個体内生細胞における電離放射線誘発突然変異の可視化と放射線応答修飾因子の探索

电离辐射引起的个体活细胞突变的可视化和辐射反应调节剂的探索

基本信息

  • 批准号:
    21241016
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 13.06万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
  • 财政年份:
    2009
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2009 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

放射線によるDNA損傷に対しては、DNA修復機構と細胞周期チェックポイント制御機構、損傷をもつ細胞を安全に排除するためのアポトーシス機構が協調して働いている。これに関わる遺伝子機能の多く同定されているが、個体レベルでの突然変異生成の組織特異性や、栄養条件や環境条件により放射線誘発突然変異生成にどのような差が生じるかについては今後の課題である。本年度は、個体内の生細胞を最終的対象するための解析モデルを作製することを目的として、以下の成果をえた。1)TetO-GFP/tetRシステム細胞モデルの作製tetracyclin operatorをプロモーター内に持つCMV-tetO-GFPユニットとTet repressorを導入したマウスとメダカ培養細胞(random integration)を作製した。フローサイトメーターを用いた実験から細胞の自然突然変異率と放射線誘発性の突然変異について計算する手法を開発した。2)ストレス応答を可視化するメダカ系統の作製ストレス誘導のかかるp21遺伝子のゲノム配列を解析し、発現制御領域を同定した。このプロモーターで制御されるGFP遺伝子を導入した培養細胞株を樹立し、放射線での発現誘導を確認した。3)遺伝子維持機構不全突然変異体メダカ系統の作製8-oxoGを除去するDNAグリコシラーゼ遺伝子であるOGG1遺伝子をノックアウトしたメダカを作製した。これらの成果は、本年度採択された基盤S研究で有効に活用される予定である。
DNA damage caused by radiation is mediated by DNA repair mechanisms and cell cycle control mechanisms. This is related to the multiple identity of gene functions, the tissue specificity of individual mutation, the nutrient conditions and environmental conditions, the radiation-induced mutation, and the future problems. This year, the final analysis of the production of cells in the body, the following results 1)TetO-GFP/tetR is introduced into the cell culture system to control random integration of CMV-tetO-GFP and Tet repressor. The method of calculating the sudden change in the natural rate of radiation induced emission is developed. 2) The system operation mode is visualized, and the system configuration is analyzed and the control field is determined. The GFP gene was introduced into cultured cell lines and the expression of GFP gene was confirmed by radiation. 3)The gene maintenance mechanism is incomplete, and the 8-oxoG gene is removed. The results of this year'S research are expected to be used.

项目成果

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  • 发表时间:
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  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
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  • 发表时间:
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  • 期刊:
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  • 作者:
    阿部 朋孝;石川 智子;増田 智浩;塚本 利朗;柳沢 忠;三谷 啓志;藤堂 剛;飯郷 雅之
  • 通讯作者:
    飯郷 雅之
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  • 通讯作者:
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  • 资助金额:
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  • 资助金额:
    $ 13.06万
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