タンパク質タグの付加による細胞内タンパク質の局在・機能変換の構造学的研究

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タンパク質タグによるタンパク質の修飾の代表的なものとしては、ユビキチン化とSUMO化がある。一般にユビキチンの付加は基質タンパク質の構造変化を伴わないので、ユビキチンとユビキチン結合ドメインの相互作用が鍵となる。一方、SUMOによる修飾は基質タンパク質の構造変化を伴う場合がある。平成17年度に、SUMO化を受けたTDG(Thymine DNA Glycosilase)の結晶構造を決定したが、本年度はその機能変換の詳細を調べるべく研究を行なった。イソペプチド結合が形成されていないSUMO-1とTDGの複合体はDNA結合活性を保持することが知られている。そこで、この複合体の結晶構造も決定し、両者を比較した。全体的には極めて類似した構造だったが、TDGのα7に違いが見られ、この部分がDNA結合活性に寄与していることが推察できた。SUMOには四つのアイソフォーム(SUMO-1,2,3,4)が知られ、これらの間に機能的な違いが指摘されている。我々は、SUMO-3とSIM(Sumo Interacting Motif)の相互作用について検討するため、溶液MR法によりSUMO-3と、これに結合するSIM(SUMO Interacting Motif)ペプチドとの複合体の構造決定を行なった。既に決定されているSUMO-1とSIMの複合体構造と比較しSUMOアイソフォーム間におけるSIM認識の差異について明らかにした。亀また、SUMO-3化されたTDGの結晶構造も決定した。