Toll様受容体を介するシグナル伝達経路の構造機能解析

Toll样受体介导的信号转导途径的结构和功能分析

• 批准号: 18770092
• 负责人: 杤尾 豪人
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18770092/
• 关键词: 自然免疫; Toll様受容体; NMR; 構造生物学

Toll様受容体及びIL-18受容体に関連するアダプター分子MyD88はTIRドメインとDeathドメインからなる。H18年度に決定したMyD88 TIRドメインの立体構造及び、培養細胞でのレポーターアッセイの結果からMyD88 TIRドメイン中の、TLR4受容体シグナル伝達に必須のアミノ酸残基を同定することができている。本年度は、MyD88 TIRとそれと結合するとされるもう一つのTIRアダプタータンパク質Mal(TIRAP)の間の相互作用を生化学的に精査した。GSTプルダウンアッセイによって、野生型のMyD88TIRとMal TIRが結合することを明らかにした。また、MyD88 TIRの幾つかの残基をアラニン置換したところ、結合が弱くなることを見いだした。これらの残基は、上記のレポーターアッセイでTLR4シグナル伝達が弱まる残基と一致する。さらに、二重置換では一層の相互作用の減弱が見られた。以上のことから、TLR4シグナル伝達には、MyD88 TIRとMal TIRの直接相互作用が必須であることを明らかにした。また、Mal TIRについて、結晶化用の試料調製を完了し、スクリーニングを開始した。IL-18シグナル伝達経路は、TLR4経路と同様、MyD88を介することが知られている。上記、MalはMyD88を細胞膜ヘリクルートする"sorting adaptor"であることが知られているが、IL-18系でも同様の"sorting adaptor"の存在が考えられる。生化学的な実験により、TRAMという分子がこの役割を果たしてる可能性があるデータを得た。

Toll receptor and IL-18 receptor are related to each other. H18 year determined the MyD88 TIR receptor's three-dimensional structure and the results of cell culture and identification of acid residues necessary for MyD88 TIR receptor and TLR4 receptor. This year, the interaction between MyD88 TIR and TIRAP was examined in detail. GSTs are available in the form of wild MyD88TIR and Mal TIR. MyD88 TIR residues are replaced and bound weakly. The residues in the above list are identical to those in the TLR4 list. The interaction between the two layers is weakened. The direct interaction between MyD88 TIR and Mal TIR is necessary. The preparation of samples for crystallization is completed and the preparation of samples for crystallization is started. IL-18, TLR4, MyD88, etc. In the above note, Mal and MyD88 cell membrane "sorting adaptor" are known to exist, and IL-18 is the same "sorting adaptor". Biochemistry is the most important aspect of molecular biology.

项目成果

Heteronuclear multidimensional NMR and homology modelling studies of the C-terminal nucleotide-binding domain of the human mitochondrial ABC transporter ABCB6

人线粒体 ABC 转运蛋白 ABCB6 C 端核苷酸结合域的异核多维 NMR 和同源建模研究

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Biomolecular NMR (印刷中)
• 作者: M.Itoh;K.Nagatomo;Y.Kubo;Y.Sugimoto;O.Saitoh;M.Watanabe;Kaori Kurashima-Ito
• 通讯作者: Kaori Kurashima-Ito

MyD88タンパク立体構造解析による新規シグナル伝達制御分子の開発

通过MyD88蛋白3D结构分析开发新型信号转导控制分子

• 发表时间: 2007
• 作者: 大西秀典;加藤善一郎;李愛蓮;名田匡利;相馬和佳;松井永子;金子英雄;近藤直実;杤尾豪人;白川昌宏
• 通讯作者: 白川昌宏

変異導入MyD88蛋白によるTo11様受容体/インターロイキン18シグナルの特異的制御法

突变 MyD88 蛋白对 To11 样受体/白细胞介素 18 信号的特异性调节

• 发表时间: 2007

Crystal structure of SUMO-3-modified thymine-DNA glycosylase

• DOI: 10.1016/j.jmb.2006.03.036
• 发表时间: 2006-05-26
• 期刊: JOURNAL OF MOLECULAR BIOLOGY
• 影响因子: 5.6
• 作者: Baba, Daichi;Maita, Nobuo;Shirakawa, Masahiro
• 通讯作者: Shirakawa, Masahiro

A novel magnetic resonance-based method to measure gene expression in living cells

• DOI: 10.1093/nar/gkl135
• 发表时间: 2006-01-01
• 期刊: NUCLEIC ACIDS RESEARCH
• 影响因子: 14.9
• 作者: Ki, S;Sugihara, F;Kokubo, T
• 通讯作者: Kokubo, T