脳リンクプロテインによる脳実質ヒアルロン酸-CSPG複合体の機能制御

脑连接蛋白对脑实质透明质酸-CSPG复合物的功能调节

• 批准号: 17046012
• 负责人: 大橋 俊孝
• 金额: $ 2.82万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17046012/
• 关键词: リンクプロテイン; ヒアルロン酸; コンドロイチン硫酸プロテオグリカン

1.Bral2/Haln4ノックアウトマウスの神経周囲網マトリックス分子発現への影響:まず、Northern blottingと免疫組織学的方法でBral2/Hapln4遺伝子発現がないことを確認した。我々は先に発表した論文(Bekku et al.,Mol.Cell.Neurosci.,2003)で、Bral2/Hapln4の神経周囲網(PNN)へのタンパク質局在を報告し、ヒアルロン酸結合型コンドロイチン硫酸プロテオグリカンであるbrevicanとの共局在を示した。Bral2/Hapln4ノックアウトマウスでは抗brevican抗体の神経核でのPNN様の染色性が大きく低下し、diffuseになっていることが確認できた。しかしながら、reticulotegmental nucleus of the pons (RtTg)ではBral2欠損マウスでbrevicanのPNN様の発現パターンが一部のみdiffuseになっていたことから、RtTgにおいてはBral2以外のLPが補償している可能性も考えられる。2.PNN形成におけるBral2/Haln4の役割:我々はBral2/Hapln4ノックアウトマウスのBral2/Hapln4遺伝子のエキソンにtauLacZ遺伝子をノックインしている。すなわち、+/-マウスではBral2/Hapln4遺伝子の転写活性に従い、Bral2発現神経軸索をX-gal染色でき、同時にBral2タンパク質は免疫染色できる。脳の神経回路の中でも単純な回路を持つ小脳に焦点を当て発現細胞とタンパク質局在の関係についての情報収集を行った。X-galの染色はtauの発現に依存しており、本来軸索に染まるはずであるが、プルキンエ細胞においては樹状突起もX-galで染色されてしまい、関係を可視化することはできなかった。これは、もともとプルキンエ細胞では樹状突起でもtauが発現しているためであると考えられる。しかしながら、小脳核においてBral2タンパクのみの発現が見られる細胞と、Bral2mRNAとBral2タンパクの両方の発現が見られる神経細胞が存在していた。これはBral2発現神経細胞とBral2タンパクの局在が必ずしも一致していないことを示す。このことから、Bral2mRNAの発現部位とタンパク発現部位が異なっていることがわかり、Bral2mRNA発現細胞の終末でタンパクが発現することが更に強く示唆された。またBral2/Hapln4欠損マウスにおいてはbrevicanのPNN様の発現パターンがdiffuseになるという結果を得ている。Bral2/Hapln4は一部の神経回路の神経核に特異的に発現している。Bral2の欠損により、brevican以外のプロテオグリカンのPNNの局在に影響する結果も観察できたが、その度合いは神経核ごとにより異なる。Bral2の欠損により各々の会合体破壊がおこることから、ランビエ絞輪周囲あるいは神経周囲膜の細胞外微小環境において特異的会合体形成に必須であることがわかった。

1. The effect of Bral2/Hapln4 on the molecular development of the neurocycle-like gene: Northern blotting and immunohistochemical methods were used to confirm the molecular development of Bral2/Hapln4. The paper was published by Bekku et al., Mol.Cell.Neurosci., 2003), Bral2/Hapln4 Neurological Network (PNN), the quality of the report, the acid binding type of the report, the brevican network. Bral2/Hapln4 is a highly reactive, diffuse antibody to the PNN of the brain. Reticulotegmental nucleus of the pons (RtTg) is the possibility of a partial diffusion in the presence of brevican and PNN elements other than Bral2. 2. The formation of PNN is called Bral2/Haln4, and the Bral 2/Hapln4 is called Bral2/Hapln4. Bral2/Hapln4 gene activity was detected by X-gal staining and Bral 2 protein immunostaining. In the middle of the brain circuit, the pure circuit maintains a small focus, and the information collection in the middle of the relationship between the cells and the quality is performed. X-gal staining is dependent on axonal staining and visualization.これは、もともとプルキンエ细胞では树状突起でもtauが発现しているためであると考えられる。The expression of Bral2mRNA and Bral2mRNA is found in neurons. This is the first time that Bral 2 has been discovered. This is especially true because the location of Bral2 mRNA expression is different from the location of Bral2 mRNA expression, and the location of Bral2 mRNA expression is also different from the location of Bral2 mRNA expression. Bral2/Hapln4 is short of loss, but the PNN of brevican is short of diffusion, and the result is short of loss. Bral2/Hapln4 is a part of the neurologic circuit that occurs in a specific way. Bral2's loss is not the same as that of brevican, but it is the same as that of PNN. Bral2's damage to the extracellular microenvironment of the peripheral membrane is necessary for the formation of specific aggregates.

项目成果

Brain Link Proteins, Neuromodulators for scaffolding the specialized hyaluronan-binding extracellular milieu in the brain. "Neural Proteoglycans"

Brain Link 蛋白，神经调节剂，用于在大脑中搭建专门的透明质酸结合细胞外环境。

• 发表时间: 2007
• 作者: Oohashi T;Bekku Y
• 通讯作者: Bekku Y

Current Progress in understanding the formation and function of chondroitin sulfate proteoglycan complexes in the Brain : New insights from the brain link proteins

了解大脑中硫酸软骨素蛋白聚糖复合物的形成和功能的最新进展：来自大脑连接蛋白的新见解

• 发表时间: 2005
• 期刊: Hyaluronan Structure metabolism, biological activities, therapeutic applications Volume II
• 作者: Oohashi T;Bekku Y;Mukai Y;Ogawa H;Ninomiya Y
• 通讯作者: Ninomiya Y