蛋白質品質管理システムによる生体防御制御の分子メカニズム

蛋白质质量控制系统生物防御控制的分子机制

基本信息

批准号：
17028044
负责人：
鳥越俊彦
金额：
$ 4.48万
依托单位：
Sapporo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

1 生体防御機構における内因性Danger signalの分子メカニズム細胞内蛋白質品質管理システムを担っている分子シャペロンHSP70,HSP90,ORP150,GRP78のそれぞれに、樹状細胞を刺激する活性があることを見出した。これらの活性は、細胞表面に発現している未知のIiSP受容体を介しており、TNFαやIL-12のようなサイトカインの産生を促して自然免疫を活性化するばかりでなく、HSPと結合しているCliellt蛋白質やペプチドの取り込みとMHC class I経路へのcross presentationを促進することによって獲得免疫系をも誘導していることを明らかにした。さらに、HSP Client分子がペプチドの場合と蛋白質の場合とでは抗原提示経路が異なり、前者は主としてearly endosomeからrecyclillg MHCに、後者はendosomeからcytosolへ移行しproteasolneによる分解を受けることを明らかにした。HSP70と結合するClientペプチドの結合モチーフについてSPR法を用いて解析した結果、7-merの結合モチーフ(LRIALRY)を明らかにした。このモチーフをHSP複合型ベプチドワクチンに応用した結果、動物実験においてヘプチド特異的な細胞傷害性T細胞応答を効果的に誘導することが確認された。これらの発見は新規ワクチン技術として医療へ応用可能である。また、HSP結合性阻害物質DSGは樹状細胞のHSP受容体へのリガンドの結合を抑制することを見出した。2 新規分子シャヘロンの機能解析新規分子シャヘロンDNAJC8,DNAJB8のそれぞれを遺伝子クローニングし、それらの機能に関して解析した。その結果、DNAJC8は核内に局在しMachado-Joseph病の原因遺伝子ataxin-3に由来するポリグルタミン蛋白の核内凝集と細胞死を抑制することを見出した。凝集抑制に関わるDNAJC8の機i能ドメインをmappingし、JドメインではなくC末端ドメインであることを明らかにした。DNAJB8は細胞質に局在し細胞分裂とcentrosomeの機能制御に関与していることを明らかにした。

1。生物防御机制中内源性危险信号的分子机制。发现负责细胞内蛋白质质量控制系统的分子伴侣HSP70，HSP90，ORP150和GRP78具有刺激树突状细胞的活性。这些活性是通过在细胞表面表达的未知IISP受体进行的，不仅刺激了TNFα和IL-12等细胞因子的产生，以激活先天免疫，而且还通过促进Cliellt蛋白和肽的摄取而诱导获得的免疫系统，这些蛋白质和肽与HSP结合到HSP和交叉介绍与MHC类别I Pathery I Path。此外，抗原呈递途径在肽和蛋白质的情况之间有所不同，前者主要从早期内体转移到循环细胞体MHC，而后者则从内体到细胞质和细胞质中的破坏以及proteasolne的降解。使用SPR方法分析了与HSP70结合的客户肽的结合基序，并揭示了7-MER（LRIALRY）的结合基序。由于将此基序应用于HSP复合的Veptide疫苗，因此可以有效地在动物实验中诱导七角特异性细胞毒性T细胞反应。这些发现可以作为新型疫苗技术应用于医疗。我们还发现，HSP结合抑制剂DSG抑制了配体与树突状细胞中HSP受体的结合。 2新分子陈列子的功能分析。新型分子chaheron dnajc8和dnajb8是克隆的基因，并分析了它们的功能。结果，我们发现DNAJC8定位在细胞核中，并抑制源自ataxin-3的多谷氨酰胺蛋白的核聚集和细胞死亡，这是一种用于Machado-Joseph疾病的致病基因。与抑制聚集的DNAJC8的功能结构域被映射为表明它是C末端结构域而不是J结构域。 DNAJB8位于细胞质中，并参与细胞分裂和中心体功能调节。