Analysis of lipid regulation of neurotransmitter receptors using photo-sensitive amino acid
Analysis of lipid regulation of neurotransmitter receptors using photo-sensitive amino acid
批准号:
22KF0249
负责人:
岡村 康司
金额:
$1.47万
依托单位:
依托单位国家:
日本
项目类别:
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份:
2023
资助国家:
日本
项目状态:
未结题
起止时间:
2023-03-08 至 2025-03-31
中文摘要
HCKを用いてイオンチャネルにおけるPIP2の結合を光で操作できるかどうかを確認するため、PIP2結合にlysineが関わることが従来良く知られており、機能発現が安定しているマウス由来内向き整流性K+チャネルKir2.1分子を用いて解析した。マウスKir2.1のK188にはPIP2が結合することが知られており、クラゲ由来のKir2.1オルソログではこの部位がアスバラギンになっているためPIP2親和性が低く、チャネル活性が弱いことが知られている。マウスKir2.1のK188にアンバーサプレッサーコドン(TAGコドン)を導入し、Deiters博士らが確立したtRNA(UAG-HCK)およびアミノアシルtRNA合成酵素をコードするプラスミドをアフリカツメガエル卵母細胞の核に顕微注入し、翌日Kir2.1 (K188TAG)のmRNAとHCKを細胞質に顕微注入して、1日後または2日後に、2本微小電極による膜電位固定法による、内向き整流性K+電流の電気生理学的計測を行なった。405 nmのUV光を照射し、計時的に内向きK+電流量の計測を行い、uncagingによるPIP2結合の回復過程を解析した結果、UV照射による電流量の有意な増加が確認された。この電流増加の程度は、細胞毎にばらつくことと、UV照射量に依存して生じることも明らかになった。
英文摘要
HCKを用いてイオンチャネルにおけるPIP2の結合を光で操作できるかどうかを確認するため、PIP2結合にlysineが関わることが従来良く知られており、機能発現が安定しているマウス由来内向き整流性K+チャネルKir2.1分子を用いて解析した。マウスKir2.1のK188にはPIP2が結合することが知られており、クラゲ由来のKir2.1オルソログではこの部位がアスバラギンになっているためPIP2親和性が低く、チャネル活性が弱いことが知られている。マウスKir2.1のK188にアンバーサプレッサーコドン(TAGコドン)を導入し、Deiters博士らが確立したtRNA(UAG-HCK)およびアミノアシルtRNA合成酵素をコードするプラスミドをアフリカツメガエル卵母細胞の核に顕微注入し、翌日Kir2.1 (K188TAG)のmRNAとHCKを細胞質に顕微注入して、1日後または2日後に、2本微小電極による膜電位固定法による、内向き整流性K+電流の電気生理学的計測を行なった。405 nmのUV光を照射し、計時的に内向きK+電流量の計測を行い、uncagingによるPIP2結合の回復過程を解析した結果、UV照射による電流量の有意な増加が確認された。この電流増加の程度は、細胞毎にばらつくことと、UV照射量に依存して生じることも明らかになった。
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专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Inhibitory modulation of voltage- and pH-gated Slo3 potassium channel by zinc
锌对电压和 pH 门控 Slo3 钾通道的抑制调节
DOI:
--
发表时间:
2023
期刊:
影响因子:
--
作者:
[Rizki Tsari Andriani, Yasushi Okamura, Takafumi Kawai]
通讯作者:
Takafumi Kawai
Insight into the function of a unique voltage-sensor protein (TMEM266) and its short form in mouse cerebellum
深入了解小鼠小脑中独特电压传感器蛋白 (TMEM266) 的功能及其短形式
DOI:
10.1042/bcj20220033
发表时间:
2022
期刊:
Biochemical Journal
影响因子:
4.1
作者:
[Kawai T, Narita H, Konno K, Akter S, Andriani RT, Iwasaki H, Nishikawa S, Yokoi N, Fukata Y, Fukata M, Wiriyasermkul P, Kongpracha P, Nagamori S, Takao K, Miyakawa T, Abe M, Sakimura K, Watanabe M, Nakagawa A, Okamura Y]
通讯作者:
Okamura Y
DOI:
10.1016/j.bpj.2023.01.022
发表时间:
2023-06-06
期刊:
BIOPHYSICAL JOURNAL
影响因子:
3.4
作者:
[Paixao,Ian Costa, Mizutani,Natsuki, Okamura,Yasushi]
通讯作者:
Okamura,Yasushi
イノシトールリン脂質認識機構に立脚したイオンチャネルー脂質連関の理解
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批准号:23K24066
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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资助金额:$3.74万
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财政年份:2024
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负责人:岡村 康司
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依托单位:
Regulation of ion channel by lipid molecules and structural recognition of phosphoinositide
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批准号:22H02804
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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资助金额:$11.07万
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财政年份:2022
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负责人:岡村 康司
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依托单位:
Visualization of turnover history of membrane proteins in CNS neuron
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批准号:21K19350
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项目类别:Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
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资助金额:$4.08万
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财政年份:2021
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负责人:岡村 康司
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依托单位:
新規膜タンパク群による活動依存的シグナル伝達の解明
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批准号:18022053
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$4.29万
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财政年份:2006
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负责人:岡村 康司
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依托单位:
活動依存的神経成熟における新規電位感受性タンパクの役割
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批准号:17024071
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$1.66万
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财政年份:2005
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负责人:岡村 康司
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依托单位:
新規電位感受性フォスファターゼの生理機能の解明
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批准号:17659065
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$2.11万
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财政年份:2005
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负责人:岡村 康司
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依托单位:
小脳プルキンエ細胞の自発発火特性の分子的基盤と発達機構の解明
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批准号:16015316
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$3.84万
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财政年份:2004
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负责人:岡村 康司
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依托单位:
脊椎動物型電位センサー分子ファミリーの比較解析による脊椎動物生理機能進化の研究
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批准号:17018043
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$2.11万
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财政年份:2004
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负责人:岡村 康司
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依托单位:
小脳プルキンエ細胞分化における自発発火特性の発達機構とその役割
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批准号:15016107
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$4.29万
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财政年份:2003
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负责人:岡村 康司
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依托单位:
細菌由来電位依存性カチオンチャネルを用いた新規蛍光膜電位レポーターの開発
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批准号:15659054
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项目类别:Grant-in-Aid for Exploratory Research
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资助金额:$2.11万
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财政年份:2003
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负责人:岡村 康司
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依托单位:
小脳プルキンエ細胞の分化に伴う自発発火特性の発達機構と役割
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批准号:14017092
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项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
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资助金额:$4.29万
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财政年份:2002
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负责人:岡村 康司
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依托单位:
神経系Naチャネルの分子種及び生理的機能の多様性の研究
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批准号:06770026
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项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额:$0.58万
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财政年份:1994
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负责人:岡村 康司
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依托单位:
神経特異的Naチャネル遺伝子の転写・翻訳過程の生理・分子生物学的解析
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批准号:05770024
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项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额:$0.64万
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财政年份:1993
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负责人:岡村 康司
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依托单位:
初期胚発生におけるNaチャネル遺伝子転写パターンと細胞間相互作用
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批准号:04770047
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项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额:$0.7万
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财政年份:1992
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负责人:岡村 康司
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依托单位:
誘導性神経分化に伴うNaチャネル遺伝子の発現とその制御機構
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批准号:03770040
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项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额:$0.58万
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财政年份:1991
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负责人:岡村 康司
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依托单位:
Naチャネル開閉機構の変換を指標とした神経細胞分化過程の研究
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批准号:63790382
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项目类别:Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
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资助金额:$1.22万
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财政年份:1988
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负责人:岡村 康司
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依托单位:
海外基金