磁気共鳴イメージング法を使った生体内遺伝子発現プロファイルのための新手法の開発

开发利用磁共振成像进行体内基因表达谱分析的新方法

• 批准号: 15011247
• 负责人: 杤尾 豪人
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Yokohama City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15011247/
• 关键词: MRI; イメージング; 遺伝子発現プロファイル; レポーターアッセイ

平成15年度はphm遺伝子群以外のポリリン酸^<31>P MRイメージングのレポーター遺伝子の探索を行い、ポリリン酸の蓄積に関与する遺伝子の一つであるvma2がレポーター遺伝子として適していることを見いだした。vma2をGal1プロモーターの下流に繋ぎ、培地中のガラクトース濃度の変化でvma2の転写を誘導したところ、vma2の転写のONとポリリン酸の蓄積量はよく相関した。同様にvma2のmRNA量の定量もノーザンブロットにより行ったが、これもポリリン酸蓄積量とよく相関した。酵母中のポリリン酸濃度が酵母細胞内の水の^1Hの磁気緩和定数に大きく影響を与えることを明らかにした。上記vma2を欠損した酵母株ではポリリン酸が蓄積されない。この変異株では、野生型酵母に比べ、水の^1Hの縦緩和時間(T1)が約10%長くなった。このT1値の違いを利用した^1H MRI画像を撮像することによって、液体培地中で培養している酵母がポリリン酸を蓄積しているかどうかを見分けられることを明らかにした。この手法はポリリン酸の^<31>Pをモニターする方法よりも感度が高く、より短時間で測定することができる。マウスのポリリン酸を測定するために、^<31>P MRI装置の検出コイルの制作を行った。

In 2015, we explored the relationship between the accumulation of polyacid and the development of polyacid, and we found that the relationship between polyacid and polyacid is very important<31>. The concentration of vma2 in the lower reaches of the Gal1 solution changes, the concentration of vma2 in the medium changes, the concentration of vma2 in the medium changes, and the concentration of vma2 in the medium changes. The quantitative analysis of vma2 mRNA was carried out in the same way. The concentration of citric acid in yeast affects the magnetic relaxation of water in yeast cells. The yeast strain vma2 is deficient in acid accumulation. Compared with wild-type yeast, water and water release time (T1) is about 10% longer. T1 and T1H images are collected in liquid culture. This <31>method is very sensitive to acid, and it can be measured in a short time. The <31>production of MRI equipment

项目成果

Auesukaree C, Homma T, Tochio H, Shirakawa M, Kaneko Y, Harashima S.: "Intracellular phosphate serves as a signal for the regulation of the PHO pathway in Saccharomyces cerevisiae."Journal of Biological Chemistry. 279,17. 17289-17294 (2004)

Auesukaree C、Homma T、Tochio H、Shirakawa M、Kaneko Y、Harashima S.：“细胞内磷酸盐在酿酒酵母中充当调节 PHO 途径的信号。”生物化学杂志。

Fujiwara K, Tenno T, Sugasawa K, Jee JG, Ohki I, Kojima C, Tochio H, Hiroaki H, Hanaoka F, Shirakawa M.: "Structure of the ubiquitin-interacting motif of S5a bound to the ubiquitin-like domain of HR23B."Journal of Biological Chemistry. 279,6. 4760-4767 (2

Fujiwara K、Tenno T、Sugasawa K、Jee JG、Ohki I、Kojima C、Tochio H、Hiroaki H、Hanaoka F、Shirakawa M.：“与 HR23B 泛素样结构域结合的 S5a 泛素相互作用基序的结构