UGAコドン解読の可変性におけるRNAcontextとRF2因子の役割

RNA背景和RF2因素在UGA密码子解码变异中的作用

• 批准号: 01656502
• 负责人: 中村 義一
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01656502/
• 关键词: UGAコドン; tRNA; 翻訳終結; ペプチド鎖解離因子; リジルtRNA合成酵素; フレ-ムシフト; サプレッション; コリシンE1

ペプチド鎖解難因子RF2をコ-ドする遺伝子であるprfBは大腸菌染色体上62分に存在し、herCと命名した遺伝子とオペロンを形成する。RF2蛋白質の構造と機能を明らかにし、同時にRF2の認識する翻訳終結コドンであるUGAコドンが示す可変性の分子機構を理解するために、RF2変異株の分子遺伝学的解析を行ない、以下の知見を得た。(1)変異株prfB2,prfB3は各々RF2構造遺伝子内の1アミノ酸置換変異である。(2)分離した4種類のprfB変異はいずれも5-10%程度のUGAサプレッサ-活性を示す。(3)prfB遺伝子内での+1フレ-ムシフトの効率の上昇が観察される。(4)trpリ-ダ-ペプチドのUGAコドンでのリボゾ-ムのポ-ジングのためと考えられるアテニュエ-ション効率の上昇が観察される。(5)サルモネラ菌からRF2遺伝子をクロ-ニングしシ-クエンスすることによって、supK変異がRF2遺伝子内変異であることを証明した。herC遺伝子はコリシンE1プライマ-RNA変異のサプレッサ-変異株として分離されたものであるが、HerC蛋白質は複製系の酵素ではなくて、リジルRNA合成酵素であることを生化学的に証明した。このサプレッションの分子機構は今後の研究に待たれるが、tRNAがコドンの可変性のみならず、幅広く細胞複製の調節に関与していることを示唆するものであろう。

ペ プ チ ド lock out factor RF2 を コ - ド す る posthumous son 伝 で あ る prfB は coliform 62 points on chromosome に し, herC と named し た posthumous son 伝 と オ ペ ロ ン を form す る. RF2 protein の function of tectonic と を Ming ら か に し, at the same time に RF2 の know す る turn 訳 end コ ド ン で あ る VGA コ ド ン が shown す variations can be の molecular institutions を understand す る た め に, RF2 - different strains の molecular line but 伝 learn analytical を な い, see the following の know を た. (1) Mutated prfB2 and prfB3 each 々RF2 structuring 伝 has a <s:1> 1ア ノ ノ acid displacement mutated である. (2) Isolation of <s:1> た4 types of <s:1> prfB variation ずれ ずれ ずれ <s:1> 5-10% degree <s:1> UGAサプレッサ -activity を shows す. (3) The efficacy <e:1> of the 伝 subunit of prfB increases by が観 to される when で <e:1> +1 is added. (4) the TRP リ ダ - ペ プ チ ド の VGA コ ド ン で の リ ボ ゾ - ム の ポ - ジ ン グ の た め と exam え ら れ る ア テ ニ ュ エ - シ ョ ン sharper rate rising の が 観 examine さ れ る. (5) サ ル モ ネ ラ bacteria か ら RF2 posthumous son 伝 を ク ロ - ニ ン グ し シ - ク エ ン ス す る こ と に よ っ て, supK - different が RF2 heritage 伝 sub - within different で あ る こ と を prove し た. HerC posthumous son 伝 は コ リ シ ン E1 プ ラ イ マ - RNA - different の サ プ レ ッ サ - - different strains と し て separation さ れ た も の で あ る が, herC protein は replication is の enzyme で は な く て, リ ジ ル RNA synthesis enzyme で あ る こ と を biochemistry に prove し た. こ の サ プ レ ッ シ ョ ン の molecular institutions は の future research に stay た れ る が, tRNA が コ ド ン の variations can be の み な ら ず, picture hiroo く cell replication の regulation に masato and し て い る こ と を in stopping す る も の で あ ろ う.

项目成果

Bardwell,J.C.A.: "RNase III operon expression is autoregulated by mRNA processing" EMBO J.8. 3401-3407 (1989)

Bardwell，J.C.A.：“RNase III 操纵子表达由 mRNA 加工自动调节”EMBO J.8。

Kawakami,K.: "Isolation and characterization of herC,a mutation of Escherichia coli affecting maintenance of Co1E1" Mol.Gen.Genet.219. 333-340 (1989)

Kawakami,K.：“herC 的分离和表征，herC 是影响 Co1E1 维持的大肠杆菌突变”Mol.Gen.Genet.219。

Nakamura,Y.: "Murine monoclonal antibodies which recognize active sites of Escherichia coli nusA protein and epitope mapping by gene fusion" Gene. 1980. 13-19 (1989)

Nakamura,Y.：“通过基因融合识别大肠杆菌 nusA 蛋白活性位点和表位作图的鼠单克隆抗体”Gene。

Inada,T.: "Temperature-sensitive lethal mutant of Era,a G protein in Escherichia coli" J.Bacteriol.171. 5017-5024 (1989)

Inada,T.：“Era 的温度敏感致死突变体，大肠杆菌中的一种 G 蛋白”J.Bacteriol.171。

Inada,T.: "Conditionally lethal amber mutations in the leader peptidase gene of Escherichia coli" J.Bacteriol.171. 585-587 (1989)

Inada,T.：“大肠杆菌前导肽酶基因中的条件致死琥珀突变”J.Bacteriol.171。