膜タンパク質構造形成におけるダイナミクスの解明

膜蛋白结构形成动力学的阐明

• 批准号: 19042019
• 负责人: 木田 祐一郎
• 金额: $ 4.1万
• 依托单位: University of Hyogo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19042019/
• 关键词: 膜タンパク質; フォールディング; 小胞体; トランスロコン; シグナル配列; タンパク質膜透過; 膜組み込み; 膜トポロジー; 生体膜; オルガネラ

●アミノ末端側をオルガネラ内腔に配置する膜貫通配列(I型シグナルアンカー(SA-I)配列)の小胞体膜組み込みにおいて、アミノ末端側ドメインは合成完了後に膜透過する。我々は以前に、このドメインにストレプトアビジン(SAv)との親和性の高い配列(SBPタグ)を融合することで、細胞質側に添加したSAvによって膜透過を一時停止できることを報告した。この膜透過はSAvの濃度依存的に阻害されるが、膜透過のSAv感受性から透過駆動力を見積もる実験系を立ち上げ、膜透過におけるSA-I配列の作用を調べた。その結果、SA-I配列へのプロリン残基挿入、及びSA-I配列とSBPタグとの距離を広げることで、透過駆動作用が著しく減少した。これらの結果は、SA-I配列がその上流の一定範囲の膜透過に直接関与する可能性を示している。(Kida, et.al. JBC 2009)●リボソームのポリペプチド鎖伸長に伴った膜透過の途中に疎水性配列が現れると、トランスロコンにおいて膜透過が停止するとともに膜に組み込まれる。膜透過停止には疎水性配列とともに、疎水性配列直後の塩基性アミノ酸残基も停止促進に働くことが分かっている。この塩基性残基が作用できる範囲を調べたところ、疎水性配列の60残基後方に配置させた場合も膜透過停止に機能できることが明らかとなった。またその際、疎水性配列は一旦小胞体内腔に露出することも観察され、最終的な膜内配置に落ち着くまでには予想以上の揺らぎが伴う可能性が示された。(Fujita, ら、投稿準備中)

The end-to-end configuration of the lumen is related to the membrane configuration (type I

项目成果

膜貫通配列の小胞体膜組み込みダイナミクス

跨膜序列的内质网膜整合动力学

• 发表时间: 2008
• 作者: 木田祐一郎;久米千智;平野真希;阪口雅郎
• 通讯作者: 阪口雅郎

Two translocating hydrophilic segments of a nascent chain span the ER membrane during multispanning protein topogenesis

• DOI: 10.1083/jcb.200707050
• 发表时间: 2007-12-31
• 期刊: JOURNAL OF CELL BIOLOGY
• 影响因子: 7.8
• 作者: Kida, Yuichiro;Morimoto, Fumiko;Sakaguchi, Masao
• 通讯作者: Sakaguchi, Masao

Signal-anchor sequence provides motive force for polypeptide-chain translocation through the ER membrane

信号锚序列为多肽链通过内质网膜易位提供动力

• 发表时间: 2009
• 期刊: J.Biol.Chem. 284
• 作者: Kida Y.;Morimoto;F.;Sakaguchi M.
• 通讯作者: Sakaguchi M.

小胞体トランスロコンのポリペプチド鎖収容能力

内质网易位子的多肽链容量

• 发表时间: 2005
• 作者: 木田 祐一郎;森本 富美子;阪口 雅郎
• 通讯作者: 阪口 雅郎

Translocon accommodates two translocating hydrophilic chains and two signal sequences

Translocon 容纳两个易位亲水链和两个信号序列

• 发表时间: 2007
• 作者: 押野健;三浦慎也;菊地俊介;濱田和輝;矢野健太郎;東谷篤志;木田 祐一郎
• 通讯作者: 木田 祐一郎