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染色体分配を司る微小管ダイナミクスとそれを制御するOrbitネットワークの解明

阐明控制染色体分离的微管动力学和控制它的轨道网络

基本信息

批准号：
18058011
负责人：
井上喜博
金额：
$ 3.07万
依托单位：
Kyoto Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

真核生物に保存されているOrbit/CLASPタンパクは、紡錘体微小管の先端にチューブリン分子を付加する。ショウジョウバエのOrbitは細胞分裂の進行に伴い、核膜周辺の小胞体、中心体、キネトコア、スピンドル微小管、収縮環へと局在を変化させ、染色体分配、細胞質分裂の進行に中心的な役割を演じる。本研究では、染色体ダイナミクスを制御するOrbitを中心とするネットワークを明らかにするために、これと相互作用するタンパクのプロテオーム解析、および網羅的な遺伝学スクリーニングをおこなった。初期胚の抽出液からGST-Orbitと共沈するタンパクの質量分析をおこなった結果、non-muscle Myosin II heavy chain(MyosinII)、CopIαsubunit、βスペクトリン、哺乳類のNuMaに類似なToucan、 Dynein heavy chain(Dhc64C)、CLIP190などが同定された。このうちMyosinIIは、Orbitとともに細胞分裂後期に分裂溝予定域に集積すること、この集積はOrbitに依存することを見出した。Orbitは収縮環を構成するアクトミオシンの形成に必須な役割を演ずる。CopIの構成成分δ、γは、胚期の細胞質分裂に必須なことを明らかにした。CopIは微小管に依存して細胞膜成分を分裂溝に運搬している可能性が考えられた。また、ダイナアクチンのdominant negative変異G1が複眼原基の細胞内でorbitと強い遺伝学的な相互作用を示すことをみいだした。この結果は、細胞分裂においてDynein heavy chainとOrbitとが密接に相互作用することを示唆している。Orbitは、分裂後期Aにおいてキネトコアに局在するが、そこでDhcと相互作用して染色分体が極方向に移動するのに重要な役割を演ずる可能性が示唆された。

Eukaryotic preservation of the Orbit/CLASP complex, spindle microtubule tip and molecular transfer Orbit is associated with the process of cell division, microsome, centrosome, microtubule, contraction ring, and transformation of the nucleus, chromosome allocation, and central division during cytoplasmic division. In this study, we analyzed the interaction between chromosomes and the control system of the Orbit, and analyzed the interaction between chromosomes and the control system of the Orbit. The results of mass analysis of early embryo extract from GST-Orbit co-precipitation, non-muscle Myosin II heavy chain(Myosin II), CopIαsubunit, β-protein, mammalian NuMa similar to Toucan, Dynein heavy chain(Dhc64C), CLIP190 were determined. Myosin II, Orbit II, Orbit II, Orbit Orbit is the only way to form a ring. The components of CopI δ, γ, and embryo stage must be separated from each other. CopI is dependent on microtubules and cell membrane components. The dominant negative variant of G1 is the expression of the intracellular orbital and genetic interactions of the compound eye primordium. This results in cell division, Dynein heavy chain, Orbit, and close contact interactions. Orbit is the most important part of the process.