肺炎球菌による急性肺障害におけるロイコトリエン受容体の役割

白三烯受体在肺炎球菌引起的急性肺损伤中的作用

• 批准号: 18F18093
• 负责人: 横溝 岳彦
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2018
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2018-04-25 至 2020-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18F18093/
• 关键词: ロイコトリエンB4第二受容体; PLY 肺炎球菌毒素; ペプチドロイコトリエン受容体1; 上皮細胞障害; ペプチドロイコトリエン産生細胞; PLY; BLT2; ロイコトリエン

肺炎球菌感染による個体死亡は、菌が産生する毒素ニューモライシン(PLY)によると考えられているが、詳細は不明である。受入研究者は、生理活性脂質受容体BLT2の欠損マウスがPLYに対して感受性が高く、重篤な急性肺傷害を生じて早期に死に至ることに着目した。PLY投与によって肺胞内に気管支収縮物質ロイコトリエン(LTs)が蓄積したことから、BLT2欠損マウスではLTsに対する感受性が亢進していることが示唆された。BLT2欠損マウスでは、血管内皮細胞におけるLTs受容体CysLT1の発現が高く、CysLT1の拮抗薬の前投与により、PLY毒素依存的な個体死が70%程度レスキューされた。しかし、30%程度は個体死を回避できないことから、LTsの作用以外で死に至る可能性が示唆され、以下の解析を行った。1)BLT2を過剰発現する肺胞上皮細胞を樹立した。LDHの放出・PIによる核染色・細胞の形態変化を指標にPLYに対する感受性を調べたところ、BLT2過剰発現がPLYによる細胞障害を抑制することを見いだした。また、野性型およびBLT2欠損マウスより皮膚表皮角化細胞を単離・培養し、PLYに対する感受性を調べたところ、BLT2欠損細胞ではPLYによる細胞障害が著しく上昇していた。2)マスト細胞を欠損するKitW-shマウスにPLYを気道内投与して、肺胞洗浄液に含まれるLTC4,D4,E4の量をLC-MS/MSにて測定した。KitW-shマウスは、野性型マウスと同等量のLTsを産生したことから、PLY依存性のLTs産生はマスト細胞以外の細胞が行っていることが明らかとなった。3)CysLT1とBLT2を共に発現する細胞を樹立した。BLT2阻害剤の添加により、CysLT1の発現が上昇し、LTD4依存的なERKリン酸化が亢進したことから、BLT2はCysLT1受容体シグナルを抑制していることを見いだした。

Pneumococcal infection, individual death, bacterial production, toxin (PLY), details unknown The study participants reported that the physiologically active lipid receptor BLT2 was deficient in its sensitivity to acute lung injury, early death, and early death. PLY-induced lung cancer has been shown to increase the sensitivity of LTs due to the accumulation of LTs. BLT2 deficiency is related to the development of vascular endothelial cells and LTs receptor CysLT1. The development of CysLT1 antagonist is related to PLY-toxin dependent individuals. 70% of LTs are related to PLY-toxin. 30% of individual deaths are avoided. The probability of death outside the role of LTs is indicated. The following analysis is performed. 1)BLT-2 expression in lung epithelial cells. LDH release, PL staining, PL inhibition The sensitivity of keratinized cells in vitro and in vitro is regulated by the presence of BLT2 deficient cells, and the cellular impairment of BLT2 deficient cells is increased. 2) The amount of LTC4, D 4, E 4 in lung lavage fluid was determined by LC-MS/MS. Kit-sh 3) CysLT1 and BLT2 co-exist in the development of cell culture. BLT2 inhibitor addition, CysLT1 occurrence increased, LTD4 dependent ERK acidification increased, BLT2 CysLT1 receptor inhibition decreased.

项目成果

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