人工ハイブリット型ユビキチン連結酵素による癌治療法の開発

使用人工杂交泛素结合酶开发癌症治疗方法

• 批准号: 15025258
• 负责人: 嘉村 巧
• 金额: $ 3.84万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15025258/
• 关键词: 癌遺伝子; たんぱく質分解

癌遺伝子産物の発現量を蛋白分解を促進することによって低下させるシステムを構築し、その臨床応用の可能性を検討することが本研究の目的である。そこで本研究においてはSCF型ユビキチン連結酵素の基質認識コンポーネントであるF-box蛋白と、癌遺伝子産物(ここでは代表例として活性化Ras)と結合することが知られている蛋白(Sos)とのハイブリッドF-box蛋白(F-box/Sosハイブリッド蛋白)を作成し、この人工ハイブリッド型ユビキチン連結酵素によってRasの分解に対する影響を検討している。現在までにこのF-box/Sosハイブリッドタンパク質が試験管内および細胞内で実際にSkp1やRasと結合することを確認している。また昆虫細胞で発現・精製したF-box/Sosハイブリッドタンパク質、Skp1、Cul1およびRbx1からなるE3ユビキチンリガーゼ複合体がE1、E2、およびユビキチンの存在下でRasのユビキチン化反応を再構成できることも確認している。そして活性化Rasの過剰発現によるトランスフォームに対する影響を検討しようとしているところである。転写因子などの調節蛋白質の多くはユビキチンプロテアゾーム系による蛋白分解によってその発現量が調節されているが、このユビキチン化の特徴は厳密な基質特異性が認められることである。そこで、この特異性の高いシステムを癌遺伝子産物に適応すれば、過剰蛋白のみを除去する方法となることが期待され、副作用が少ないという臨床応用で常に求められる課題をクリアできる方法であるといえる。この方法が確立されれば、結合蛋白が知られている癌遺伝子についてはすべて利用が可能であり、癌遺伝子の蛋白発現レベルでの新しい制御方法として大きな発展が期待される。

The aim of this study is to investigate the possibility of promoting proteolysis of oncogene products and their clinical application. In this study, we investigated the effects of F-box protein and oncogene products (e.g., activated Ras) on the production and degradation of SCF-type F-box protein (Sos) and F-box/Sos protein. Now we can confirm that the F-box/Sos is the best way to test Ras in vitro and in vivo. Insect cells develop, refine, and reconstitute F-box/Sos, Skp1, Cul1, and Rbx1 complexes in the presence of E1, E2, and Ras. The effects of activation of Ras on the development of the disease are discussed. The expression of regulatory proteins in the protein breakdown system is regulated by the characteristics of the regulatory proteins in the matrix. The high specificity of these proteins in cancer gene products is expected to reduce side effects and clinical use. This method has been established and is expected to be used in the development of new methods for the prevention and control of cancer protein expression.

项目成果

Kamura, T. et al.: "Degradation of p57^<KIP2> mediated by SCF^<Skp2>-dependent ubiquitylation"Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 100. 10231-10236 (2003)

Kamura, T. 等人：“SCF^<Skp2> 依赖性泛素化介导的 p57^<KIP2> 降解”Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 100. 10231-10236 (2003)

Imaki, H et al.: "Cell cycle-dependent regulation of the Skp2 promoter by GA-binding protein."Cancer Res.. 63. 4606-4613 (2003)

Imaki, H 等人：“GA 结合蛋白对 Skp2 启动子的细胞周期依赖性调节。”Cancer Res.. 63. 4606-4613 (2003)