がんの遺伝子治療に向けた超機能性人工オリゴヌクレオチドの創製

创造用于癌症基因治疗的超功能人工寡核苷酸

• 批准号: 15025239
• 负责人: 今西 武
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15025239/
• 关键词: 糖部立体配座; ヌクレオシド類縁体; オリゴヌクレオチド類縁体; 人工核酸; 合成; アンチセンス; アンチジーン; BNA

我々は、天然ヌクレオシドの糖部を架橋構造化することでN型或いはS型と呼ばれる立体配座に固定した新しい人工核酸(Bridged Nucleic Acid:BNA)の開発を進め、これら人工核酸をオリゴヌクレオチド中に導入することで、そのアンチセンス効果が飛躍的に向上することを見いだしてきた。ここでは、細胞のアポトーシス死に関する遺伝子として知られるbcl-xLおよび原ガン遺伝子として知られるc-mycに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドに2',4'-BNAを導入しその評価解析を行った。その結果、bcl-xLを標的とした2'、4'-BNA修飾アンチセンスオリゴヌクレオチド(BNA-oligo)は、培養細胞系においてbcl-xLのmRNAレベルを大幅に低下させ、細胞をアポトーシスへと導いた。その効果は配列特異的であった。これに対し同配列のホスホロチオアートオリゴヌクレオチド(S-oligo)はbcl-xL以外にも多くの遺伝子のmRNAレベルを低下させた。一方、これまで天然オリゴヌクレオチド(D-oligo)による細胞増殖抑制効果が認められていたc-mycに対するアンチセンス配列を用い、S-oligo、D-oligo及びBNA-oligoの効果を評価したところ、S-oligoでは配列非特異的な効果を示した。また、D-oligoは強い細胞増殖抑制を示した。これに対し、意外にもBNA-oligoは増殖抑制を全く示さなかった。この結果を詳細に解析したところ、c-mycを標的とした場合のD-oligoによる細胞増殖抑制効果が、配列中に含まれる、CpGモチーフに由来するものであることが強く示唆された。このことより、BNA-oligoではCpGモチーフによる細胞増殖阻害を回避できることが明らかとなった。

The development of a novel artificial nucleic acid (Bridged Nucleic Acid:BNA), which is immobilized at a stereoligand of the N-type or S-type or S-type, has been carried out in order to bridge the sugar moiety of the natural nucleic acid. This is the first time that a cell's DNA has been detected. The first time that a cell's DNA has been detected, the second time that a cell's DNA has been detected, the third time that a cell's DNA has been detected, the third time that a cell's DNA has been detected, the fourth time that a cell's DNA has been detected, the third time that a cell's DNA has been detected. As a result, bcl-xL mRNA expression was significantly reduced in cultured cell lines, and the expression of bcl-xL mRNA was significantly reduced in cultured cell lines. The result is a unique combination. The mRNA expression of multiple genes other than bcl-xL is lower than that of S-oligo. The effects of natural D-oligo on cell proliferation inhibition were identified, and the effects of S-oligo, D-oligo and BNA-oligo on cell proliferation inhibition were evaluated. D-oligo is a potent inhibitor of cell proliferation. The BNA-oligo gene is the most important gene in the human genome. The results were analyzed in detail. In the case of D-oligo, the inhibition effect of CpG on cell proliferation was analyzed. The BNA-oligo is the first to avoid cell proliferation.

项目成果

今西 武: "化学と生物の接点がつくるNewバイオテクノロジー"共立出版. 240 (2003)

Takeshi Imanishi：“化学和生物学之间的界面创造的新生物技术”Kyoritsu Shuppan 240 (2003)。

Miyashita, K. et al.: "Total synthesis of (±)-spiroxin C"Organic Lett.. 5・15. 2683-2686 (2003)

Miyashita, K.等：“(±)-spiroxin C的全合成”Organic Lett.. 2683-2686 (2003)

Obika, S. et al.: "Synthesis and properties of a novel bridged nucleic acid with a P3'→N5' phosphoramidate linkage, 5'-amino-2',4'-BNA"Chem.Commun.. 17. 2202-2203 (2003)

Obika, S. 等人：“具有 P3→N5 氨基磷酸酯键的新型桥接核酸的合成和特性，5-氨基-2,4-BNA”Chem.Commun. 17. 2202- 2203 (2003)

Hari, Y. et al.: "Selective recognition of CG interruption by 2',4'-BNA having 1-isoquinolone as a nucleobase in a pyrimidine motif triplex formation"Tetrahedron. 59・27. 5123-5128 (2003)

Hari, Y. 等人：“在嘧啶基序三链体形成中通过具有 1-异喹诺酮作为核碱基的 2,4-BNA 选择性识别 CG 中断”Tetrahedron 59·27 (2003)。

Miyashita, K. et al.: "Total synthesis of an antitumor antibiotic, fostriecin (CI-920)"J.Am.Chem.Soc.. 125・27. 8238-8243 (2003)

Miyashita, K. 等：“抗肿瘤抗生素福斯特菌素 (CI-920) 的全合成” J.Am.Chem.Soc.. 125・27 8238-8243 (2003)。