増殖分化チェックポイントシグナルとしてのAPI活性調節機構の解析

作为增殖和分化检查点信号的 API 活性调节机制分析

• 批准号: 13043055
• 负责人: 横山 和尚
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13043055/
• 关键词: F9; レチノイン酸; アデノウイルスE1A; p300; ATF-2; JDP-2; ヒストン脱アセチル化; AP1

胚性腫瘍細胞F9のレチノイン酸(RA),アデノウイルスE1Aによる分化誘導はAp1活性の成分の一つであるc-jun遺伝子によって引き金が引かれる。c-jun遺伝子プロモーター上に分化誘導に必要なDRF配列を同定し、ここにDRF(Differentiation Regulatory Factor)複合体が結合することを明らかにしてきた。DRF複合体としてATF-2, p300と新規因子JDP2を同定した。本年度はJDP2の構造を決定し、bZipのDNA結合の高次構造の予測を行った。更にJDP2はin vitro, in vivoでATF-2と会合し、p300, ATF-2によるDRE依存性のc-junの転写活性を抑制すること、更にこの抑制はヒストン脱アセチル化酵素のHDAC3をリクルートすることを明らかにしてきた。また、JDP-2の強制発現はレチノイン酸よるF9の分化誘導を抑制する事を初めて明らかにした。更にJDP-2のプロモーター断片を同定し、c-junの転写抑制に必要なエレメントを-557/-302に同定した。このエレメントは又、p53の強制発現によって更に抑制される。現在その分子機序の解析を進めている。RAR、RXRのKO F9細胞を用いてRAによる分化誘導にはRXRαが関与している事、更にp300のリボザイムを用いて分化誘導にはp21が関与している事を明らかにした。cdk2、cdk4及びcyclin Dもこのカスケードネットワークに関っている。又、JDP-2のドミナントネガティブは、ヒストン脱アセチル化活性を抑制し、c-junのトランス活性化の抑制を示した。これらのツールを使用して更にチェックポイント活性を解析する。

Embryonic cells swollen sores F9 の レ チ ノ イ ン acid (RA), ア デ ノ ウ イ ル ス E1A に よ る induction は Ap1 active の is の a つ で あ る c - jun heritage 伝 son に よ っ て lead き gold が か れ る. C - jun heritage 伝 son プ ロ モ ー タ ー に Differentiation inducing に necessary な DRF match column を with し, こ こ に DRF (Differentiation Regulatory Factor) complex が combining す る こ と を Ming ら か に し て き た. The DRF complex と て てATF-2, p300と the new regulation factor JDP2を the same as た た. This year, the <s:1> JDP2 <s:1> structure を determined the を, and the higher-order structure <e:1> of the bZip <s:1> DNA-binding <s:1> was pretested for を rows った. More に JDP2 は in vitro, in vivo で ATF - 2 meet と し, p300, ATF - 2 に よ る DRE dependency の c - jun の planning write inhibition す を る こ と, more に こ の inhibit は ヒ ス ト ン ア off セ チ ル phenoloxidase の HDAC3 を リ ク ル ー ト す る こ と を Ming ら か に し て き た. ま た, compulsory 発 JDP - 2 の is は レ チ ノ イ ン acid よ る F9 の differentiation inducing を inhibition す る things early を め て Ming ら か に し た. More に JDP - 2 の プ ロ モ ー タ ー を fragment with し, c - jun の planning write inhibit に necessary な エ レ メ ン ト を - 557 / - 302 に with fixed し た. <s:1> エレメ エレメ ト ト also, p53 <s:1> is forced to occur によって and に inhibits される. Now そ そ molecular sequence <s:1> analysis を into めて そ る る. Of RAR and RXR の KO F9 cells を using い て RA に よ る induction に は RXR alpha が masato and し て い る things, more に p300 の リ ボ ザ イ ム を with い て induction に は p21 が masato and し て い る matter を Ming ら か に し た. cdk2, cdk4 and びcyclin D <s:1> <s:1> カスケ ドネットワ ドネットワ に に related to って る る る. Again, JDP - 2 の ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ ィ ブ は, ヒ ス ト ン ア off セ チ ル inhibition し を, c - jun の ト ラ ン ス activeness の inhibit を shown し た. <s:1> れら れら れら を を を を を use <s:1> て to make にチェッ ポ ポ <s:1> ト ト ト を ト ト を ト more active を analysis する.

项目成果

H.Nagaso et al.: "Simultaneous detection of RNA and protein by in situ hybridization and immunological staining"J.Histochemistry & Cytochemistry. 49. 1177-1182 (2001)

H.Nagaso 等：“通过原位杂交和免疫染色同时检测 RNA 和蛋白质”J.Histochemistry

X. Zhao et al.: "Protein C α plays a critical role in mannsylerythitol lipid-induced differentiation of melanoma B16 cells"J. Biol. Chem.. 276. 39903-39910 (2001)

X.Zhao 等人：“蛋白质 Cα 在甘露醇脂质诱导的黑色素瘤 B16 细胞分化中发挥着关键作用”J. Biol. Chem.. 276. 39903-39910 (2001)

横山 和尚: "細胞工学「胚性幹細胞の多分化能の改変とクロマチン制御」"秀潤社. 88-96 (2001)

Kazuhisa Yokoyama：“细胞工程‘胚胎干细胞多能性和染色质调节的修饰’” Shujunsha. 88-96 (2001)

C.Jin et al.: "Identification of mouse Jun dimerization protein 2 as a novel repressor of ATF-2"FEBS Letters. 489. 34-41 (2001)

C.Jin 等人：“鉴定小鼠 Jun 二聚蛋白 2 作为 ATF-2 的新型阻遏蛋白”FEBS Letters。

A.Ravel et al.: "Transcriptional coactivator, CIITA, is an acetyltransferase that bypasses a promoter requirement for TFII250"Molecular Cell. 7. 105-115 (2001)

A.Ravel 等人：“转录共激活因子 CIITA 是一种乙酰转移酶，它绕过 TFII250 的启动子要求”分子细胞。