ロイコトリエン合成・代謝酵素、ロイコトリエン受容体を介したマスト細胞活性化の機序

通过白三烯合成/代谢酶和白三烯受体激活肥大细胞的机制

• 批准号: 12139203
• 负责人: 横溝 岳彦
• 金额: $ 18.56万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-12139203/
• 关键词: ロイコトリエンB4; BLT1; BLT2; 気管支喘息; G-タンパク質共役型受容体; クローニング; フォスホリパーゼ; 顆粒放出; ARDS

アラキドン酸カスケードの初発酵素である細胞質型PLA2(cPLA2)、ロイコトリエンB4(LTB4)とその受容体(BLT1,BLT2)の免疫担当細胞における役割を解明する目的で以下の実験を行った。1)免疫担当細胞における受容体の発現ヒト末梢血を抗BLT1で染色し、フローサイトメータで定量した。BLT1は、好中球、単球、好酸球に高い発現を認めたが、リンパ球では発現が観察されなかった。マウスではBLT1抗体が存在しないため、RT-PCR法にて発現を確認したところ、上記の細胞に加え、樹状細胞に発現が観察された。骨髄由来の樹状細胞(BMDC)はLTB4に対して、ベル型の走化曲線を有する走化性を示した。2)BLT1欠損マウスの解析BLT1欠損マウスの好中球はLTB4に対するカルシウム上昇反応、脱顆粒反応が消失していた。一方、LTB4に対する結合は、好中球・脾臓共に、野生型の約30%に低下していた。BLT1欠損マウスは、デキストラン硫酸経口投与で惹起される腸炎モデルでは野生型と比べて致死率に差がなかった。一方、オブアルブミン感作による気道過敏性モデル(気管支喘息モデル)では、優位な気道過敏性の減弱を認めた。この際、肺胞への好酸球の浸潤がほぽ完全に消失していることがわかり、本モデルではLTB4が好酸球の走化性因子として機能していることが明かとなった。3)BLT2欠損マウスの作成BLT2ターゲッティングベクターの作成、組換えES細胞の樹立とマウス受精卵へのインジェクション、キメラマウスの作出を完了した。現在、F1マウスを獲るための予備的実験を行っている。4)cPLA2欠損マウスの肺線維症モデルにおける表現型の解析ブレオマイシン気管内投与によるマウス肺線維症モデルにおいて、cPLA2欠損マウスは野生型マウスに比べて極めて減弱した反応を示した。気道抵抗値、浸潤細胞数、肺のコラーゲン沈着のいずれにおいてもcPLA2が重要な役割を果たしていることが明かとなり、cPLA2阻害薬が肺線維症の治療薬・予防薬として機能しうることを示した。

The aim of this study is to clarify the role of cytosolic PLA2 (cPLA2), cytosolic B4(LTB4) and immunocompetent cells in the development of novel enzymes for the production of cytosolic enzymes. 1)Immunoreceptor development in peripheral blood was quantified by anti-BLT 1 staining. BLT1 is a good ball, a single ball, and a good acid ball. The presence of BLT1 antibody was confirmed by RT-PCR, and the presence of dendritic cells was detected. Bone derived dendritic cells (BMDCs) exhibit the characteristics of LTB4 in response to the presence of a three-dimensional routing curve. 2) Analysis of BLT1 Deficiency and Loss and Loss of BLT1 Deficiency and Loss of BLT1 Deficiency and Loss of BLT 1 Deficiency The combination of one side and LTB4 is about 30% lower than that of the wild type. BLT1 is deficient in sulfur acid and has a lower lethality than wild-type. One side, the right side of the road allergy, the right side of the road allergy. At this time, the infiltration of the lung cells and the acid sphere completely disappeared, and the original LTB4 and the acid sphere migration factor disappeared. 3) The creation of BLT2 defective Now, F1, it's ready to go. 4) Analysis of cPLA2 deficiency and its lung maintenance phenotype; cPLA2 deficiency and its wild-type phenotype. Pathway resistance, number of infiltrating cells, lung tissue deposition, cPLA 2, important function, protective function, and therapeutic effect of pulmonary vascular disease.

项目成果

Yokomizo,T. 他: "Hydroxyeicosanoids bind to and activate the low-affinity leukotriene B4 receptor, BLT2."J.Biol.Chem.. (印刷中).

Yokomizo, T. 等人：“羟基类二十烷酸结合并激活低亲和力白三烯 B4 受体 BLT2。”（正在出版）。

Brink, C., S.E., (他4名), T.Shimizu., T.Yokomizo: "International Union of Pharmacology-Classification of Leukotriene and Lipoxin Receptors : Distribution, Function and Molecular Aspects."Pharmacol.Rev.. 55. 195-227 (2003)

Brink, C.、S.E.（其他 4 人）、T.Shimizu.、T.Yokomizo：“国际药理学联盟 - 白三烯和脂氧素受体的分类：分布、功能和分子方面。”Pharmacol.Rev.. 55. 195 -227 (2003)

Yokomizo, T.他: "Hydroxyeicosanoids bind to and activate the low-affinity leukotriene B4 receptor, BLT2"J. Biol. Chem.. 276. 12454-12459 (2001)

Yokomizo, T. 等人：“羟基类二十烷酸结合并激活低亲和力白三烯 B4 受体 BLT2”J. Biol. 276. 12454-12459 (2001)

Kato,K.,Yokomizo,T. 他: "Cell-specific transcriptional regulation of human leukotriene B4 receptor gene."J.Exp.Med.. 192. 413-420 (2000)

Kato, K., Yokomizo, T. 等人：“人白三烯 B4 受体基因的细胞特异性转录调控。J.Exp.Med.. 192. 413-420 (2000)

Nagase, T., Uozumi, N., et al.: "A pivotal role of cytosolic phospholipase A2 in bleomycin-induced pulmonary fibrosis"Nature Medicine. 8. 480-484 (2002)

Nagase, T.、Uozumi, N. 等人：“胞质磷脂酶 A2 在博莱霉素诱导的肺纤维化中的关键作用”《自然医学》。