ま た JDP2 の RNAi コ ン ス ト ラ ク ト を constructing し, こ の struck the を with い て KO マ ウ ス の made, ノ ッ ク ダ ウ の ン cells make を tong じ て そ の physiological activity を beg し 検 て い る. GST - JDP2 の fusion protein を い て ヒ ス ト ン ア off セ チ ル chemical active を 検 し and JDP2 は HDAC3 を リ ク ル ー ト す る だ け で な く JDP2 そ れ itself が コ ア ヒ ス ト ン と combining し (H3 へ の affinity が い) and p300 や ATF2 の ア セ チ ル change can suppress し を て い る こ と を Ming ら か に Youdaoplaceholder0 た. そ の active ド メ イ ン は - variant を with い た parsing よ り bZip の nearly alongside の N at the end of the lateral に し, HDAC3 を リ ク ル ー ト す る ド メ イ ン と は different な っ て い た. Above よ り JDP2 は コ ン プ レ ッ サ ー の NCoR1 や SMART を interface し て HDAC3 を リ ク ル ー ト す る の み な ら ず コ ア ヒ ス ト ン と combining し て p300 と ATF2 の HAT inhibition し を て い る active を を し, "ヒ ス ト ン シ ャ ペ ロ ン" と named し た. Future は ま た JDP - 2 の F9 の み な ら ず embryonic stem cells に お け る physiological organization の interpret を い, more に induction combined with ATF - 2 と す る X heritage 伝 の son be を designated し て い る.

项目成果

S.Saito et al.: "Isolation of embryonic stem-like cells from equine blastoyste and their differentiation in vitro"FEBS Letters. 531. 389-396 (2002)

S.Saito 等人：“从马囊胚中分离胚胎干样细胞及其体外分化”FEBS Letters。

N.Takahashi et al.: "Overexpression and ribozyme-mediated targeting of transcriptional coactivators, CREB binding protein (CBP) p300 revealed their indistinguishable roles in adipocyte differentiation through the regulation of peroxisome Proliferation-act

N.Takahashi 等人：“转录辅激活因子 CREB ​​结合蛋白 (CBP) p300 的过度表达和核酶介导的靶向揭示了它们通过过氧化物酶体增殖作用的调节在脂肪细胞分化中的不可区分的作用

C.Jin et al.: "Transcriptional regulation of the c-jun gene by AP-1 repressor protein during the differentiation of F9 cells"Nucleic Acid Res. Suppl.. 2. 97-98 (2002)

C.Jin 等：“F9 细胞分化过程中 AP-1 阻遏蛋白对 c-jun 基因的转录调节”Nucleic Acid Res。

C.Jin et al.: "JDP-2, a repressor of AP-1, recruits a histone deacetylase 3 complex to inhibit the retinoic acid-induced differentiation of F9 cells"Mol. Cell. Biol.. 22. 4815-4826 (2002)

C.Jin 等人：“JDP-2 是 AP-1 的阻遏蛋白，它募集组蛋白脱乙酰酶 3 复合物来抑制视黄酸诱导的 F9 细胞分化”Mol.