新規電位感受性フォスファターゼの生理機能の解明

阐明新型电压敏感磷酸酶的生理功能

• 批准号: 17659065
• 负责人: 岡村 康司
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: National Institutes of Natural Sciences Okazaki Research Facilities
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659065/
• 关键词: 酵素; シグナル伝達; 生体分子; 生理学; 蛋白質; ホヤ; ゲノム; 電位センサー; プロトンチャネル; ホスファターゼ; イオンチャネル

新規電位センサー蛋白の動作原理の解明のため、VSPとVSOP1について以下の実験を行った。(1)VSP:電位センサードメインのS4の陽電荷が電位感知に重要であることがわかっているが、これとカウンターバランスして構造変化する部位(おそらく陰性チャージ)がVSP蛋白内に由来するのか、脂質などの環境に由来するのかは明確でない。そこで、Ci-VSPの電位センサードメインの陰性チャージをもつ酸性アミノ酸を中性アミノ酸であるアスパラギンに置換し、アフリカツメガエル卵母細胞を用いてゲート電流の計測を行った。S2の酸性アミノ酸151Dをアスパラギンに置換したものではゲート電流のQ-Vカーブ(電荷-電圧曲線)が脱分極側へシフトし、S2の164Dと186Dを同時にアスパラギンに変更したものでは、逆にQ-Vカーブが過分極側へシフトした。このことは、異なる部位の酸性アミノ酸がS4に大して異なる役割をもっており、電位センサーが膜電位を感知するのに貢献するが、ひとつの酸性アミノ酸が必須の役割を担っている訳ではないことが示唆された。今後他の酸性アミノ酸についても変異導入実験を行い、電位感知におけるカウンターバランスの機構を理解し、電位依存性チャネルの場合との比較を行いたい。(2)VSOP1:VSOP1は細胞内外のpHに依存して電位活性化曲線が変化する。pHと膜電位にクロストークの分子実体の解明がこの蛋白の動作原理の理解にもっとも重要である。そこでS4の様々な領域にアミノ酸置換を行い、これらの分子の膜電位依存性とpH依存性を計測した。多くの例で電流電圧曲線およびコンダクタンス電圧曲線はシフトが認められたが、pH感受性が失われた例は見られなかった。このことから、電位感知に関わる部位とpHの感受性を決定する部位とは異なる可能性が示唆された。

The new regulation explains the principle of action of protein, VSP and VSOP1. (1)VSP: The positive charge of S4 in the potential sensor is important for potential sensing. The position of structural change (negative) is the origin of VSP protein and the origin of lipid in the environment. Ci-VSP electric potential measurement of oocytes in the presence of acid, neutral acid, substitution and current measurement. S2's acid 151D is replaced by the current Q-V curve (charge-voltage curve), and S2's 164D and 186D are replaced by the current Q-V curve. The acid in the different parts of S4 is different from the acid in the membrane potential. In the future, he will conduct research on the mechanism of acid sensitivity, potential sensitivity, and potential dependence. (2) VSOP1: VSOP1 is pH dependent inside and outside the cell. It is important to understand the molecular mechanism of membrane potential The membrane potential dependence and pH dependence of S4 molecules were measured. For example, the current voltage curve is too high for the current voltage curve to recognize, pH sensitivity is too low for the current voltage curve to recognize. The site of potential perception, the site of pH sensitivity, the site of potential perception, the site of potential perception, the site of potential

项目成果

Ankyrin-G regulates inactivation gating of the neuronal sodium channel, Navl.6

锚蛋白-G 调节神经元钠通道失活门控，Navl.6

• 发表时间: 2006
• 期刊: J nerophysiol 96
• 作者: Shirahata;E;Iwasaki;H;Takagi;M;Changqing Lin;Vann Bennett;Okamura;Y;Hayasaka;K
• 通讯作者: K

Tight junctions in Schwann cells of peripheral myelinated axons: a lesson from claudin-19-deficient mice.

• DOI: 10.1083/jcb.200501154
• 发表时间: 2005-05-09
• 期刊: The Journal of cell biology
• 作者: Miyamoto T;Morita K;Takemoto D;Takeuchi K;Kitano Y;Miyakawa T;Nakayama K;Okamura Y;Sasaki H;Miyachi Y;Furuse M;Tsukita S
• 通讯作者: Tsukita S

電位センサーの動作原理と電位感受性酵素VSP

电压传感器和电压敏感酶VSP的工作原理

• 发表时间: 2006
• 期刊: 標準生理学(イオンチャンルの発現制御機構) 25.3月号
• 作者: 津元国親;倉田康孝;古谷和春;倉智嘉久.;川上英良;Mimura K; Nagai Y; Inoue K; Matsumoto J; Suhara T; Nishijo H; Takada M; Minamimoto T;岡村康司
• 通讯作者: 岡村康司

Novel ion channel-like polypeptide and use thereof

新型离子通道样多肽及其用途

• 发表时间: 2005

A voltage sensor-domain protein is a voltage-gated proton channel

• DOI: 10.1126/science.1122352
• 发表时间: 2006-04-28
• 期刊: SCIENCE
• 影响因子: 56.9
• 作者: Sasaki, M;Takagi, M;Okamura, Y
• 通讯作者: Okamura, Y