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がんの遺伝子治療に向けた超機能性人工オリゴヌクレオチドの創製

创造用于癌症基因治疗的超功能人工寡核苷酸

基本信息

批准号：
13218072
负责人：
今西武
金额：
$ 2.88万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

天然のODNをアンチセンス分子として用いた場合、標的mRNAとの結合親和性、生体内での安定性などの様々な問題から十分な効果が期待できない。そのため、化学修飾を施したODNの開発が必要である。我々は架橋構造により糖部立体配座を固定した新しい核酸類縁体(BNA)の開発に成功している。今回、BNAを導入したオリゴヌクレオチド(ODN)を種々合成し、それらのアンチセンス分子としての機能評価を行なった。まずBNA修飾をしたODN(BNA-ODN)と、相補鎖RNAとの二重鎖形成能を検討したところ、BNA-ODNは、天然ODNやS-オリゴに比べてはるかに高い重鎖形成能を示した。また、BNA-ODN類がヌクレアーゼに対する耐性に優れていること及びBNA修飾の程度を調節する事でRNasc Hによる認識を受け、効果的にmRNAの切断が可能である事を確認した。一方、ICAM-1遺伝子を標的としたBNA-ODN類がHUVEC細胞において顕著なアンチセンス効果を示すことも見い出した。さらに、ODNの細胞内移行を向上させるために設計した細胞内移行シグナルペプチド-BNA-ODNコンジュゲート体の合成にも成功した。アンチセンス法をがん治療等へ展開していくには、標的RNAに対する高い結合親和性・配列特異性を有し、且つ生体内での安定性にも優れたODN類の創製が必須である。また、ODN/RNAヘテロ複合体がRNasc Hにより認識を受け、RNA鎖が切断されることも重要な要件としてあげられる。我々の開発したBNA-ODNは、そのいずれをも満足するものであり、次世代のアンチセンス分子として極めて有望であることを今回確認することができた。今後はこれらBNA-ODN類の細胞内移行性向上を検討すると共に、がん治療に向けた実践的検討を推進していく予定である。

Natural ODN molecule can be used in various situations, and the target mRNA can be combined with it. Compatibility and stability in vivo are not a problem and the effect is very good and the effect is expected.そのため、Chemical modification を Apply したODN の开発がである. I have successfully opened a new nucleic acid-like body (BNA) by fixing the bridging structure and fixing the sugar part three-dimensionally. This time, BNA imports したオリゴヌクレオチド(ODN) をkind々合成し、それらのアンチセンスmolecule としての Function Evaluation価を行なった. BNA modified ODN (BNA-ODN), complementary lock RNA and double lock formation can be usedところ, BNA-ODNは, and natural ODNやS-オリゴに are higher than those of べてはるかに and have higher re-locking ability.また、BNA-ODN type がヌクレアーゼに対するresistant に优れていること and びBNA modification degree をregulation する事でRNasc Hによる recognizes and receives, and the effect of にmRNA's cutting is possible and である事をconfirms. On the one hand, ICAM-1 is the target of BNA-ODN-type HUVEC cells, and the results are as follows.さらに、ODNの intracellular migrationをUpさせるためにDesignした intracellular migrationシグナルペプチド-BNA-ODNコンジュゲート体の合にも成した.アンチセンス法をがんtreatment, etc.へしていくには, target RNA に対する高いbinding affinity・It is necessary to create an ODN class with excellent alignment specificity and stability in vivo.また, ODN/RNA ヘテロ complex がRNAsc H により know をReceive け, RNA lock が cut されることもimportant な requisite としてあげられる.我々の开発したBNA-ODNは、そのいずれをも満満するものであり、Next Generation The のアンチセンスmolecule として extremely めて is expected to be confirmed this time することができた. From now on, it is planned to advance the progress of intracellular migration of BNA-ODN-type BNA-ODN-type cells and the progress of treatment.