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上皮細胞における膜インターフェイスとしての細胞間接着関連分子群

与作为上皮细胞膜界面的细胞间粘附相关的分子

基本信息

批准号：
19036009
负责人：
月田早智子
金额：
$ 4.8万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、上皮細胞間の接着を担う上皮細胞間接着装置であるアドヘレンスジャンクション(AJ)及びタイトジャンクション(TJ)を膜インターフェイスとして捉え、その領域を構築する分子群による上皮細胞の2つの特性(細胞密度依存的細胞増殖シグナルと物質透過性バリアー)について特に焦点をしぼり、システムとしての解析を目指した。1、AJにおける細胞接着シグナルから細胞増殖シグナルへの信号変換機構 : 当研究室にて近年同定した細胞増殖活性を有するRas結合性のあるAJ局在タンパク質IQGAP3のノックダウン上皮細胞株を用いたGene Chip解析と結合蛋白質の検索などを行った。IQGAP3に結合する可能性のある、細胞密度依存的に細胞間接着装置に濃縮する膜貫通タンパク質など複数の遺伝子を同定した。同時に、IQGAP3そのものの機能につき、ドメイン解析などを行った結果、機能的に重要なドメインを同定することができた。2、TJにおける信号変換によるバリアー制御機構 : 細胞間接着装置に存在するタンパク質のプロテオミクス解析から同定されたタンパク質として新規のProtein A, B(仮称)に注目し、ノックアウトマウスによる解析を行った。Protein Aは、TJに局在する1回膜貫通タンパク質で、2価イオンの透過性に低下が、Protein Bについては、AJに存在する4回膜貫通タンパク質で、電気生理学的な解析で大腸におけるバリアーが強固になっているという結果が得られた。本研究の目的とした2つのテーマを基盤として、膜インターフェイスのシステム解析をさらに発展させていくための基盤を築くことができた。

In this study, the epithelial cells and epithelial cells were then connected to the intercellular devices of AJ and TJ, and the membranes were isolated from each other. In the field, the molecular cluster and the characteristics of epithelial cells (cell density-dependent cell proliferation, cell permeability and permeability). The focus is different, and the target is analyzed. The main results are as follows: 1. AJ cells are used to detect the signaling mechanism of cell colonization: when the cell colonization activity of the laboratory was determined in recent years, there was a strong Ras binding activity. The AJ Bureau used Gene Chip analysis to analyze the epithelial cell lines of the same cells in recent years. IQGAP3 is combined with the possibility that the cell density is dependent on the cell density, and then the device is connected to the cell membrane. The complex number of cells is the same as that of the cell. At the same time, the IQGAP3 test machine is used to analyze the results of the test results, and the important data of the machine is determined to be the same as that of the machine. 2. The TJ signal is used to control the equipment. There is a device between the cells for the analysis of new regulations, such as Protein A, B, etc., which is the same as that of the device. Protein A, TJB, Protein B, AJ, and so on. The results of electrophysiology analysis showed that the results of laboratory tests were satisfactory. The purpose of this study is to analyze the characteristics of the membrane, the membrane and the membrane.