腎糸球体基底膜におけるマトリックス分子構築と遺伝子発現

肾小球基底膜基质分子构建及基因表达

• 批准号: 07671251
• 负责人: 大橋 俊孝
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07671251/
• 关键词: 基底膜; IV型コラーゲン; ノックアウトマウス

1.マウスα6(IV)鎖遺伝子(col4a6)及びα5(IV)鎖遺伝子(col4a5)上流プロモーター領域遺伝子断片のクローニングマウスα6(IV)鎖及びα5(IV)鎖cDNAをプローブとして129SVJマウスのゲノムDNAライブラリーをスクリーニングし、両遺伝子上流プロモーター領域を含むクローンTSg6を分離した。2.col4a6及びcol4a5遺伝子発現調節機構の解析上記クローンTSg6を解析したところ、col4a5のエキソン1とcol4a6のエキソン1,2が含まれてした。しかしながら、ヒトでみられた第一エキソンの択一的スプライシングはマウスα6(IV)鎖遺伝子ではみられなかった。現在、col4a6上流DNA断片をCAT遺伝子及びLacZ遺伝子に連結したconstructを作製し遺伝子発現調節機構解析を行なっているところである。3.col4a6遺伝子のノックアウトマウスの作製第1項で得られたcol4a6断片を利用して、col4a6のエキソン2部分にNeo^r遺伝子を挿入し、null mutationの改変を導入するターゲティングconstructを作成した。ES細胞ヘターゲティングconstruct DNAの注入後、サザンブロティングにより相補的遺伝子組換えの起こっているES細胞クローンを選別し、胚盤胞へ注入した。現在、キメラマウスの誕生を待っている段階である。4.Alport症候群,(平滑筋腫との合併症),Goodpasture症候群の病因と各α(IV)鎖との関連を調べる。ヒトα6(IV)鎖遺伝子の構造解析プロジェクトから決定されたエクソン・イントロン構造を基に、平滑筋腫との合併を伴ったAlport症候群患者の白血球DNAを用いて、α6(IV)鎖遺伝子及びα5(IV)鎖遺伝子の欠失領域の解析を行なっている。両遺伝子のイントロン1にまたがって欠失した症例が発見できた。さらに、細かい欠失部分解析を行なっている。これらの遺伝子解析によりこの症例の病因解析が進展すると期待される。

1. The upper-level fragments of the alpha-6 (IV) subset (col4a6) and the alpha-5 (IV) subset (col4a5) are divided into two parts, namely, the alpha-6 (IV) and the alpha-5 (IV) cDNA fragments, the 129SVJ fragments, the DNA fragments, the TSg6 splitters, the TSg6 splitters, the TSg6 splitters. The 2.col4a6 and the col4a5 sub-system are responsible for the analysis of the previous information. The TSg6 is used to analyze the information, and the col4a5 is responsible for the first col4a6 and the second. Please tell me that the first one, the first, the first and the first. Now, col4a6 upstream DNA fragments, CAT fragments, and LacZ fragments, link, construct, and construct, can be used to analyze the operating system. The first item of the 3.col4a6 was obtained. The col4a6 fragments were used. The col4a6 fragments were used. The 2-part Neo

项目成果

Yoshikazu Sado: "Establishment by the rat lymph node method of epitope-defind monodonal antibodies recognizing the six different α chaius of・・・・" Histochem.Cell Biol.104. 267-275 (1995)

Yoshikazu Sado：“通过大鼠淋巴结方法建立识别六种不同 α 链的表位单克隆抗体” Histochem.Cell Biol.104 (1995)。

Toshitaka Oohashi: "Isolation and Structure of the COL4A6 Gene Encoding the Human α6 (IV) Collagen Chain and Comparison with Other Type IV Collagen Genes" J.Biol.Chem.270. 26863-26867 (1995)

Toshitaka Oohashi：“编码人类 α6 (IV) 胶原链的 COL4A6 基因的分离和结构以及与其他 IV 型胶原基因的比较”J.Biol.Chem.270 (1995)。

Yoshifumi Ninomiya: "Differential Expression of Two Basement Membrane Collagen Genes,COL4A6 and COL4A5,Demonstrated by Immunofluorescence Staining・・・" J.Cell Biol.130. 1219-1229 (1995)

Yoshifumi Ninomiya：“通过免疫荧光染色证实两种基底膜胶原蛋白基因 COL4A6 和 COL4A5 的差异表达......”J.Cell Biol.130（1995）。

二宮善文: "コラーゲンのマトリックス構築と遺伝子発現" 呼吸. 14. 770-774 (1995)

Yoshifumi Ninomiya：“胶原蛋白基质构建和基因表达”呼吸。 14. 770-774 (1995)