课题基金 / 基金详情

Analysis of lipid regulation of neurotransmitter receptors using photo-sensitive amino acid

Analysis of lipid regulation of neurotransmitter receptors using photo-sensitive amino acid
利用光敏氨基酸分析神经递质受体的脂质调节
批准号:
22KF0249
负责人:
岡村 康司
金额:
$1.47万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份:
2023
资助国家:
日本
项目状态:
未结题
起止时间:
2023-03-08 至 2025-03-31

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
HCKを用いてイオンチャネルにおけるPIP2の結合を光で操作できるかどうかを確認するため、PIP2結合にlysineが関わることが従来良く知られており、機能発現が安定しているマウス由来内向き整流性K+チャネルKir2.1分子を用いて解析した。マウスKir2.1のK188にはPIP2が結合することが知られており、クラゲ由来のKir2.1オルソログではこの部位がアスバラギンになっているためPIP2親和性が低く、チャネル活性が弱いことが知られている。マウスKir2.1のK188にアンバーサプレッサーコドン(TAGコドン)を導入し、Deiters博士らが確立したtRNA(UAG-HCK)およびアミノアシルtRNA合成酵素をコードするプラスミドをアフリカツメガエル卵母細胞の核に顕微注入し、翌日Kir2.1 (K188TAG)のmRNAとHCKを細胞質に顕微注入して、1日後または2日後に、2本微小電極による膜電位固定法による、内向き整流性K+電流の電気生理学的計測を行なった。405 nmのUV光を照射し、計時的に内向きK+電流量の計測を行い、uncagingによるPIP2結合の回復過程を解析した結果、UV照射による電流量の有意な増加が確認された。この電流増加の程度は、細胞毎にばらつくことと、UV照射量に依存して生じることも明らかになった。
英文摘要
HCKを用いてイオンチャネルにおけるPIP2の結合を光で操作できるかどうかを確認するため、PIP2結合にlysineが関わることが従来良く知られており、機能発現が安定しているマウス由来内向き整流性K+チャネルKir2.1分子を用いて解析した。マウスKir2.1のK188にはPIP2が結合することが知られており、クラゲ由来のKir2.1オルソログではこの部位がアスバラギンになっているためPIP2親和性が低く、チャネル活性が弱いことが知られている。マウスKir2.1のK188にアンバーサプレッサーコドン(TAGコドン)を導入し、Deiters博士らが確立したtRNA(UAG-HCK)およびアミノアシルtRNA合成酵素をコードするプラスミドをアフリカツメガエル卵母細胞の核に顕微注入し、翌日Kir2.1 (K188TAG)のmRNAとHCKを細胞質に顕微注入して、1日後または2日後に、2本微小電極による膜電位固定法による、内向き整流性K+電流の電気生理学的計測を行なった。405 nmのUV光を照射し、計時的に内向きK+電流量の計測を行い、uncagingによるPIP2結合の回復過程を解析した結果、UV照射による電流量の有意な増加が確認された。この電流増加の程度は、細胞毎にばらつくことと、UV照射量に依存して生じることも明らかになった。
期刊论文(0)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Inhibitory modulation of voltage- and pH-gated Slo3 potassium channel by zinc
锌对电压和 pH 门控 Slo3 钾通道的抑制调节
DOI: --
发表时间: 2023
期刊:
影响因子: --
作者: [Rizki Tsari Andriani, Yasushi Okamura, Takafumi Kawai]
通讯作者: Takafumi Kawai
Insight into the function of a unique voltage-sensor protein (TMEM266) and its short form in mouse cerebellum
深入了解小鼠小脑中独特电压传感器蛋白 (TMEM266) 的功能及其短形式
DOI: 10.1042/bcj20220033
发表时间: 2022
期刊: Biochemical Journal
影响因子: 4.1
作者: [Kawai T, Narita H, Konno K, Akter S, Andriani RT, Iwasaki H, Nishikawa S, Yokoi N, Fukata Y, Fukata M, Wiriyasermkul P, Kongpracha P, Nagamori S, Takao K, Miyakawa T, Abe M, Sakimura K, Watanabe M, Nakagawa A, Okamura Y]
通讯作者: Okamura Y
DOI: 10.1016/j.bpj.2023.01.022
发表时间: 2023-06-06
期刊: BIOPHYSICAL JOURNAL
影响因子: 3.4
作者: [Paixao,Ian Costa, Mizutani,Natsuki, Okamura,Yasushi]
通讯作者: Okamura,Yasushi
イノシトールリン脂質認識機構に立脚したイオンチャネルー脂質連関の理解
  • 批准号:
    23K24066
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 资助金额:
    $3.74万
  • 财政年份:
    2024
  • 负责人:
    岡村 康司
  • 依托单位:
Regulation of ion channel by lipid molecules and structural recognition of phosphoinositide
  • 批准号:
    22H02804
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 资助金额:
    $11.07万
  • 财政年份:
    2022
  • 负责人:
    岡村 康司
  • 依托单位:
Visualization of turnover history of membrane proteins in CNS neuron
  • 批准号:
    21K19350
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
  • 资助金额:
    $4.08万
  • 财政年份:
    2021
  • 负责人:
    岡村 康司
  • 依托单位:
新規膜タンパク群による活動依存的シグナル伝達の解明
海外基金