膜ラフトにおけるGタンパク質シグナルの分子制御

膜筏中G蛋白信号的分子调控

基本信息

  • 批准号:
    16048219
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.3万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    2004
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2004 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

コレステロール、スフィンゴ脂質、GPI結合タンパク質、脂質修飾された膜タンパク質などの集積により形成される細胞膜のマイクロドメインは総称して脂質ラフト(lipid raft)と呼ばれる。ラフトには受容体、Srcファミリーチロシンキナーゼ、Gタンパク質などのシグナル伝達分子が集まり、細胞外のシグナルを迅速に効率良く伝達する場として重要な役割を果たすことが示唆されている。しかし、ラフトでのシグナル伝達機構はほとんど明らかになっていない。フロティリン(flotillin)はラフトに局在するタンパク質として見出された分子である。私共は、酵母Two-hybrid法を用いてGタンパク質αサブユニット(Gα)の一つであるGαqがフロティリン1と相互作用することを見出した。まず哺乳動物細胞のラフト画分にGαqとフロティリン1が共在すること、細胞での過剰発現系および組換え体タンパク質を用いたin vitro系で両者が相互作用することを確認した。次に、種々のGαとの相互作用を検討したところ、Gαi、Gα12、Gα13との相互作用は観察されずGαsとの弱い相互作用のみ認められたことから、フロティリン1とGαとの相互作用はGαqに特異的であることが明らかとなった。さらにフロティリン1のN末側の192アミノ酸からなるSPFHドメインとGαqのN末のαヘリックス含有領域が相互作用に必要であることを明らかにした。フロティリン1のsiRNAを調製し、Gqを介して引き起こされる細胞応答、例えば細胞内カルシウム応答、チロシンリン酸化、MAPキナーゼ活性化などへのフロティリン1ノックダウンの効果を検討中である。また、アダプタータンパク質Nck1が膜においてGqおよびSrcの下流で働き細胞遊走の調節に関係することを初めて明らかにした。
コ レ ス テ ロ ー ル, ス フ ィ ン ゴ lipids, as well as the combination of GPI タ ン パ ク qualitative, lipid modification さ れ た membrane タ ン パ ク qualitative な ど の set product に よ り form さ れ る membrane の マ イ ク ロ ド メ イ ン は 総 said し て lipid ラ フ ト (lipid raft) と shout ば れ る. ラ フ ト に は let body, Src フ ァ ミ リ ー チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ, G タ ン パ ク qualitative な ど の シ グ ナ ル 伝 operatives が set ま り, extracellular の シ グ ナ ル を に quickly good working rate く 伝 da す る field と し て important な "を cut fruit た す こ と が in stopping さ れ て い る. The ラフトで ラフトで ラフトで 伝 伝 伝 伝 da institution ほとん ほとん な Ming ら になって になって な な. The フロティリ するタ (flotillin) ラフトに is found in the するタ パ パ granular material と て て. Private altogether は を, yeast Two hybrid method with い て G タ ン パ ク qualitative alpha サ ブ ユ ニ ッ ト alpha (G) の つ で あ る G alpha q が フ ロ テ ィ リ ン 1 と interaction す る こ と を shows し た. ま ず mammalian cells の ラ フ ト draw points に G alpha q と フ ロ テ ィ リ ン が falls in す る こ と, cell で の before turning 発 now is お よ び group in え body タ ン パ ク qualitative を with い た the in vitro system で struck the が interaction す る こ と を confirm し た. に, kind of 々 の G alpha と の interaction を beg し 検 た と こ ろ, alpha 12 G alpha I, G, G alpha 13 と の interaction は 観 examine さ れ ず G alpha s と の weak い interaction の み recognize め ら れ た こ と か ら, フ ロ テ ィ リ ン と 1 G alpha と の interaction は G alpha q に specific で あ る こ と が Ming ら か と な っ た. さ ら に フ ロ テ ィ リ ン の 1 N at the end of the lateral の 192 ア ミ ノ acid か ら な る SPFH ド メ イ ン と G at the end of the alpha q の N の alpha ヘ リ ッ ク に が ス contains field interaction necessary で あ る こ と を Ming ら か に し た. フ ロ テ ィ リ ン 1 の siRNA を modulation し, Gq を interface し て lead き up こ さ れ 応 る cells, example え ば intracellular カ ル シ ウ ム 応 answer, チ ロ シ ン リ ン acidification, MAP キ ナ ー ゼ activeness な ど へ の フ ロ テ ィ リ ン 1 ノ ッ ク ダ ウ ン の unseen fruit を 検 beg in で あ る. ま た, ア ダ プ タ ー タ ン パ ク qualitative Nck1 が membrane に お い て Gq お よ び Src の obscene で 働 き cell wandering の adjust に masato is す る こ と を early め て Ming ら か に し た.

项目成果

期刊论文数量(6)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
The mechanism of membrane-Translocation of RGS8 induced by Ga expression
Ga表达诱导RGS8膜易位的机制
  • DOI:
  • 发表时间:
    2004
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Masuho;I.;Itoh;M.;Itoh;H.;Saitoh.O.
  • 通讯作者:
    Saitoh.O.
T The adaptor protein Nck1 mediates endothelin A receptor-regulated cell migration through the Cdc42-dependent c-Jun N-terminal kinase pathway
T 接头蛋白 Nck1 通过 Cdc42 依赖性 c-Jun N 末端激酶途径介导内皮素 A 受体调节的细胞迁移
  • DOI:
  • 发表时间:
    2004
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Spiliotis ET;Kinoshita M;Nelson WJ;Y.Miyamoto et al.
  • 通讯作者:
    Y.Miyamoto et al.
国内特許
国内专利
  • DOI:
  • 发表时间:
    2006
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
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  • 资助金额:
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