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コンビナトリアル生合成法によるフラボノイドの発酵生産

コンビナトリアル生合成法によるフラボノイドの発酵生産
组合生物合成法发酵生产黄酮类化合物
批准号：
10876017
负责人：
堀之内 末治
金额：
$1.66万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1998
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1998 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10876017/
关键词：
StreptomycesCHSマロニルCoA1,3,6,8-tetrahydroxynaphthalene

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Streptomyces griseusのCHSホモログ遺伝子をpET16bにクローニング、E.coliBL21(DE3)に導入し、N末端にHis-Tagをもつ蛋白を生産させたところ、可溶性、不溶性の両画分に42.7kDaの蛋白が得られた。ニッケル力ラムを用いた精製により可溶性画分から電気泳動上単一な酵素標品を取得できた。この酵素を用いマロニルCoAを基質とし反応を行ったところ、反応は速やかに進行した。[^<14>C]アセチルCoAと非ラベル体のマロニルCoAを基質とした場合、放射能をもつ生成物は検出されなかった。これらの結果は、本酵素がアセチルCoAではなくマロニルCoAをスターターとするC2ユニットの伸長反応を触媒していることを示唆している。なお植物のCHSにおいて一般的なスターターである4-クマロイルCoAは本酵素の基質とならないことも明らかになった。次に反応生成物を液体クロマトグラフィーマススペクトロメトリーを用いて解析したところ、生成物は1,3,6,8-tetrahydroxynaphthalene(THN)とTHNが非酵素的に酸化されたflaviolinであることが判明した。よってCHSホモログ遺伝子産物は新規なポリケタイド合成酵素であると決定づけることができた。一方、CHSホモログ遺伝子の上流、下流併せて14kbのDNA断片をクローニングし塩基配列を決定した。当初の予想とは異なり、CHSホモログ遺伝子の周辺にはフラボノイド生合成遺伝子は存在しないことが明らかになった。
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会议论文
放線菌の二次代謝、形態分化を司る制御機構の統括的解明
  • 批准号：
    19208009
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
  • 资助金额：
    $31.45万
  • 财政年份：
    2007
  • 负责人：
    堀之内 末治
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
微生物カルモジュリン:放線菌における増殖、形態分化の制御
  • 批准号：
    16658035
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $2.3万
  • 财政年份：
    2004
  • 负责人：
    堀之内 末治
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
放線菌ストレプトミセス・グリセウスのA‐ファクター制御カスケードの網羅的解明
  • 批准号：
    16013210
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $5.12万
  • 财政年份：
    2004
  • 负责人：
    堀之内 末治
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
放線菌ストレプトミセス・グリセウスのA-ファクター制御カスケードの網羅的解明
  • 批准号：
    15013210
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $4.48万
  • 财政年份：
    2003
  • 负责人：
    堀之内 末治
  • 依托单位：
    The University of Tokyo
国内基金
海外基金
基于CHS-DRGs和诊疗全流程大数据挖掘的子宫肌瘤手术“主路径+支路径”的复合临床路径模式研究
  • 批准号：
  • 项目类别：
    省市级项目
  • 资助金额：
    --
  • 批准年份：
    2025
  • 负责人：
    朱文俊
  • 依托单位：
CHS-DRG模式下ICU老年患者CRE医院感染防控对策研究
3,5-双(2-羟基-4-氟-苯基)-1,2,4-噁二唑-铈配合物@CD-MFO-CHS 脑靶向载药纳米粒的制备及抗 AIS脑保护作用研究
  • 批准号：
  • 项目类别：
    省市级项目
  • 资助金额：
    15.0万元
  • 批准年份：
    2024
  • 负责人：
    张静夏
  • 依托单位：
    中山大学
威尼斯镰刀菌中几丁质合成关键基因Chs调控菌丝体结构与蛋白消 化特性的机制研究
  • 批准号：
  • 项目类别：
    省市级项目
  • 资助金额：
    --
  • 批准年份：
    2024
  • 负责人：
    周治彤
  • 依托单位：