細胞間接着による細胞増殖・分化の制御:ES細胞を用いた実験的アプローチ

通过细胞间粘附控制细胞增殖和分化：使用 ES 细胞的实验方法

• 批准号: 07254206
• 负责人: 月田 早智子
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07254206/
• 关键词: 細胞接着; 細胞増殖; ES細胞; モエシン; α-カテニン; ZO-1; ノックアウト; ラディキシン

細胞接着による細胞増殖・分化の制御機構を実験的に解析していくには、どのような試みが可能であろうか?我々は、ES(embryonic stem)細胞を用いてAJの裏打ち蛋白質の遺伝子をダブルノックアウトして、得られた細胞の細胞増殖と分化能を調べてみたいと考え、昨年および一昨年、本重点研究に公募し、研究助成を受けた。このような試みはきわめて萌芽的な研究であるが、全く行き詰まっているこの分野の研究に突破口を開く可能性もおおきいと思ったからである。一昨年、癌抑制遺伝子として働き得ると考えられるモエシン、ラディキシン、αカテニン、ZO-1のタ-ゲンティングベクターの作製がすべて完了し、昨年、すべてのシングルノックアウト細胞が得られた。最終年度である本年は、ダブルノックアウト細胞を作製し、その増殖能・分化能を詳細に検討する事を目的としたアプローチを行った。マウスのES細胞を用いた相同組換えによる遺伝子ノックアウト法は、近年、飛躍的な進歩を見せた。我々は、以下のように、まず、この方法を用いて細胞レベルで各遺伝子をダブるノックアウトし、出来たnull-細胞の性質の解析も行なった後に、その結果を踏まえて、個体レベルでの解析も行った。昨年度中に、すでに、すべてのシングルノックアウト細胞が出来上がっていた。これまでに、モエシン、ラディキシン、αカテニン、220kD蛋白質(ZO-1)のcDNAを用いてgenomic libralyをスクリーニングし、それぞれの遺伝子の頭の部分を釣り上げた。そして、これらを用いて、それぞれの遺伝子を2つ(相同染色体にのっているもの)とも破壊することを目的として研究を進め、ある程度の細胞生物学的アプローチに成功した。

The analysis of the control mechanism of cell proliferation and differentiation of cells and the control mechanism of cell proliferation and differentiation is possible. Stem) cells were extracted using the いてAJのri and the proteins were extracted. The られたcells were obtained. Cell proliferation and differentiation can be tested and tested, and last year's test will be carried out. This research will be funded by the public, and the research will be funded by the public.このようなtrialみはきわめて budding な research であるが、全く行き诘まっているこの野の Research に breakthrough を く possibility もおおきいと思ったからである. One year ago, the cancer suppressor left behind is a cancer-suppressing cancer test. -The production of ゲンティングベクターの成がすべてfinishedし、Yesterday,すべてのシングルノックアウトcellが gotられた. The final year of this year's であるは, ダブルノックアウトcell をproduced し, その嗗The details of reproduction and differentiation can be explained in detail. The same group of Masukura ES cells has been replaced by the same group as Mizuno, and in recent years, there has been a great leap forward. I'm going to use the following method to use the いて cell レベルでeach left 伝子をダブるノックアウトし,たnull-The nature of the cell is analyzed and analyzed, and the result of the cell is analyzed and analyzed. Last year, the year of the year came out, and the すべてのシングルノックアウトcell was released.これまでに、モエシン、ラディキシン、αカテニン、220kD protein (ZO-1)のcDNAをいてgenomic libralyをスクリーニングし、それぞれの伝子の头のpartを鱼出り上げた. It's the same chromosome The purpose of the research is to improve the level of cell biology and to achieve the goal of success.

项目成果

Sagara, J. et al.: "Cellular actin-binding ezrin-radixin-moesin (ERM) family proteins are incorporated into the rabies virion and closely associated with viral envelope proteins in the cell" Virology. 206. 485-494 (1995)

Sagara, J. 等人：“细胞肌动蛋白结合 ezrin-radixin-moesin (ERM) 家族蛋白被整合到狂犬病病毒粒子中，并与细胞中的病毒包膜蛋白密切相关”病毒学。

Takeda, H. et. al.: "V-src kinase shifts the cadherin-based cell adhesion from the strong to the weak state and beta-catenin is not required for the shift." Journal of Cell Biology. 131. 1839-1847 (1995)

武田，H.等。

Hirao, M. et. al.: "Phosphoinositide-dependent association of ERM proteins with the cytoplasmic domain of CD44 in vitro" Journal of Cell Biology. (in press). (1996)

平尾，M.等。

Takaishi, K. et. al.: "Translocation of activated Rho from the cytoplasm to membrane ruffling area, cell-cell adhesion sites, and cleavage furrows" Oncogene. 11. 39-48 (1995)

高石，K.等。

Tsukita, Sa et. al.: "The small GDP-binding protein rho regulates the formation of the CD44-ERM complex associated with rho-GDI" Journal of Cell Biology. (in press). (1996)

Tsukita，Sa 等。