真核細胞におけるクロマチン構造を介した遺伝子発現制御機構の解析

真核细胞染色质结构介导的基因表达调控机制分析

• 批准号: 12780484
• 负责人: 奥脇 暢
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2001
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12780484/
• 关键词: クロマチン; アデノウイルス; 転写; 複製; 核小体; リボソーム

遺伝子の発現、あるいはゲノムDNAの複製は厳密に制御されている。これらの反応はゲノムDNAとヒストンをはじめとするクロマチンタンパク質との複合体、クロマチン構造によって制御されている。転写や複製の開始にはそれ以前にクロマチン構造の変換が必要で、それによって転写や複製に関わる因子がDNA上に結合しやすくなると考えられている。しかしどのような機構によりクロマチン構造が変換し、転写・複製がおこるかに関してはほとんどわかっていない。本研究ではクロマチンを鋳型とした転写や複製の制御機構を解明することを目的として研究を進めた。アデノウイルスクロマチンの複製を活性化する因子としてHeLa細胞の細胞抽出液からTemplate Activating Factor(TAF)-IIIを同定・精製した。TAF-IIIは核小体タンパク質B23の2つのサブタイプ、B23.1とB23.2からなる。B23は2つの酸性アミノ酸に富んだ領域を持ち、B23.1のC末端にはB23.2にはない35アミノ酸からなる特異配列がある。組み換え体B23を用いた実験より、B23の酸性アミノ酸領域はアデノウイルスクロマチンからの複製促進活性に必須であることが明らかになった。またB23はこの領域を介して細胞のクロマチンタンパク質ヒストンと直接相互作用し、裸のDNA上にクロマチン構造を再構成する活性を持っていた。このことから、B23は細胞内において、クロマチン構造変換あるいは再構成活性を持つヒストンシャペロンとして機能している可能性が示唆される。今後は、B23が細胞内で実際にクロマチンの構造変換制御にかかわりうるかを検討し、より高次で複雑な核構造の変換制御機構を解明すべく研究を進めていこうと考えている。

DNA replication is controlled by DNA replication. The DNA sequence of the DNA sequence was determined by DNA sequencing. The first step in the process of replication is to change the structure of DNA and to combine it with DNA. The structure of the organization is changed, written and copied. This research aims to further the research on the control mechanism of writing and copying. Template Activating Factor(TAF)-III in HeLa Cell Extract TAF-III has a small nuclear body, B23 and B23.2. B23.1 C-terminal B23.2 C-terminal B23 is an acid domain that promotes replication. B23 is a domain mediator that interacts directly with DNA and reconstructs itself. B23 has the potential to change its structure and function in cells. In the future, B23 cells will be used to study the structural transformation mechanism of high order complex nuclear structure.

项目成果

M.Okuwaki, A.Iwamatsu, M.Tsujimoto, K.Nagata: "Identification of nucleophosmin/B23, an acidic nucleolar protein, as a stimulatory factor for in vitro replication of adenovirus DNA complexed with viral basic core proteins"Journal of Molecular Biology. 311.

M.Okuwaki、A.Iwamatsu、M.Tsujimoto、K.Nagata：“核磷蛋白/B23（一种酸性核仁蛋白）的鉴定，作为与病毒碱性核心蛋白复合的腺病毒 DNA 体外复制的刺激因子”分子生物学杂志

M.Okuwaki, K.Matsumoto, M.Tsujimoto, K.Nagata: "Function of nucleophosmin/B23, a nucleolar acidic protein, as a histone chaperone"FEBS letter. 506. 272-276 (2001)

M.Okuwaki、K.Matsumoto、M.Tsujimoto、K.Nagata：“核仁酸性蛋白核磷蛋白/B23 作为组蛋白伴侣的功能”FEBS 信。