三量体Gタンパク質の脂質ラフト局在と活性調節の分子メカニズムに関する研究

三聚体G蛋白脂筏定位及活性调控的分子机制研究

• 批准号: 18057002
• 负责人: 中畑 則道
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18057002/
• 关键词: 脂質ラフト; Gタンパク質; G_s; サイクリックAMP; Gβ; コレステロール; ガングリオシド; アデニル酸シクラーゼ

脂質ラフトはスフィンゴ脂質、コレステロールやスフィンゴ糖脂質などに富む細胞膜マイクロドメインであるが、受容体を介するシグナル伝達が効率的に行われる場としても重要であることが近年示唆されている。われわれは最近、PI代謝回転のマストパランによる抑制メカニズムについて検討したところ、マストパランは脂質ラフトからGαqを遊離させ、その作用点は脂質ラフトのガングリオシドであることを明らかにした。しかし、ガングリオシドとGαとの相互作用の分子メカニズムや、Gq以外のGタンパク質の脂質ラフトにおける局在や活性調節におけるガングリオシドの役割については不明のままである。そこで本研究では、マストパランによって引き起こされる脂質ラフトの構成分子の変化を詳細に調べるとともに、Gq以外の三量体Gタンパク質であるGsの局在や活性調節におよぼすマストパランの作用を解析し、脂質ラフトにおける三量体Gタンパク質の活性調節機構の解明を目的とした。はじめにGsの機能について解析を行った。その結果、マストパランはGsシグナルであるサイクリックAMPの上昇作用を用量依存的に抑制し、その作用はガングリオシドによって拮抗されることを明らかにした。また、Gαsの細胞内分布をGFP-Gsを用いて形態的に検討したところ、マストパランはGsを細胞膜から細胞内へと局在変化させることを見出した。一方、脂質ラフト画分を蔗糖密度勾配遠心法により分離すると、正常状態ではGαsが脂質ラフト分画に存在するのに対し、マストパラン処理によりGαsが脂質ラフト分画で減少することが明らかになった。これらの結果から、マストパランのガングリオシドを介する三量体Gタンパク質のラフト局在に及ぼす作用は、GqのみならずGsについても当てはまり、三量体Gタンパク質に共通の現象である可能性が示唆された。

Lipid ラ フ ト は ス フ ィ ン ゴ lipid, コ レ ス テ ロ ー ル や ス フ ィ ン ゴ sugar lipid な ど に rich む membrane マ イ ク ロ ド メ イ ン で あ る が を interface, let body す る シ グ ナ ル 伝 da が に line of the working rate わ れ る field と し て も important で あ る こ と が in recent years in stopping さ れ て い る. わ れ わ れ は recently, PI metabolism back planning の マ ス ト パ ラ ン に よ る inhibit メ カ ニ ズ ム に つ い て beg し 検 た と こ ろ, マ ス ト パ ラ ン は lipid ラ フ ト か ら G alpha q を free さ せ, そ の point は lipid ラ フ ト の ガ ン グ リ オ シ ド で あ る こ と を Ming ら か に し た. し か し, ガ ン グ リ オ シ ド と G alpha と の の molecular interaction メ カ ニ ズ ム や, Gq の G タ ン パ lipid ラ ク qualitative の フ ト に お け る bureau in や activity regulating に お け る ガ ン グ リ オ シ ド の service cut に つ い て は unknown の ま ま で あ る. そ こ で this study で は, マ ス ト パ ラ ン に よ っ て lead き up こ さ れ る lipid ラ フ ト の の constitute molecules - the detailed に を adjustable べ る と と も に, Gq の three quantity body G タ ン パ ク qualitative で あ る Gs の bureau in や activity regulating に お よ ぼ す マ ス ト パ ラ ン の を analytic し, lipid ラ フ ト に お け る three quantity body G タ ン パ ク の activity regulation Institution を state を purpose と た た. Youdaoplaceholder0 じめにGs <s:1> function に じめに て て て parse を lines った. そ の results, マ ス ト パ ラ ン は Gs シ グ ナ ル で あ る サ イ ク リ ッ ク AMP の rising role を dosage dependent に し, そ の role は ガ ン グ リ オ シ ド に よ っ て antagonism against さ れ る こ と を Ming ら か に し た. ま た, G alpha s の intracellular distribution を GFP - Gs を with い て form に beg し 検 た と こ ろ, マ ス ト パ ラ ン は Gs を membrane か ら intracellular へ と bureau in - さ せ る こ と を shows し た. Party, lipids ラ フ ト hook with far を sucrose density method to draw points に よ り separation す る と, normal で は G alpha s が lipid ラ フ ト existence painting に す る の に し, seaborne マ ス ト パ ラ ン 処 Richard に よ り G alpha s が lipid ラ フ ト points draw で reduce す る こ と が Ming ら か に な っ た. こ れ ら の results か ら, マ ス ト パ ラ ン の ガ ン グ リ オ シ ド を interface す る three quantity body G タ ン パ ク qualitative の ラ フ ト bureau in に and ぼ す は, Gq の み な ら ず Gs に つ い て も when て は ま り, 3 G quantity body タ ン パ ク qualitative に の phenomenon common で あ が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

A novel cyathane diterpene, cyrneine A, induces neurite outgrowth in a Racl-dependent mechanism in PC12 cells

一种新型氰烷二萜，cyrneine A，通过 Racl 依赖性机制诱导 PC12 细胞中的神经突生长

• 发表时间: 2007
• 期刊: Life Sci. 80
• 作者: Yutaro Obara;Tomohiro Hoshino;Maria Carla Marcotullio;Rita Pagiotti;Norimichi Nakahata
• 通讯作者: Norimichi Nakahata

Gタンパク質共役型受容体に会合するタンパク質による機能調節

G 蛋白偶联受体相关蛋白的功能调节

• 发表时间: 2007
• 期刊: 薬学雑誌 127
• 作者: 中畑 則道;斎藤 将樹
• 通讯作者: 斎藤 将樹

三量体Gタンパク質を介する情報伝達における脂質ラフトの役割

脂筏在三聚体 G 蛋白介导的信号转导中的作用

• 发表时间: 2007
• 期刊: 薬学雑誌 127
• 作者: 大久保聡子;中畑則道
• 通讯作者: 中畑則道

Effect of 2-(6-cyano-1-hexyn-1-yl)adenosine on the ocular blood flow in rabbits

2-(6-氰基-1-己炔-1-基)腺苷对家兔眼血流的影响

• 发表时间: 2007
• 期刊: Life Sci. 80
• 作者: Takashi Konno;Takehiko Uchibori;Akihiko Nagai;Kentaro Kogi;Norimichi Nakahata
• 通讯作者: Norimichi Nakahata

Inhibitory effect of naringin on lipopolysaccharide (LPS)-induced endotoxin shock in mice and nitric oxide production in RAW 264.7 macrophages

• DOI: 10.1016/j.lfs.2005.04.051
• 发表时间: 2006-01-11
• 期刊: LIFE SCIENCES
• 影响因子: 6.1
• 作者: Kanno, S;Shouji, A;Ishikawa, M
• 通讯作者: Ishikawa, M