ゲノム情報にもとづくM.Pneumoniaeの細胞構造の理解と病原性の解明

基于基因组信息了解肺炎支原体的细胞结构和致病性

• 批准号: 18018044
• 负责人: 見理 剛
• 金额: $ 5.18万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18018044/
• 关键词: マイコプラズマ; 細菌ゲノム; 細胞骨格; 細胞付着; 感染; 滑走運動性; GFP; 蛍光タンパク質タグ

昨年度までに作製したM.pneumoniae M129株の全ORFクローンコレクションを利用して,個々のORF産物の細胞内局在解析を続けた。以前から知られていた接着器官構成成分7種[MPN141(P1),MPN309(P65),MPN310(HMW2),MPN447(HMW1),MPN452(HMW3),MPN453(P30),MPN567(P200)]に加えて,これまで11種のORF産物[MPN001,MPN022,MPN065,MPN092,MPN117,MPN295,MPN311,MPN312,MPN321,MPN387,MPN688]が接着器官部分,または細胞の尾部に局在するのが観察されている。このうちMPN092,117,295,311,309,387,474,688は界面活性剤Triton X-100に不溶な画分に含まれるタンパク質で,細胞骨格の構成成分である可能性が高い。また,MPN022,065,321は代謝酵素のホモログ,MPN001,688はそれぞれDnaN,Sojタンパク質のホモログであった。これらの細胞内局在を電子顕微鏡によって高解像度に観察する試みも行った。電顕によるORF産物の局在観察を行うために,M.pneumoniae細胞を0.1%のTriton X-100でおだやかに処理し,細胞骨格構造(Rod部分)を露出させる条件検討を行った。また,電顕画像を平均化することによって,より解像度の高い像が取得できるようになった。電顕によるORF産物の局在観察は,免疫電顕法によって行った。本年度はMPN447(HMW1),452(HMW3),309(P65),312(P24)タンパク質にこの方法を適用し,これらのタンパク質がRod構造の先端からP65,HMW3,HMW1,P24の順で存在しているのを明確に観察した。

The complete ORF of M.pneumoniae M129 strain was isolated and analyzed in vitro. There were 7 ORF components [MPN141(P1),MPN309(P65),MPN310(HMW2),MPN447(HMW1),MPN452(HMW3),MPN453(P30),MPN567(P200)], and 11 ORF products [MPN001,MPN022,MPN065, MPN 092,MPN117,MPN295,MPN 311, MPN 312,MPN 321, MPN 387,MPN 395,MPN311,MPN 312,MPN 387,MPN 395,MPN311, MPN387,MPN 395, MPN312,MPN 395,MPN 311,MPN387,MPN 395, MPN 395, MPN MPN688] The part of the joint organ, the tail part of the cell, is observed in the middle. MPN092,117,295,311,309,387,474,688 High possibility of inclusion of Triton X-100 as an insoluble component in cellular skeleton. MPN022,065,321,MPN001,688, MPN022,065,321, MPN022, 322, 322, 321, 322, 321, 321, 321, 322, 322, 322, 321, 322, 323, 323, 324, 324, 325, 325, 326, 326, 326, 326, 327, 327, 328, 327, 32, 328, 327, 38, 38, 3 This is the first time that a cell has been examined by an electronic microscope. The ORF products of M.pneumoniae cells were treated with 0.1% Triton X-100 and the cell skeleton structure (Rod part) was exposed. The image is averaged, and the resolution is high. The ORF product was detected by immunoelectrochemistry. This year, MPN447(HMW1), 452 (HMW3), 309 (P65), 312 (P24) were selected for the quality analysis, and the existence of P65,HMW3,HMW1, and P24 in the Rod structure was clearly observed.

项目成果

Cytoskeletal "jellyfish" structure of Mycoplasma mobile

• DOI: 10.1073/pnas.0704280104
• 发表时间: 2007-12-04
• 期刊: PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
• 影响因子: 11.1
• 作者: Nakane, Daisuke;Miyata, Makoto
• 通讯作者: Miyata, Makoto

Identification of a novel nucleoside triphosphatase from Mycoplasma mobile: a prime candidate for motor of gliding motility

从移动支原体中鉴定出一种新型核苷三磷酸酶：滑动运动马达的主要候选者

• 发表时间: 2007
• 期刊: Biochmical Journal 403
• 作者: Ohtani N;Miyata M
• 通讯作者: Miyata M

Genotyping analysis of Mycoplasma pneumoniae clinical strains in Japan between 1995 and 2005:Type shift phenomenon of M.pneumoniae clinical strains.Sequence analysis of gliding oritein Gli349 in Mycoplasma mobile

1995-2005年日本肺炎支原体临床株基因分型分析：肺炎支原体临床株型变现象。移动支原体中滑动蛋白Gli349的序列分析

• 发表时间: 2008
• 期刊: J.Med.Microbiol 11
• 作者: Kenri;T.;Okazaki;N.;Yamazaki;T.;Narita;M.;Izumikawa;K.;Matsuoka;M.;Suzuki;S.;Horino;A. and Sasaki;T.
• 通讯作者: T.

電顕に期待するもの

从电子显微镜中可以看到什么

• 发表时间: 2006
• 期刊: 細胞工学
• 作者: Miyata M;Ogaki H;宮田真人;宮田真人
• 通讯作者: 宮田真人

Sequence analysis of gliding protein Gli349 in Mycoplasma mobile,

移动支原体中滑动蛋白 Gli349 的序列分析，

• 发表时间: 2005
• 期刊: Biophysics 1
• 作者: Metsugi S.;Uenoyama A.;Adan-Kubo J.;Miyata M.;Yura K.;Kono H.;Go N.
• 通讯作者: Go N.