p27Kip1の発現量低下を伴う予後不良の癌における悪性形質の形成機構

p27Kip1表达降低的预后不良癌症恶性特征形成机制

基本信息

批准号：
15023223
负责人：
北川雅敏
金额：
$ 3.9万
依托单位：
Hamamatsu University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

[研究目的]本研究では、Skp2、Cks1の高発現およびp27^<Kipl>の分解亢進と癌形質の悪性度増強の因果関係を実験的に証明するとともに、癌形質の悪性化に影響を及ぼすタンパク質分解機構とキー遺伝子を同定し、予後不良化のメカニズムを解明することをめざす。[方法と結果]予後不良の癌ではCDK阻害タンパクp27^<Kipl>の分解が亢進している。さらに我々は肺癌でp27^<Kipl>のユビキチシリガーゼskp2とCks1の発現が有意に高いことを見いだした(Inui et al.2003)。加えてCks1の細胞内存在量はユビキチン-プロテアソーム系によって制御されていることを見出した(Hattori et al.2003)。今後、Cks1の分解低下が癌においけるCks1の高発現の原因となっているかを検討する。一方でこれらの分子の高発現およびp27^<Kipl>の分解亢進がおこると、何故予後不良の癌形質が形成されるのかはなお不明であり、本研究ではさらにそれを明らかにすることを目標とした。我々が作成したSkp2高発現ヒト大腸癌細胞(HCT-Skp2)、p27^<Kipl>-ヘテロノックアウトヒト大腸癌(HCT-p27hKO)細胞はどちらもp27^<Kipl>タンパク質の存在量が有意に低下していた。それらの培養細胞としての増殖速度は親株と変化がないが、マトリゲル浸潤能はHCT-Skp2が有意に高かった。ヌードマウスに移殖実験ではHCT-Skp2,HCT-p27hKOの順に親株に比べて高い造腫瘍性を示し、さらに血管新生の更新も見られた。一方で我々はマイクロアレイ解析によりHCT-Skp2あるいはHCT-p27hKOで発現が変動する複数の遺伝子(PPAG:Poor Prognosis Associated Gene)を同定した。そのうちの1つは機能未知の7回幕貫通Gタンパク質共役型受容体で、現在その機能と細胞悪性化への寄与の有無を検討している。

[研究目的]这项研究的目的是实验证明SKP2和CKS1的高表达之间的因果关系，p27^<kipl>的降解增加，癌症特征的恶性肿瘤增加，鉴定蛋白质水解机制和关键基因，并识别影响癌症特征的恶性肿瘤的蛋白水解机制，以阐明癌症特征的恶性，并阐明了贫穷的预言的机制。 [方法和结果] CDK抑制蛋白p27^<kipl>的降解在预后不良的癌症中增加。此外，我们发现p27^<kipl>普遍存在的硅酸盐酶SKP2和CKS1在肺癌中的表达明显更高（Inui等，2003）。此外，我们发现CKS1的细胞内丰度受泛素 - 蛋白酶体系统的调节（Hattori等，2003）。现在，我们将研究CKS1的降解是否是CKS1高表达的原因，CKS1有效。另一方面，目前尚不清楚为什么当这些分子高度表达并高度降低P27^<kipl>时会形成预后不良的癌症特征，而这项研究的目的是进一步阐明这一点。我们创建了SKP2高表达的人类结肠癌细胞（HCT-SKP2）和P27^<kipl> -Heteronokout人类结肠癌（HCT-P27HKO）细胞，p27^<KIPL>蛋白质丰度显着降低。其培养细胞的生长速率与母体菌株的生长速率保持不变，但是HCT-SKP2侵入性能力明显更高。在裸鼠中，在移植实验中，HCT-SKP2和HCT-P27HKO的肿瘤性高于父菌株，并且还显示出血管生成的重新发生。另一方面，我们通过微阵列分析确定了多个基因（PPAG），其表达在HCT-SKP2或HCT-P27HKO中变化。其中之一是具有未知功能的七曲线G蛋白偶联受体，目前正在研究其功能以及它是否有助于细胞恶性肿瘤。