酵母転写制御因子の研究

酵母转录调控因子的研究

• 批准号: 62620504
• 负责人: 中村 義一
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-62620504/
• 关键词: 酵母; 転写制御; シグマ因子; DNAホモロジー; 相同遺伝子; 遺伝子破壊

解析のモデル系としてここでは分子遺伝子学を展開できる酵母(S.cerevisiae)を取り上げ, 転写制御因子の検索を行った. 大腸菌の転写制御因子の遺伝子をプローブとして, 酵母染色体からそれらのホモグロの検索を行った結果, σ^<70>遺伝子(rpoD)と強くハイブリダイズするHindIII断片を6種類(A-F)検出した. D(1.8kb), F(0.8kb)のフラグメントをクローニングし塩基配列分析を行った結果, rpoD上の特定領域がD及F間とで塩基配列・アミノ酸配列上高い相同性を持つことが分かった. この部分はσ^<70>タンパク質上で酸性アミノ酸のクラスターを形成する. RNA分析から, 3000(F)と1700(D)塩基鎖長のRNAが検出された. Fに関しては更に単鎖DNAのサザーン分析により, 酸性アミノ酸をコードする側がsense鎖としてRNAに転写されていることが分かった. しかし遺伝子破壊実験の結果はこれらのDF領域は酵母の生育のものには必須な領域ではないことを示した. これら結果からDとE上のσ^<70>との相同領域はRNAに転写されるが, 酵母の生育そのものには必須な遺伝子をコードしていないと考えられる. ここで行った検索方法は的中すれば大きな飛躍が期待される反面, リスクも大きい, しかし最近明らかになってきているように, 大腸菌と真核細胞RNAポリメラーゼ間で保存されているDNA及びアミノ酸配列上の驚くほどの高い相同性はこの方法の可能性を依然として示唆する. 今回得られた結果は必ずしも今目的とするσ因子がDE上にコードされてはいないことを結論するものではない, しかしリスクを回避して研究を進展するための意味から, 現在我々は更に酵母のランダムな温度感受性変異株のコレクションを作製し, その中から熱ショック応答に欠損を示す変異株のスクリーニングを開始した. これは酵母の熱ショックσ因子変異株の分離を目的とする.

The molecular genetics of yeast (S.cerevisiae) was developed by analyzing the molecular genetics of yeast, and the control factors were developed by molecular genetics. E. coli gene expression control factors were detected in six <70>species (A-F) of yeast chromosomes. D(1.8kb), F(0.8kb), and F (1.8kb) were analyzed for their base alignment. The results showed that there was a high similarity between D and F in the specific domain of rpoD. This <70>part of the material is acidic and acidic. RNA analysis: 3000(F): 1700(D): RNA was detected by DNA sequencing. F is related to DNA analysis, acid analysis and RNA analysis. The results of the study are as follows: DF field, yeast field. The result is that the same domain on D and E <70>is not RNA, but yeast is required to reproduce. This method is expected to make a big leap forward in the future. However, it is still possible to preserve DNA and acid sequences in Escherichia coli and eukaryotic RNA. The result of this study is that the sigma factor is higher than that of the previous study, and it means that the yeast is more sensitive to temperature. For the purpose of isolation of yeast mutants,