クロマチン構造制御から迫る核小体形成機構

从染色质结构控制探讨核仁形成机制

• 批准号: 17050003
• 负责人: 奥脇 暢
• 金额: $ 4.29万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17050003/
• 关键词: 核小体; 核; ヒストン; リボソームRNA; 転写; クロマチン; リボソーム; RNA; rRNA

真核細胞の細胞核には数十億塩基対にも及ぶ膨大な染色体DNAが収納されている。DNAは核内で一様に分布するわけではなく、遺伝情報を効率よく発現するために機能領域を形成している。核小体はリボソームを合成する場であり、リボソームRNA (rRNA)の転写・切断・修飾が協調的に行われる場である。核小体をはじめとする核内の機能領域がどのように形成され、その構造が維持されるのかはまったくわかっていない。本研究では、核内の機能領域の一つである核小体の構造形成の分子メカニズムを解明することを目的として研究を進めている。核小体は、リボソームRNA (rRNA)遺伝子を含む染色体領域(Nucleolar Organize Region, NOR)を中心に、rRNAの成熟に関わるタンパク質-RNA複合体(RRNP複合体)が集合して形成される。はじめに、RRNP複合体が核小体領域に局在するメカニズムを明らかにするため、RRNP複合体構成因子とNORとの相互作用を、生化学的な手法を用いて検討した。その結果、RRNP構成因子であるFibdllarin、Nucleolin、B23と、いくつかのリボソームタンパク質がNORの構成因子であるUBFやヒストンと相互作用することが明らかになった。クロマチン免疫沈降法を用いて、RRNP構成因子が相互作用するNORの領域を検討した結果、rRNA遺伝子のほぼ全体に分散して相互作用していた。PNB構成因子とNORとの相互作用にはrRNA遺伝子の活性は必要ではないが、RRNP複合体構成因子のRNA-タンパク質複合体形成が必須であった。核小体構造が崩壊する分裂期にはRNA-タンパク質複合体が崩壊し、NORとの相互作用も著しく低下することが観察された。したがって、核小体の構造を維持するためには、RRNP複合体構成因子がRNA-タンパク質複合体を形成し、NORと相互作用することが重要であると考えられる。今後は、NORとPNBとの相互作用を仲介する因子の実体を明らかにすべく研究を進める。

Eukaryotic organisms have billions of chromosomes in their nuclei and a few chromosomes in their DNA. DNA is distributed within the nucleus, and information is generated at a rate that forms a functional domain. Nucleosome synthesis is a complex process. RNA (rRNA) synthesis is a complex process. The functional domain of the nucleosome is formed and maintained. The purpose of this study is to explore the molecular structure of nucleosomes in the functional domain of nuclei. Nucleosome DNA, rRNA, DNA, DNA, In addition, the role of the RRNP complex in the nucleosome field is clarified, and the interactions between RRNP complex components and NOR are discussed using biochemical methods. Results, RRNP component factors Fibdllarin, Nucleolin, B23 The results of NOR domain analysis and rRNA domain analysis using the immunoprecipitation method The interaction between PNB components and NOR is necessary for the activity of rRNA gene, and the formation of RNA-protein complex is necessary for RNP complex components. The structure of nucleosomes was observed during the cleavage phase of RNA-protein complexes. The structure of nucleosomes is maintained, and the components of RRNP complexes are important for the formation of RNA-protein complexes and NOR interactions. In the future, the interaction between NOR and PNB will be further studied.

项目成果

Histone acetylation-independent transcription stimulation by a histone chaperone.

• DOI: 10.1093/nar/gkl1077
• 发表时间: 2007
• 期刊: Nucleic acids research
• 影响因子: 14.9
• 作者: Kato K;Miyaji-Yamaguchi M;Okuwaki M;Nagata K
• 通讯作者: Nagata K

Involvement of template-activating factor I/SET in transcription of adenovirus early genes as a positive-acting factor

• DOI: 10.1128/jvi.80.2.794-801.2006
• 发表时间: 2006-01-01
• 期刊: JOURNAL OF VIROLOGY
• 影响因子: 5.4
• 作者: Haruki, H;Okuwaki, M;Nagata, K
• 通讯作者: Nagata, K

Assembly and disassembly of nucleosome core particles by Human nucleosome Assembly Protein-I

人核小体组装蛋白-I对核小体核心颗粒的组装和拆卸

• 发表时间: 2005
• 期刊: Molecular and Cellular Biology 25・23
• 作者: Hideyuki Tanabe;Katrin Kupper;Takafumi Ishida;Michaela Neusser;Hiroshi Mizusawa;Mitsuru Okuwaki
• 通讯作者: Mitsuru Okuwaki