ゲノム情報にもとづくM.Pneumoniaeの細胞構造の理解と病原性の解明

基于基因组信息了解肺炎支原体的细胞结构和致病性

• 批准号: 17019067
• 负责人: 見理 剛
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17019067/
• 关键词: マイコプラズマ; 細菌ゲノム; 細胞骨格; 細胞付着; 感染; 滑走運動性; GFP; 蛍光タンパク質タグ

M.pneumoniaeの全689個のORFのうち200個をInvitrogen社のGatewayシステムのベクターにクローン化した。このうち約100個をEYFPの遺伝子と連結してM.pneumoniaeで発現させ、細胞内局在を蛍光顕微鏡で観察した。その結果、接着器官に存在することが知られていた7つのタンパク質のうち、HMW1、HMW2、HMW3、P30、P65の5つでは接着器官部分に明るい蛍光が観察され、EYFPタグを付けたことによって局在を視覚化することができた。しかし、P1とORF6はうまく視覚化することができなかった。EYFP蛍光タグ法はM.pneumoniaeのORF産物の細胞内局在を調べる手段としておおむね有効ではあるが、ORFによっては正確な結果が得られない場合があるので注意する必要がある。その他、今回調べたORFのうち、明らかに再現性のある局在パターンを示したのは約10個だった。P41、P24、P200は、接着器官の基部に局在していることが観察された。これらはM.penumoniaeをTritonX-100で処理した時に不溶画分に残ることからも、細胞骨格成分であると考えられる。また酵素と考えられる数個のORF産物と、機能未知のORF産物も接着器官付近に局在した。現在これらの接着器官部位での局在をさらに確認している。再現性のある局在パターンを示したORF産物についてはEYFPとECFPの二つの蛍光タグを用いて局在部位の比較を行った。この方法の分解能は比較的高く、数十nm程度の局在部位の違いを蛍光像のずれとして検出できた。この分析からは、これまで免疫蛍光法では同じ部位に存在していると考えられていたHMW1とHMW3タンパク質が、HMW3の方が接着器官の末端側にHMW1はより基部側に存在していることがわかった。

All 689 ORF of M.pneumoniae were converted to 200 ORF of Invitrogen. About 100 EYFP genes were detected by light microscopy. The results, the presence of the attached organ, the presence of the attached organ, the attached P1 and ORF6 are not visible. EYFP light source method M.pneumoniae ORF products in the intracellular regulation of the means, there is a need to pay attention to the correct results, there are cases There are about 10 minutes to show the reproducibility of the ORF and the future. P41, P24 and P200 are closely related to the basal organs. M. penumonica was treated with Triton X-100, and the insoluble fraction was determined. Several ORF products of unknown function were found in the adjacent organs. Now the organ parts are confirmed in the future. Reproducibility of ORF products in the presence of EYFP and ECFP in the presence of ORF products The resolution of this method can be compared to the high and tens of nm levels in the position of the light image. This analysis shows that HMW 1, HMW 3, HMW 3, HMW 4, HMW 6, HMW 7, HMW 8, HMW 9, HMW 1,HMW 9, HMW 1,HHMW 1,H

项目成果

Involvement of P1 adhesion in gliding motility of Mycoplasma pneumoniae as revealed by the inhibitory effects of antibody under optimized gliding conditions.

优化滑动条件下抗体的抑制作用揭示了 P1 粘附参与肺炎支原体的滑动运动。

• 发表时间: 2005
• 期刊: J.Bacteriol. 187
• 作者: Seto S.;Kenri T.;Tomiyama T.;Miyata M.
• 通讯作者: Miyata M.

マイコプラズマ属

支原体属

• 发表时间: 2005
• 期刊: 感染と抗菌薬 8(4)
• 作者: Hiratsuka Y.;Miyata M.;Uyeda T.Q.P.;見理 剛
• 通讯作者: 見理 剛

Sequence analysis of gliding protein Gli349 in Mycoplasma mobile,

移动支原体中滑动蛋白 Gli349 的序列分析，

• 发表时间: 2005
• 期刊: Biophysics 1
• 作者: Metsugi S.;Uenoyama A.;Adan-Kubo J.;Miyata M.;Yura K.;Kono H.;Go N.
• 通讯作者: Go N.

Living microtransporter by uni-directional gliding of Mycoplasma along microtracks

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2005.03.168
• 发表时间: 2005-05-27
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Hiratsuka, Y;Miyata, M;Uyeda, TQP
• 通讯作者: Uyeda, TQP

マイコプラズマの滑走運動 新たな生体運動メカニズム(総説)

支原体滑行运动：一种新的生物运动机制（综述）

• 发表时间: 2005
• 期刊: 蛋白質核酸酵素 50
• 作者: Iguchi;A.;et.al.;宮田真人
• 通讯作者: 宮田真人