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磁気共鳴イメージング法を使った生体内遺伝子発現プロファイルのための新手法の開発

开发利用磁共振成像进行体内基因表达谱分析的新方法

基本信息

批准号：
16011250
负责人：
杤尾豪人
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Yokohama City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16011250/
关键词：
遺伝子発現 MRI レポーター遺伝子ポリリン酸

项目摘要

本研究テーマでは、MRIで検出可能な遺伝子発現レポーターシステムとして、ポリリン酸及びその合成酵素群を使ったシステムを開発し、様々なモデル動物に適用している。平成16年度は、これまでに試みてきた酵母、マウス、ショウジョウバエの他に、アフリカツメガエルを使ったMRI遺伝子発現レポーターシステムの構築を開始した。アフリカツメガエルは、受精卵にcDNA或いはmRNAを微量注入して発生させることにより、様々な遺伝子を発現させることができる。平成16年度は、当研究室内においてアフリカツメガエルの飼育を開始し、その受精卵にポジティブコントロールとして、GFPの遺伝子を持つプラスミドを微量注入し、発生させた。その結果、アフリカツメガエル幼生の生体においてGFPの発現を確認した。現在は、本研究オリジナルのMRIレポーター遺伝子であるポリリン酸合成酵素PPKの強制発現と発生を試みている。その他、酵母の系についてはMRI測定のハイスループット化を行なった。すなわち、液体培養中の酵母をキャピラリーに入れ、これらを一本の8mm NMRサンプル管に入れて、測定することにより、16検体の^<31>P MRI画像を同時に取得することができるシステムを構築した。さらに、このシステムを様々な遺伝子組み換え酵母試料に適用し、酵母内での特定遺伝子の発現量を比較的定量的に見積もれることを明らかにした。

This study revealed the possibility of gene expression and its application in animals. In 2016, the construction of MRI system was started. Microinjection of cDNA or mRNA into fertilized eggs In 2016, when the breeding process in the laboratory began, the fertilized eggs were injected into the laboratory and the GFP gene was injected into the laboratory. As a result, the development of GFP in young organisms was confirmed. Now, this study aims to explore the stress generation and development of PPK by MRI. The results of MRI were compared with those of other yeasts. The yeasts in liquid culture were collected and analyzed simultaneously with the 8mm NMR imaging <31>system. In addition, the quantitative analysis of the production of specific genes in yeast samples was carried out.

项目成果

期刊论文数量（10）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

High-throughput construction method of expression vector of peptides for NMR study suited for isotopic labeling.

适用于同位素标记的核磁共振研究肽表达载体的高通量构建方法。

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
Protein Eng Des Sel 17
影响因子：
0
作者：
Tenno;T.;Goda;N.;Tateishi;Y.;Tochio;H.;Mishima;M.;Hayashi;H.;Shirakawa;M.;Hiroaki;H.
通讯作者：
H.

Structure of the ubiquitin-interacting motif of S5a bound to the ubiquitin-like domain of HR23B

DOI：
10.1074/jbc.m309448200
发表时间：
2004-02-06
期刊：
JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
影响因子：
4.8
作者：
Fujiwara, K;Tenno, T;Shirakawa, M
通讯作者：
Shirakawa, M

Structure of the UBA domain of Dsk2p in complex with ubiquitin: Molecular determinants for ubiquitin recognition

DOI：
10.1016/j.str.2005.01.011
发表时间：
2005-04-01
期刊：
STRUCTURE
影响因子：
5.7
作者：
Ohno, A;Jee, J;Shirakawa, M
通讯作者：
Shirakawa, M

Intracellular phosphate serves as a signal for the regulation of the PHO pathway in Saccharomyces cerevisiae

DOI：
10.1074/jbc.m312202200
发表时间：
2004-04-23
期刊：
JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
影响因子：
4.8
作者：
Auesukaree, C;Homma, T;Harashima, S
通讯作者：
Harashima, S

Structural basis for distinct roles of Lys63- and Lys48-linked polyubiquitin chains

DOI：
10.1111/j.1365-2443.2004.00780.x
发表时间：
2004-10-01
期刊：
GENES TO CELLS
影响因子：
2.1
作者：
Tenno, T;Fujiwara, K;Shirakawa, M
通讯作者：
Shirakawa, M

DOI：
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作者：
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0
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