HIVによるMHC class I発現抑制機序の解明と免疫応答の賦活化戦略

阐明 HIV 抑制 MHC I 类表达的机制以及激活免疫反应的策略

• 批准号: 12035221
• 负责人: 鳥越 俊彦
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12035221/
• 关键词: HIV; Tat; Nef; MHC class I; Survivin; Smac; Protein Therapy; Apoptosis

HIVに対するprotein therapyを考案し,その基礎的研究を進めている.(1)HIV tat蛋白質の11アミノ酸から成る細胞膜透過ドメインと,GFP蛋白質との融合蛋白質を作成し,細胞内への浸透性について解析した.Tat-GFPは細胞膜を透過しなかったが,Tat-Survivin-GFP蛋白質は透過した.Tat濃度依存性,温度感受性を確認した.ドミナントネガティブSurvivin蛋白質を腫瘍細胞に浸透させたところ,細胞にApoptosisを引き起こすことに成功した.(2)つぎに,Tat細胞膜透過ドメインを含む合成ペプチドが細胞膜を透過することを共焦点レーザー顕微鏡によって確認した.HIV nef蛋白質が発現を抑制するHLA-A分子の細胞質内ドメインから,HIV nef蛋白と会合すると予想される領域を推定し,この領域とTatドメインとの融合合成ペプチドを作成した.現在,Nef発現細胞を作成し,この合成ペプチドがNefの作用を抑制するかどうか実験を行っている.(3)細胞のapoptosisを促進するミトコンドリア蛋白質SmacのN末端機能ドメインとTatドメインとの融合合成ペプチドSmac7-Tatを作成した.このペプチドは細胞内に浸透し,細胞にapoptosisを引き起こすことを確認した.HIV proteaseが発現しているHIV感染細胞内で活性化するような,HIV protease認識配列を組み込んだTat-smac7ペプチドを設計した.これがHIV感染細胞に対して選択的にapoptosisを引き起こすことができるかどうか,今後,検証する.

HIVに studies する of するprotein therapyを, を basic research を advances めて る る る.(1)HIV Tat protein の 11 ア ミ ノ acid か ら into る membrane through ド メ イ ン と, GFP protein と の fusion protein を し consummate, intracellular へ の に soak つ い て parsing し た. Tat - GFP は を cell membrane through し な か っ た が, tat - Survivin - GFP protein は through し た. Tat concentration dependence, temperature Susceptibility を confirm し た. ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ ィ ブ Survivin protein に を swollen sores cells soak さ せ た と こ ろ, に cells Apoptosis を lead き up こ す こ と に successful し た. (2) つ ぎ に, Tat membrane through ド メ イ ン を む synthesis ペ プ チ ド が を cell membrane through す る こ と を total focus レ ー ザ ー 顕 micro Mirror に よ っ て confirm し た. HIV nef protein が 発 now を inhibit す る HLA - A molecular の cytoplasm ド メ イ ン か ら, nef HIV protein meet と す る と to think さ れ る field を presumption し, こ の field と Tat ド メ イ ン と の fusion synthesis ペ プ チ ド を made し た. Now, Nef 発 cell を し consummate, now こ の synthetic ペ プ チ ド が Nef の を restrain す る か ど う か be 験 を line っ て い る. の (3) cell apoptosis を promote す る ミ ト コ ン ド リ ア protein Smac の N terminal function ド メ イ ン と Tat ド メ イ ン と の fusion synthesis ペ プ チ ド Smac7 - Tat を Made し た. こ の ペ プ チ ド は に saturate し inside the cell, cell に apoptosis を lead き up こ す こ と を confirm し た. HIV protease が 発 now し て い る で HIV infection cell activation す る よ う な, HIV Protease meet with column group を み 込 ん だ Tat - smac7 ペ プ チ ド を design し た. こ れ が HIV infected cells に し seaborne て sentaku に of apoptosis を lead き up こ す こ と が で き る か ど う か, henceforth, 検 card す る.

项目成果

Nagata,M.,T.Akazawa,Y.Tamura,T.Torigoe,N.Sato. et al.: "The expression of a novel natural killer inhibitory molecule, Cho-1, on the chorionic cytotrophoblast cells of successful pregnancy, but not of spontaneous abortion."Pathol.Int.. 50. 824-831 (2000)

永田，M.，T.赤泽，Y.田村，T.Torige，N.佐藤。

Fujita,T.,Y.Matsumoto,I.Hirai,T.Torigoe,K.Jimbow,N.Sato. et al.: "Immunosuppressive effect on T cell activation by interleukin-16-cDNA-transfected human squamous cell line."Cell Immunol.. 202. 54-60 (2000)

藤田，T.，Y.松本，I.Hirai，T.Torigoe，K.Jimbow，N.Sato。

Sato,N.,Y.Nabeta,H.Kondo,T.Torigoe,H.Ikeda et al.: "Human CD8 and CD4 T cell epitopes of epithelial cancer antigens."Cancer Chemother Pharmacol.. 46. 86-90 (2000)

Sato,N.,Y.Nabeta,H.Kondo,T.Torigoe,H.Ikeda 等：“上皮癌抗原的人类 CD8 和 CD4 T 细胞表位。”Cancer Chemother Pharmacol.. 46. 86-90 (2000

鳥越俊彦,一戸崇,佐藤昇志: "分子シャペロンによる細胞機能制御,分子シャペロンと病態:抗原ペプチド"シュプリンガーフェアラーク東京出版(印刷中). (2001)

Toshihiko Torigoe、Takashi Ichinohe 和 Shoji Sato：“分子伴侣控制细胞功能、分子伴侣和病理状况：抗原肽”Springer Verlag 东京出版（2001 年）。

Kanki,K.,T.Torigoe,I.Hirai,Y.Tamura,A.Yagihashi,N.Sato. et al.: "Molecular cloning of rat NK target structure-the possibility of CD44 involvement in NK cell-mediated lysis."Microbiol.Immunol.. 44. 1051-1061 (2000)

Kanki，K.，T.Torige，I.Hirai，Y.Tamura，A.Yagihashi，N.Sato。