EBウイルスの発がんタンパク質EBNA2と宿主タンパク質との相互作用の研究

EB病毒致癌蛋白EBNA2与宿主蛋白相互作用的研究

• 批准号: 15019015
• 负责人: 北川 元生
• 金额: $ 2.94万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15019015/
• 关键词: EBウイルス; EBNA2; Notchシグナル伝達系; Mastermind; RBP-J; バーキットリンパ腫; LCL

われわれはEBNA2、RBP-Jの発現ベクターをhMastemind (Mam)-1、hMam-2、hMam-3いずれかのベクターとともにHEK293T細胞にtransfectionすると、Notch細胞内ドメイン/RBP-J/Mamの複合体に類似したEBNA2/RBP-J/Mamの三量体とかんがえられる複合体が形成され、EBNA2の標的プロモーター配列に結合することを見いだした。この複合体の形成には、MamにおいてN端に位置する塩基性ドメインの存在が必要にして十分であるという、Notch細胞内ドメイン/RBP-J/Mamの複合体の場合と同様の結果が得られた。さらにわれわれはEBNA2陽性のバーキットリンパ腫細胞株とEBウイルスの感染により不死化したBリンパ球株(lymphoblastoid cell line;LCL)の抽出液中にも上記のEBNA2/RBP-J/Mam複合体様の活性を見いだしている。この活性は抗EBNA2抗体によりsupershiftすることからEBNA2を含んでいると考えられるが、さらにこの抗EBNA2抗体で免疫沈降し、すでに作出した3種のhMamに対する特異抗体でwestern blot解析を行った結果、LCLではhMam-1とhMam-2が、またバーキットリンパ腫細胞株ではhMam-2が特異的に共沈することを見いだしている。COS7細胞1とおいて、EBNA2は宿主由来の標的プロモーター(Hesl)を転写活性化するが、hMam-1の発現はこれをさらに増強させること、対照的にhMam-2、hMam-3は活性化の増強をせず、条件によっては抑制するこどを見いだしている。このMamのEBNA2に対する効果は、Notch細胞内ドメインに対するものとはまったく異なっている。現在さらに複合体へのMamの参加の意義について検討している。

The EBNA2/RBP-J/Mam complex is similar to the EBNA2/RBP-J/Mam triad complex, and the EBNA2 target is associated with the HEK293 T cell transfection in the EBNA2/RBP-J/Mam triad. The same results were obtained in the case of the formation of the complex, the position of the N-terminal terminal, and the existence of the N-terminal, Notch intracellular N-terminal/RBP-J/Mam complex. The activity of EBNA2/RBP-J/Mam complex in extracts from EBNA2 positive cell lines infected with EBNA2-positive cells and lymphoblastoid cell lines (LCL) was significantly higher. The activity of anti-EBNA2 antibody was determined by Western blot analysis of three specific antibodies against EBNA2, hMam-1, hMam-2, and hMam-2 specific anti-EBNA2 antibody. COS7 cells 1 and EBNA2 are activated by host derived targets (Hesl), and hMam-1 is activated by hMam-2 and hMam-3, respectively. This is the result of a large EBNA2 response, and the result of a large EBNA 2 response. Now the meaning of the complex's participation is discussed.

项目成果

北川元生: "Notchシグナル伝達系の細胞内調節因子群の研究"千葉医学雑誌. 79. 263-264 (2003)

北川元夫：“Notch信号系统的细胞内调节因子的研究”千叶医学杂志79. 263-264（2003）。

Hiwasa T.et al.: "Drug-sensitivity pattern analysis for study of functional relationship between gene products."FEBS Letters. 552. 177-183 (2003)

Hiwasa T.等人：“用于研究基因产物之间功能关系的药物敏感性模式分析。”FEBS Letters。

Sasamura T.et al.: "neurotic, a novel maternal neurogenic gene, encodes an O-fucosyltransferase that is essential for Notch-Delta interactions."Development. 130. 4785-4795 (2003)

Sasamura T.等人：“neurotic，一种新型母体神经源性基因，编码对Notch-Delta相互作用至关重要的O-岩藻糖基转移酶。”开发。