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Phagocytosis初期における小胞体と細胞膜の融合機構の解明

阐明吞噬早期内质网与细胞膜的融合机制

基本信息

批准号：
16044237
负责人：
初沢清隆
金额：
$ 3.84万
依托单位：
Fukushima Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16044237/
关键词：
膜融合小胞体マクロファージ貪食 SNAREタンパク質 phagosome SNARE syntaxin 細胞膜

项目摘要

細胞外の異物は樹状細胞やマクロファージによって貪食(phagocytosis)され、細胞内で分解除去される。最近、phagocytosisの際の小器官(phagosome)の形成初期に、小胞体(ER)が細胞膜と直接融合することが報告された。この膜融合の分子機構は不明であり、急務の研究課題の1つである。本研究では、phagosome形成時におけるERと細胞膜の融合機構の解明を目的とする。本研究では、細胞内の小胞輸送で融合装置として機能するSNARE分子、特にERに局在するsyntaxin 18(syx18),D12,Sec22bに焦点を絞り検討してきた。本年度は、これらSNAREを過剰発現するマクロファージを作製し、その機能を解析した。Phagocytosisを解析するため、ルミノールを結合したマイクロビーズを用いたシステムを構築した。ビーズがphagocytosisされると、phagosome内で産生する活性酸素によってルミノールが遊離しルミノメーターで検出できphagocytosisの効率を定量できる。このシステムを用いて、(1)内在性の3倍程度syx18を過剰発現させたマクロファージは、phagocytosisの効率が約2倍亢進しており、syx18がphagocytosisの際の膜融合にポジティブに機能することが明らかになった。(2)Sec22bの過剰発現マクロファージでは、phagocytosisの効率が著しく阻害されていたことから、Sec22bがphagocytosisをネガティブに制御することが明らかになった。一方、D12の過剰発現はphagocytosisの効率に影響しなかった。Sec22bの過剰発現による阻害機構は現在検討中であるが、syx18に作用する可能性が考えられる。以上の結果はphagocytosisにER膜の融合が関与することを強く支持する。

Extracellular foreign bodies are removed from dendritic cells by phagocytosis and intracellular decomposition. Recently, in the early stage of phagocytosis, the direct fusion of small cell bodies (ER) and cell membranes has been reported. The molecular mechanism of membrane fusion is unknown, urgent research topic is 1. The purpose of this study is to elucidate the mechanism of ER and cell membrane fusion during the formation of phagosomes. In this study, we investigated the function of SNARE fusion devices for intracellular vesicle transport, especially ER fusion sites such as syntaxin 18(syx18),D12,Sec 22b. This year's event was held in Beijing. Phagocytosis analysis, analysis Phagocytosis is produced within the phagosome and the active acid is quantified. (1) The intrinsic level of syx18 is 3 times higher than that of phagocytosis, and the efficiency of phagocytosis is about 2 times higher than that of syx18. (2)Sec 22b's occurrence of phagocytosis and phagocytosis is blocked by Sec 22b's occurrence of phagocytosis. A side, D12 and the occurrence of phagocytosis affect the efficiency. Sec22b is a barrier mechanism for detecting the presence of a virus. These results support the fusion of phagocytosis and ER membrane.