GPCRの分子解剖ならびに活性化の可視化

GPCR 的分子解剖和激活可视化

• 批准号: 18057006
• 负责人: 横溝 岳彦
• 金额: $ 3.97万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18057006/
• 关键词: 生理活性脂質; 受容体; 蛍光タンパク質; 脂質; Gタンパク質; cAMP; カルシウム

ロイコトリエンB4第二受容体の生体内リガンドの同定:ラットの様々な臓器より脂質抽出を行い、BLT2過剰発現細胞に添加してBLT2の活性化能を検討した。小腸から抽出したアセトン可容性の脂質画分をHPLCにて展開したりころ、LTB4とは異なるフラクションにBLT2活性化能を検出し、これを精製・質量分析系にて構造を決定したところ、12-HHT(12(S)-Hydroxyheptadeca-5Z,8E,10E-trieoic acid)であることがわかった。合成12-HHTを用いて詳細な解析を行ったところ、12_HHTはLTB4よりも低濃度でBLT2に結合し、細胞内カルシウム上昇を引き起こすことが明らかとなった。これまで12-HHTはトロンボキセンA2産生に伴う倍プロダクトでありね生物活性は無いと考られてきたが、強力なBLT2活性化能を有する新規生理活性脂質であると考えられた。GPCR活性化の可視化:GPCR活性の可視化に向けた受容体発現ベクターの作成を開始した。BLT1受容体のC末端に様々な蛍光タンパク質を融合したベクターを構築し、哺乳動物細胞に発現させ、リガンド刺激によるFRETの変化を観察している。

In vivo identification of B4 secondary receptors: lipid extraction, BLT2 activation, and BLT2 activation Small intestine extract was extracted from the sample and its lipid content was determined by HPLC. The activity of BLT2 was detected and purified by LTB4 and LTB4. The structure of 12-HHT(12(S)-Hydroxyheptadeca-5Z, 8E, 10E-trieoic acid) was determined by mass analysis. Synthesis of 12-HHT in the use of detailed analysis, 12_HHT LTB4, low concentrations of BLT2 binding, intracellular cell cycle rise, lead to the rise of the light. 12-HHT is a new physiologically active lipid that can be activated by BLT2. Visualization of GPCR activity: visualization of GPCR activity towards receptor development starts C-terminal fusion of BLT1 receptor, development of mammalian cells, and FRET transformation were observed.

项目成果

Preparation of 2-, 3-, 4- and 7-(2-alkylcarbamoyl-1-alkylvinyl)benzo[b]furans and their BLT1 and/or BLT2 inhibitory activities

• DOI: 10.1039/b710935k
• 发表时间: 2008-01-01
• 期刊: ORGANIC & BIOMOLECULAR CHEMISTRY
• 影响因子: 3.2
• 作者: Ando, Kumiko;Kawamura, Yoko;Ohishi, Yoshitaka
• 通讯作者: Ohishi, Yoshitaka

12(S)-Hydroxyheptadeca-5Z, 8E-teienoic acid is a natural ligand for leukotriene B4 receptor 2.

12(S)-Hydroxyheptadeca-5Z, 8E-teienoic Acid 是白三烯 B4 受体 2 的天然配体。

• 发表时间: 2008
• 期刊: J. Exp. Med. (印刷中)
• 作者: Okuno;T;他5名
• 通讯作者: 他5名

Preparation of 3-(4-chlorophenyl)-2-(2-aminothiazol-4-yl)-5-methoxybenzo[b]furan derivatives and their leukotriene B(4) inhibitory activity.

• DOI: 10.1039/b711391a
• 发表时间: 2007-09
• 期刊: Organic & biomolecular chemistry
• 影响因子: 3.2
• 作者: Y. Sakata;Mari Kuramoto;Kumiko Ando;Mami Yamaguchi;I. Kawasaki;J. Kunitomo;T. Yokomizo;Y. Ohishi

Attenuation of folic acid-induced renal inflammatory injury in platelet-activating factor receptor-deficient mice

• DOI: 10.2353/ajpath.2006.050634
• 发表时间: 2006-05-01
• 期刊: AMERICAN JOURNAL OF PATHOLOGY
• 影响因子: 6
• 作者: Doi, K;Okamoto, K;Noiri, E
• 通讯作者: Noiri, E

ロイコトリエンによる免疫制御

白三烯的免疫调节

• 发表时间: 2007
• 期刊: 細胞工学 26
• 作者: Sakata;Y;他7名;横溝岳彦
• 通讯作者: 横溝岳彦