新規膜タンパク群による活動依存的シグナル伝達の解明

阐明新型膜蛋白的活性依赖性信号转导

• 批准号: 18022053
• 负责人: 岡村 康司
• 金额: $ 4.29万
• 依托单位: National Institutes of Natural Sciences Okazaki Research Facilities
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18022053/
• 关键词: ゲノム; シグナル伝達; 神経科学; 蛋白質; 生理学

(1)VSOP1について基本構造(ストイキオメトリー)を明らかにする目的でwestern blotによる解析を行った。Heat感受性のダイマーのバンドが見られ,クロスリンカーで明確なdimerの位置にバンドが見られた。共同研究者Peter Larssonと蛍光ラベルによる計測を行ったところ,FRET現象が確認され,オリゴマーであること,とくにdimerである可能性が高いことが明らかになった(PNASにin press)。VSPについては酵素との共役とゲート電流特性を明らかにし(J.Physiol.2007;J.Biol.Chem.In press),基質特異性を明らかにした(PNASにrevise中)。(2)それぞれの電位センサー蛋白の機能を調節する因子を同定する目的で,想定される分子との共発現による免疫沈降実験,two hybridスクリーニングを行った。現時点では機能的に結合する分子は同定されていないが,条件を変えて検討中である。(3)崎村教授らによる支援班を通じ,VSOP1のコンディショナルB6ノックアウトマウスの作成が進み,既にES細胞が樹立されたVSOP1についてはキメラマウスを作成中である。(4)免疫組織学的解析により,成体マウス脳においてミクログリアにおけるVSOP1の発現を確認した。胎児時のミクログリアには,発現が確認されないことから,発生時期依存的な発現を起こす可能性が示唆された。(5)VSPの電位センサー領域を用いて蛍光タンパクとの融合分子を作製し,膜電位レポーターとして開発する実験を理研の宮脇グループと共同で進め,変化率の著明に高いプローブを得て,現在分子特性とイメージングへの適用について実験を進めている(投稿中)

(1) VSOP1 Basic structure (start-up): clear purpose: western blot: analysis Heat sensitivity and heat sensitivity can be seen clearly in the position of the dimmer. Co-investigator Peter Larsson confirmed the FRET phenomenon with high probability (PNAS in press). VSP is the most important enzyme in the system (J. Physiol.2007; J. Biol. Chem. In press), matrix specificity (PNAS revise). (2)For the purpose of determining the factors regulating the function of the protein,two hybrid proteins are used to regulate the immune system. At present, the function of the molecule is the same as that of the molecule, and the condition is changed. (3)Professor Saki Mura's support team is in communication with VSOP1, and VSOP1 is in communication with VSOP 1, and VSOP1 is in communication with ES cells. (4)Immunohistological analysis confirmed the development of VSOP1 in adults. The probability of occurrence of a birth time-dependent event is indicated by the occurrence of a birth time-dependent event. (5) The potential of VSP in the field of application of the fusion molecule to control, membrane potential change and development of the process of research and development of the palace threat to common progress, the conversion rate of the bright high level of the molecule to obtain, the current molecular characteristics and application of the technology to improve the process (in submission)

项目成果

Detaled comparison of expressed and native voltage-gated proton channel currents

表达和天然电压门控质子通道电流的详细比较

• 期刊: J.Physiol 印刷中
• 作者: Musset;B.;Cherny;V.V.;Morgan;D.;Okamura. Y.;Ramsey;I.S.;Clapham;D.E.& DeCoursey T.E.
• 通讯作者: D.E.& DeCoursey T.E.

Is the Hv1 proton channel requied for the activity of the NADPH ovidase

NADPH 卵酶的活性需要 Hv1 质子通道吗

• 发表时间: 2008
• 作者: Antoun El Chemal;Okochi;Y.;Okamura. Y. & Demaurex;N.
• 通讯作者: N.

貧食細胞における電位依存性プロトンチャネルVSOPの機能解析

下噬细胞电压门控质子通道VSOP的功能分析

• 发表时间: 2007
• 作者: 大河 内善重;佐々木 真理;黒川 竜紀;岩崎 広英;岡村 康司
• 通讯作者: 岡村 康司

電位センサードメインの動作原理と生理機能

潜在传感器域的工作原理和生理功能

• 发表时间: 2008
• 作者: Kobayashi;T.;et al.;木曽良明;岡村 康司
• 通讯作者: 岡村 康司

How do animals utilize signals of membrane potentials?:lessons from two voltage-sensing proteins

动物如何利用膜电位信号？：两种电压传感蛋白的教训

• 发表时间: 2007
• 作者: Okamura;Y.;Sasaki;M.;Kurokawa;T.;Okochi;Y.;Hossain;M.I.;Iwasaki;H.;Murata;Y. & Higashijima;S
• 通讯作者: S