GPCRの運命決定機構

GPCR命运决定机制

• 批准号: 20054013
• 负责人: 横溝 岳彦
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20054013/
• 关键词: Gタンパク質共役型受容体; 細胞内移行; フローサイトメーター

(1)受容体活性化後の受容体の細胞内移行経路の同定:複数のGPCRを用いてリガンド刺激に伴う受容体の細胞内移行を検討したところ、血小板活性化因子受容体PAFRは速やかに細胞内移行するのに対し、ロイコトリエンB4受容体BLT1は全く細胞内に移行しなかった。様々なキメラ受容体の解析の結果、PAFRの細胞内C末端が細胞内移行に必須のドメインであること、逆にBLT1のC末端はリガンド刺激後の受容体の細胞内移行を抑制することを見いだした。さらに、BLT1のヘリックス8に存在する疎水性アミノ酸LLは、リガンド刺激後のBLT1のC末端領域のリン酸化を抑制していることを見いだした。このLLに変異を加えて、細胞膜にC末端がアンカリングできなくした変異BLT1受容体には過剰なリン酸化が生じる結果、野性型受容体では観察されない受容体の細胞内移行が生じることがわかった。現在、BLT1のC末端に結合し受容体の細胞内移行を抑制する分子、あるいはPAFRのC末端に結合し受容体の細胞内移行を促進する分子の同定を試みている。(2) 受容体抗体の作成:一般的にGPCRに対する抗体は樹立が困難とされている。本研究ではBalb/c背景の受容体欠損マウスに、受容体を過剰発現した細胞を複数回腹腔内注射し免疫することで、抗受容体抗体価が上昇することを見いだした。これを応用し、抗マウスBLT1単クローン抗体の樹立に成功した。現在、本法を他の受容体にも応用し、抗BLT2抗体、抗PAFR抗体の樹立を行っている。

(1) after the capacitor was activated, the pathway of intracellular migration was the same: complex GPCR was used to stimulate the receptor with intracellular migration, platelet activating factor PAFR, platelet activating factor, platelet activating factor, BLT1, B4, B4. According to the results of the analysis of the capacitor, the intracellular migration of the C-terminal terminal of the PAFR receptor must be activated, and the intracellular migration of the recipient must be inhibited after the stimulation of the reverse BLT1. The presence of hydrophilic acid LL and inhibition of acid acidification in the C-terminal region of BLT1 after stimulation in the presence of hydrophilic acid, and acid. The results showed that the receptor of LL receptor passed the acidification test, and the wild-type acceptor was observed to migrate into the cell of the recipient cell. At present, BLT1 C-terminal binding receptor receptor intracellular migration inhibition molecule and receptor receptor C-terminal binding receptor intracellular migration promote the same molecular identity. (2) the formation of GPCR antibody: the general antibody antibody is difficult to be detected. In this study, the recipients of Balb/c background were deficient, and the recipients were complicated by intraperitoneal injection of immune antibody and anti-receptor antibody. The anti-BLT1 antibody was successfully used and the antibody was successfully used. At present, the recipient of this method is treated with anti-BLT2 antibody, anti-PAFR antibody and anti-ADM antibody.

项目成果

ロイコトリエンB4第二受容体(BLT2)の生体内リガンドはシクロオキシゲナーゼ産物12-HHTである

白三烯 B4 第二受体 (BLT2) 的体内配体是环氧合酶产物 12-HHT。

• 发表时间: 2008
• 作者: 奥野利明;横溝岳彦;他2名
• 通讯作者: 他2名

12-HHT is a natural ligand for leukotriene B4 receptor2, BLT2.

12-HHT 是白三烯 B4 受体 2 (BLT2) 的天然配体。

• 发表时间: 2009
• 作者: Okuno T;他2名
• 通讯作者: 他2名

A novel synthetic androgen receptor ligand, S42, works as a selective androgen receptor modulator and possesses metabolic effects with little impact on the prostate

一种新型合成雄激素受体配体 S42，作为选择性雄激素受体调节剂，具有代谢作用，对前列腺影响很小

• 发表时间: 2009
• 期刊: Endocrinology 150
• 作者: Ariyasu H;Nakao K;et al;Amagai M;Min L
• 通讯作者: Min L

12-HHT is a natural ligand for leukotriene B4 receptor 2(BLT2).

12-HHT 是白三烯 B4 受体 2 (BLT2) 的天然配体。

• 发表时间: 2009
• 作者: 荒武良総;他2名;Yokomizo T
• 通讯作者: Yokomizo T

ロイコトリエンB4第二受容体BLT2の生体内リガンドの同定

白三烯 B4 第二受体 BLT2 体内配体的鉴定

• 发表时间: 2008
• 作者: 奥野利明;横溝岳彦;他2名
• 通讯作者: 他2名