小脳プルキンエ細胞の分化に伴う自発発火特性の発達機構と役割

小脑浦肯野细胞分化相关自发放电特征的发育机制和作用

• 批准号: 14017092
• 负责人: 岡村 康司
• 金额: $ 4.29万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14017092/
• 关键词: 電位依存性チャネル; ナトリウムチャネル; 自発発火

Resurgent電流の成立機構を明らかにする目的で、Nav1.6遺伝子のスプライス変異型を探索したところ、二種の新規のスプライス変異を同定した。これらはドメイン1のみからなるタンパク(Delta2,Delta5)をコードした。以前報告されているドメイン1と2からなるスプライス変異(Delta4)ともあわせて全長型、不完全長型3種、に関してRT-PCR法により、RNAの発現時期を調べたところ、Delta4が全長型の増加に伴い消失するのに対して、Delta2とDelta5は生後数週齢まで残存していた。これらスプライス変異型分子の機能的な意味を探るため、アフリカツメガエル卵母細胞への発現実験を行なった。Delta2,4,5の単独ではいずれも電流を形成することはなかった。また、全長型Nav1.6との共発現で、電流量、キネティクスに有為な差はなく、Resurgent電流の出現も確認できなかった。3つの不完全長型分子がドメイン1と2の間の細胞内ループを有しておりこの部位がPKAのリン酸化を介したチャネル発現の促進現象に関わることから、全長型のPKAによる発現促通現象を抑制する可能性が考えられたので、PKAカクテルおよびbeta-adrenergic receptorの刺激による発現促通現象を定量したものの、これについても不完全長型サブユニットによる有為な効果は認められなかった。従って、Delta2,4,5の機能的な意義は、それらのタンパク発現にもとづくものは考えにくく、むしろ不完全な転写抑制によりもれ出るチャネルmRNAからの発現を抑制するためのメカニズムと考えられる。

Resurgent's current establishment mechanism is clearly defined as the purpose, Nav1.6, and the difference between the two new rules is determined.これらはドメイン1のみからなるタンパク(Delta2,Delta5)をコードした。In previous reports, there were three types of RNA: full-length and incomplete long type. In addition, the development time of RNA was adjusted by RT-PCR. Delta 4 was the increase and disappearance of full-length type. Delta2 and Delta5 remained several weeks after birth. The significance of the function of these heteromorphic molecules has been explored. Delta2,4,5 is the only way to create a current. The total occurrence of Nav1.6, the current amount, the occurrence of Resurgent current, and the occurrence of Resurgent current are confirmed. 3. The intracellular protein expression between the incomplete long form and the beta-adrenergic receptor is related to the promotion of PKA acidification and the inhibition of PKA acidification. The possibility of PKA acidification and beta-adrenergic receptor stimulation is examined. This is not the case. The function of Delta2,4,5 is to inhibit the expression of mRNA in the cell.

项目成果

Ebihara, T.et al.: "Coexpression ofa Cav1.2 protein lacking an N-terminus and the first domain specifically suppresses L-type calcium channel activity"FEBS letters. 529. 203-207 (2002)

Ebihara, T.等人：“缺乏 N 末端和第一个结构域的 Cav1.2 蛋白的共表达特异性抑制 L 型钙通道活性”FEBS 字母。

Okamura, Y.et al.: "The ascidian dihyrdopyridine-resistant calcium channel as the prototype of chordate L-type calcium channel"NeuroSignals. (In press).

Okamura，Y.et al.：“海鞘二氢吡啶抗性钙通道作为脊索动物 L 型钙通道的原型”神经信号。

Nakajo, K.et al.: "Identification, functional characterization and developmental expression of the ascidian Kv4-class potassium channel"Neurosci. Res.. 45. 59-70 (2003)

Nakajo, K. 等人：“海鞘 Kv4 类钾通道的鉴定、功能特征和发育表达”Neurosci。