視床原基増殖期・神経核形成期を司る分子メカニズム

丘脑原基增殖期和神经元成核期的分子机制

• 批准号: 15016061
• 负责人: 石橋 誠
• 金额: $ 4.1万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15016061/
• 关键词: 視床原基; 増殖; 神経核形成; Sonic hedgehog; Fgf15; Gli

本研究においては脊椎動物視床発生の分子機構を特に増殖シグナル、位置情報を与える分子に着目して明らかにすることを目的としている。Sonic hedgehog (Shh) ノックアウトマウスの解析によって、視床原基増殖期にはShh→Fgf15→Tcf4カスケードによって神経前駆細胞の増殖が促進されていることが示唆された(Ishibashi and McMahon,2002)。この遺伝子発現制御の分子機構を明らかにするため、Fgf15遺伝子の調節領域と思われるゲノム断片を単離した。単離したゲノム断片11kbをlacZ遺伝子に融合させたトランスジーンを導入したマウスを作成し、lacZの発現パターンを解析したところ、内因性Fgf15の発現パターンとほぼ一致していた。また、同じ断片をルシフェラーゼ遺伝子と融合させたベクターを作成し、これを導入した培養細胞にShhシグナルを作用させると、ルシフェラーゼ活性が上昇した。同断片にはShhシグナルの標的遺伝子の活性化を担う転写因子Gliが結合する塩基配列が含まれていた。このGli結合配列に変異を導入したところ、トランスジェニックマウスにおけるlacZの発現やルシフェラーゼアッセイにおける活性上昇が大幅に減少した。従ってFgf15はShhシグナルの直接の標的遺伝子であると結論づけた。これらの結果は現在投稿中である。また、視床原基神経核形成の分子機構を探るため神経前駆細胞に発現するマーカー遺伝子の単離を試みた。その結果、複数の遺伝子が単離された。現在これらの遺伝子の視床原基における正常およびShhシグナルをかく乱した場合の発現パターンを確認中である。

This study focuses on the molecular mechanism of vertebrate retinal growth and its specific reproductive function, The location information and the target of the elements are the same as the target. Sonic hedgehog (Shh)ノックアウトマウスのanalyticsによって, optic bed primordium proliferation stage Shh→Fgf15→Tcf4カスIshibashi and McMahon, 2002).この缝子発开淺の molecular organization を明らかにするため, Fgf15 legacy 伝子のadjusting field と思われるゲノム fragment を単利した.単利したゲノムfragment 11kbをlacZ伝子にfusionさせたトランスジーンをImportedしたマウスをproducedし, lacZ の発appears パターンをanalytic したところ, endogenous Fgf15 の発appears パターンとほぼconsistent していた.また、同じ片をルシフェラーゼ弝子とfusionさせたベクターをproducedし、これをWhen cultured cells are put into culture, the effect of Shhseoknat and the activity of Shhtakalak will be increased. The same fragment as the base of the fragment is the active activation factor Gli and the combination of the base and the base arrangement.このGli combined with the arrangement of に変differentを imported したところ、トランスジェニックマウスにおけThe activity of るlacZ has increased significantly and decreased significantly.従ってFgf15はShhシグナルのDirect のOBJECT's remaining 伝子であると Conclusion づけた. The result of これらの is currently being submitted.また、The molecular mechanism of the formation of the optic bed primordium nerve nucleus is explored and the optic nerve cells are formed in front of the optic nerve. The result of その, the plural form of の缝子が単里された.これらの缝子の瀷 bedprimordium におけるNormal およびShhシグナルをかく乱したoccasionの発appears パターンをconfirmedである.

项目成果

Saitsu et al.: "Spatial and temporal expression of Folate-binding protein 1 (Fbp1) is closely associated with anterior neural tube closure in mice."Developmental Dynamics. 226. 112-117 (2003)

Saitsu 等人：“叶酸结合蛋白 1 (Fbp1) 的空间和时间表达与小鼠前神经管闭合密切相关。”发育动力学。