デルタ2グルタミン酸受容体のNTDを介する新しい活性化様式の解明

阐明 NTD 介导的 delta2 谷氨酸受体新激活模式

• 批准号: 20021004
• 负责人: 平井 宏和
• 金额: $ 4.86万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20021004/
• 关键词: プルキンエ細胞; グルタミン酸受容体; トランスジェニックマウス; デルタ2; 小脳

自然発症運動失調マウスHotfoot5Jは、デルタ2グルタミン酸受容体(delta2受容体)遺伝子の変異により、delta2受容体が欠損する。そのためノックアウトマウスと同じフェノタイプ、すなわち、小脳LTD誘導の障害、平行線維-プルキンエ細胞シナプスの放出確立の減少、登上線維によるプルキンエ細胞の多重支配の残存と強い小脳失調が観察される。レンチウイルスベクターを用いてHotfoot5Jマウスの小脳プルキンエ細胞に野生型delta2受容体遺伝子を導入することで、運動失調をはじめとする異常がレスキューできるのかを検討した。生後6日のHotfoot5Jマウス小脳にdelta2受容体発現レンチウイルスベクターを接種し、4週後にロータロッドにて運動能力を評価したところ、顕著な運動失調の改善が認められた。パッチクランプ解析では、LTD誘導の障害、PPF比の増大、プルキンエ細胞多重支配の残存のすべてが完全に回復していた。このように、レンチウイルスベクターを用いた遺伝子治療により、運動失調マウスHotfoot5Jの異常を大きく改善させることに成功した。次に、delta2受容体のどのドメインがdelta2受容体のどの機能に重要であるのかを決定するために、delta2受容体のさまざまな部分欠損体や他のイオン透過型グルタミン酸受容体とのキメラ体を作製した。これらのコンストラクトをレンチウイルスベクターを用いて、delta2受容体欠損Hotfoot5Jマウスのプルキンエ細胞に発現させた。その結果、N末端ドメインとC末端ドメインを1つの膜貫通ドメインでつないだコンストラクトにより、運動失調をはじめ、ほぼすべての異常がレスキューされた。以上の結果から、delta2受容体はアミノ酸リガンド結合ドメインに加えてチャネルポアがなくとも、十分機能を果たすことが明らかとなった。

Natural Disorder Movement Disorder Hotfoot5J, Delta2 Receptors Difference, Delta 2 Receptors Loss The damage induced by small cell, the decrease in the emission of parallel line-dimensional cells, the survival of multiple dominance of ascending line-dimensional cells, and the strong and small cell dysregulation were observed. Hotfoot5J is a small cell with wild-type delta2 receptor gene introduced into it, and ataxia is an abnormal cell. 6 days after birth, Hotfoot5J/min delta2 receptor development, vaccination, 4 weeks after birth, motor ability evaluation, motor dysfunction improvement and recognition In addition, the damage induced by LTD, the increase of PPF ratio, and the complete recovery of the residual of multiple control of cells were analyzed. This is a great way to improve your health. The function of delta2 receptor is important to determine the function of delta2 receptor and the function of delta2 receptor is important to determine the function of delta2 receptor. This is the first time that a cell has been found in a cell with a loss of Hotfoot5J. As a result, the N-terminal and C-terminal terminals are connected to the membrane, and the movement disorder is reversed. The above results show that the delta2 receptor has the function of increasing the acid concentration and decreasing the temperature.

项目成果

レンチウイルスベクターを用いたプルキンエ細胞選択的なGFP発現

使用慢病毒载体进行浦肯野细胞选择性 GFP 表达

• 发表时间: 2008
• 作者: 高山清彦;寅嶋崇;堀内始・平井宏和
• 通讯作者: 堀内始・平井宏和

高力価レンチウイルスベクターの感染が小脳プルキンエ細胞の発達におよぼす影響の検討

高滴度慢病毒载体感染对小脑浦肯野细胞发育影响的研究

• 发表时间: 2009
• 作者: 澤田悠輔;梶原剛;寅嶋崇;高山清彦;堀内始;飯塚朗;三ツ村一浩;平井宏和
• 通讯作者: 平井宏和

レンチウイルスベクターを用いた遺伝性運動失調マウスの機能回復

使用慢病毒载体实现遗传性共济失调小鼠的功能恢复

• 发表时间: 2009
• 作者: 飯塚朗;寅嶋崇;三ツ村一浩;小山知穂;飯野昌枝;平井宏和
• 通讯作者: 平井宏和

Purkinje-cell-selective transduction by the MSCV promoter incorporated in lentiviral vectors

通过慢病毒载体中的 MSCV 启动子进行浦肯野细胞选择性转导

• 发表时间: 2008
• 作者: Takayama K;Torashima T;Horiuchi H;Hirai H.
• 通讯作者: Hirai H.

Purkinje-cell-preferential transduction by lentiviral vectors with the murine stem cell virus promoter

• DOI: 10.1016/j.neulet.2008.07.058
• 发表时间: 2008-09
• 期刊: Neuroscience Letters
• 影响因子: 2.5
• 作者: Kiyohiko Takayama;T. Torashima;Hajime Horiuchi;H. Hirai