癌特異性アミノ酸トランスポーターLAT1発現を個性とする腫瘍の新規診断法の確立

建立以癌症特异性氨基酸转运蛋白 LAT1 表达为特征的肿瘤新诊断方法

• 批准号: 16023263
• 负责人: 安西 尚彦
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kyorin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16023263/
• 关键词: アミノ酸トランスポーター; LAT1; 定量PCR; イムノアッセイ; LAT2; 腫瘍診断; 治療効果判定

アミノ酸トランスポーターLAT1発現を「個性」として持つ腫瘍の診断および治療効果判定に用いる新しい腫瘍マーカーとしての有用性を検討することを目的とする。まず本診断システムの開発において、定量PCR法を用いてLAT1 mRNAの発現を検出することによって診断システムを確立することを試みた。まず本LAT1検出システムの開発に先駆け,胃癌及び大腸癌での悪性腫瘍組織におけるLAT1の発現について免疫学的染色法を用いて検討を行った。非癌部と癌細胞において,LAT1の染色性に明確な相違が認められ,LAT1は癌細胞に特異的に発現していることが示された。よって,血液を用いたLAT1検出法の開発は,新しい有用な癌診断システムとしての可能性を有すると考え,検出システムの開発に着手した.正常人より採血したEDTA-2K加血液に膀胱癌細胞由来の培養細胞であるT24細胞を加えて、LAT1,LAT2及び4F2hcについてTaqman定量PCRを行った.その結果本定量PCR法における測定限界は3000細胞/mLであると判断した.次にT24細胞(8×10^7cells/mL)をホモジナイズ処理後,超音波処理を行い、細胞膜タンパク質分画を調製した。本標品を抗原とし,膜タンパク中のLAT1タンパク量の測定を試みた結果、10^<-7>希釈(8細胞/mL)〜10^<-3>希釈(8×10^4細胞/mL)で相関係数0.7とほぼ直線性のある結果を得られ、本システムにおいて0.8個の癌細胞の検出が可能であると考えられた。本システムは癌診断としての利用に耐えうると考えられるが、現時点ではin vitro modelを用いた検討段階であり,実際の血液(血漿)での測定を可能にするため更なる改良が必要となると考えられた。

The diagnosis and treatment results of the disease are discussed in detail. Detection of LAT1 mRNA by quantitative PCR The development of LAT 1 in gastric and colorectal cancer was studied by immunologic staining. Non-cancerous cells are detected,LAT1 staining is clearly identified, and LAT1 is detected specifically for cancerous cells. The development of LAT1 detection method for blood use is a new way to investigate the possibility of using LAT 1 detection method for cancer diagnosis. Blood samples from normal individuals were collected and EDTA-2K was added to culture cells from bladder cancer cells. T24 cells were added to LAT1,LAT2 and LAT 4F2hc. The quantitative PCR method was used to determine the limit of 3000 cells/mL. T24 cells (8× 10^7 cells/mL) were treated with ultrasound, and then the cell membrane quality was measured. The results of the test for the determination of LAT1 in the membrane of this standard were 10^S <-7>(8 cells/mL)~ 10 ^S (<-3>8×10^4 cells/mL), the correlation coefficient was 0.7, and the linearity of the results was 0.8. The detection of cancer cells in this standard was possible. This article discusses the diagnosis of cancer and the improvement of the diagnosis of cancer.

项目成果

Human organic anion transporter 4 is a renal apical organic anion/dicarboxylate exchanger in the proximal tubules

• DOI: 10.1254/jphs.94.297
• 发表时间: 2004-03-01
• 期刊: JOURNAL OF PHARMACOLOGICAL SCIENCES
• 影响因子: 3.5
• 作者: Ekaratanawong, S;Anzai, N;Endou, H
• 通讯作者: Endou, H

Interactions of human organic anion transporters with diuretics

• DOI: 10.1124/jpet.103.059139
• 发表时间: 2004-03-01
• 期刊: JOURNAL OF PHARMACOLOGY AND EXPERIMENTAL THERAPEUTICS
• 影响因子: 3.5
• 作者: Hasannejad, H;Takeda, M;Endou, H
• 通讯作者: Endou, H

Mutations in SLC6A19, encoding BOAT1, cause Hartnup disorder.

编码 BOAT1 的 SLC6A19 突变会导致 Hartnup 障碍。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Nat Genet. 36
• 作者: Kleta R.

The multivalent PDZ domain-containing protein PDZK 1 regulates transport activity of renal urate-anion exchanger URAT1 via its C-terminal.

含有多价 PDZ 结构域的蛋白 PDZK 1 通过其 C 末端调节肾尿酸盐阴离子交换剂 URAT1 的转运活性。

• 发表时间: 2004
• 期刊: J Biol Chem 279
• 作者: Miyazaki H;他;Anzai N他
• 通讯作者: Anzai N他

Novel single nucleotide polymorphisms of organic cation transporter 1 (SLC22A1) affecting transport functions

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2003.11.175
• 发表时间: 2004-01-16
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Sakata, T;Anzai, N;Endou, H
• 通讯作者: Endou, H